油茶优良无性系组织培养、RAPD分子鉴别和cDNA文库构建的研究
| 目录 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-26页 |
| 1 油茶组织培养研究进展 | 第9-11页 |
| 2 分子标记技术及其在植物遗传育种研究中的应用 | 第11-20页 |
| ·分子标记概念的界定 | 第11-12页 |
| ·常见DNA分子标记的种类 | 第12-17页 |
| ·基于分子杂交的分子标记 | 第12-13页 |
| ·基于PCR的分子标记 | 第13-15页 |
| ·PCR与RFLP相结合产生的分子标记 | 第15-16页 |
| ·新型分子标记 | 第16-17页 |
| ·分子标记技术及其在植物遗传育种研究中的应用 | 第17-20页 |
| ·遗传图谱的构建 | 第17-18页 |
| ·重要农艺性状基因的定位 | 第18页 |
| ·比较基因组研究 | 第18页 |
| ·遗传多样性 | 第18-19页 |
| ·数量性状位点定位 | 第19页 |
| ·品种鉴定 | 第19页 |
| ·染色体物理图谱的构建 | 第19页 |
| ·分子标记辅助选择育种 | 第19-20页 |
| ·研究基因表达与调控 | 第20页 |
| 3 cDNA文库构建研究进展 | 第20-24页 |
| ·cDNA文库定义 | 第20页 |
| ·cDNA文库构建的方法 | 第20-23页 |
| ·cDNA文库的主要应用 | 第23-24页 |
| 4 本项研究的立项依据、目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二部分 论文正文 | 第26-78页 |
| 1 油茶优良无性系组织培养 | 第26-40页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-27页 |
| ·外植体的消毒 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·外植体的培养方式 | 第26-27页 |
| ·再生植株RAPD遗传稳定性分析 | 第27页 |
| ·胚性愈伤组织和胚状体发生细胞学观察 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-33页 |
| ·消毒剂和消毒方式的确立 | 第27-28页 |
| ·腋芽组织培养的最佳激素组合 | 第28页 |
| ·不同的外源激素对子叶胚性愈伤组织诱导的影响 | 第28-29页 |
| ·不同基本培养基对胚性愈伤组织诱导的影响 | 第29-30页 |
| ·不同激素浓度对胚状体产生不定芽的影响 | 第30页 |
| ·不同的激素对油茶苗生根的影响 | 第30-31页 |
| ·不同浓度的NAA对油茶苗生根的影响 | 第31页 |
| ·再生植株的遗传稳定性 | 第31-32页 |
| ·油茶胚状体的主要形成过程 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-40页 |
| 2 油茶优良无性系RAPD分子鉴别 | 第40-60页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-45页 |
| ·油茶基因组DNA的提取 | 第41-42页 |
| ·DNA样品的测定 | 第42页 |
| ·PCR模板的制备 | 第42页 |
| ·RAPD反应体系的优化 | 第42页 |
| ·引物的筛选 | 第42-43页 |
| ·PCR反应体系和扩增程序 | 第43页 |
| ·扩增产物的电泳 | 第43-44页 |
| ·RAPD电泳谱带的记录 | 第44-45页 |
| ·实验结果与分析 | 第45-58页 |
| ·供试材料基因组DNA提取 | 第45-46页 |
| ·RAPD反应体系的建立 | 第46-49页 |
| ·引物筛选的结果 | 第49-51页 |
| ·油茶无性系RAPD扩增结果 | 第51页 |
| ·无性系分子鉴别 | 第51-52页 |
| ·DNA多态性分析 | 第52-55页 |
| ·基于相似性系数的遗传关系分析 | 第55页 |
| ·RAPD聚类分析 | 第55-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 3 油茶优良无性系cDNA文库构建 | 第60-77页 |
| ·实验材料 | 第60-61页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·主要仪器设备和试剂 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-70页 |
| ·RNA的提取 | 第61-62页 |
| ·RNA浓度及纯度测定 | 第62页 |
| ·RNA尿素变性琼脂糖凝胶电泳 | 第62-63页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第63-64页 |
| ·mRNA浓度、纯度及电泳测定 | 第64页 |
| ·cDNA的合成 | 第64-67页 |
| ·cDNA文库的制备及保存 | 第67页 |
| ·cDNA文库质量测定 | 第67-68页 |
| ·cDNA文库重组克隆插入片段的大小测定 | 第68-70页 |
| ·实验结果与分析 | 第70-73页 |
| ·总RNA和mRNA浓度和纯度测定 | 第70-71页 |
| ·柱层析后纯化效果分析 | 第71页 |
| ·cDNA与质粒载体最佳比例 | 第71-72页 |
| ·cDNA文库库容量 | 第72页 |
| ·cDNA文库的重组率 | 第72页 |
| ·cDNA克隆片段长度 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-77页 |
| 4 本研究的创新点 | 第77-78页 |
| 主要参考文献 | 第78-88页 |
| ABSTRACT | 第88-90页 |
| 附录 | 第90-98页 |
| 致谢 | 第98页 |