多发性骨髓瘤细胞株ARH-77中L1逆转录酶基因的克隆、表达及其多克隆抗体制备
| 一 前言 | 第1-16页 |
| ·转位因子的分类 | 第11-12页 |
| ·L1的结构特点 | 第12-14页 |
| ·L1的逆转座作用 | 第14-16页 |
| 二 技术路线 | 第16-17页 |
| 三 材料与方法 | 第17-25页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-25页 |
| ·L1逆转录酶基因目的片段的PCR扩增 | 第18页 |
| ·PCR产物的回收与克隆 | 第18页 |
| ·菌落原位杂交 | 第18-19页 |
| ·DNA序列测定和L1 3＇端的扩增 | 第19页 |
| ·生物信息学分析 | 第19页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第19-21页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第21页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第21页 |
| ·融合蛋白表达产物的纯化 | 第21-22页 |
| ·抗L1融合蛋白多克隆抗体的制备 | 第22-23页 |
| ·抗血清中抗体的检测 | 第23-25页 |
| 四 结果 | 第25-37页 |
| ·L1逆转录酶基因的PCR扩增 | 第25页 |
| ·菌落原位杂交结果 | 第25-26页 |
| ·杂交阳性克隆的鉴定 | 第26-27页 |
| ·3＇-RACE结果 | 第27-28页 |
| ·生物信息学分析 | 第28-33页 |
| ·阳性重组表达质粒筛选结果 | 第33-34页 |
| ·L1融合蛋白的表达及纯化结果 | 第34-35页 |
| ·抗L1融合蛋白多克隆抗体的鉴定 | 第35-37页 |
| 五 讨论 | 第37-44页 |
| ·L1序列的克隆及其意义 | 第37-39页 |
| ·L1与DNA甲基化 | 第39-40页 |
| ·L1与X染色体失活 | 第40-41页 |
| ·L1与肿瘤的关系 | 第41-42页 |
| ·L1与多发性骨髓瘤中Ig重排 | 第42-44页 |
| 六 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 文献综述 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
