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建立盐藻遗传转化系统的研究

第一部分 综述第1-48页
 第一章 盐藻(Dunaliella salina)研究进展第6-25页
   ·引言第6-7页
   ·盐藻的分子生物学研究第7-17页
     ·盐藻耐受盐胁迫分子机制的研究第7-13页
     ·盐藻突变体的分离鉴定研究第13-14页
     ·光胁迫的研究第14-16页
     ·类胡萝卜素合成相关的研究第16-17页
   ·盐藻代谢产物合成的研究第17-20页
   ·建立盐藻遗传转化系统的研究第20页
  参考文献第20-25页
 第二章 莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)遗传转化研究进展第25-48页
   ·引言第26-28页
   ·核基因组转化研究第28-38页
     ·内源互补基因第30-32页
       ·精氨酸裂解酶基因第30-31页
       ·硝酸还原酶基因第31-32页
     ·内源抗性筛选标记基因第32-33页
       ·CRY1 基因第32-33页
       ·乙酰乳酸合成酶基因第33页
     ·外源抗性筛选标记基因第33-36页
       ·氨基糖苷磷酸转移酶基因第33-34页
       ·ble 基因第34-35页
       ·氨基3’腺苷转移酶基因第35-36页
     ·转化方法第36-37页
     ·报道基因第37-38页
   ·遗传转化系统的应用第38-41页
     ·启动子的分析和改善第38-39页
     ·插入突变筛选基因第39页
     ·核基因组同源重组的研究第39-41页
  参考文献第41-48页
第二部分 研究论文第48-105页
 第一章 外源ble 基因在电击转化盐藻中的表达第48-66页
   ·介绍第48-50页
   ·材料和方法第50-52页
     ·细胞及培养方法第50页
     ·质粒及其制备第50页
     ·电击方法第50-51页
     ·细胞存活效率检测第51页
     ·DNA 分析第51页
     ·RNA 提取和RT-PCR 分析第51-52页
   ·结果第52-59页
     ·电场强度和电击缓冲液离子强度对电击细胞存活的影响第52-53页
     ·盐藻细胞对zeocin 敏感程度的检测第53-54页
     ·ble 基因在盐藻中的滞留和表达第54-56页
     ·Zeocin 抗性转化子稳定性检测第56-57页
     ·抗性转化子中ble 基因的存在状态第57-59页
   ·讨论第59-62页
   ·参考文献第62-66页
 第二章 盐藻硝酸还原酶基因的筛选和鉴定第66-84页
   ·介绍第66-68页
   ·材料和方法第68-70页
     ·细胞及培养条件第68页
     ·文库的筛选第68-69页
     ·DNA 和RNA 分析第69页
     ·衣藻遗传转化第69-70页
   ·结果第70-78页
     ·盐藻硝酸还原酶cDNA 和基因的筛选第70-75页
     ·硝酸还原酶基因的诱导表达情况第75-76页
     ·转化载体pUCNRT1245 的构建第76-77页
     ·莱茵衣藻的转化和互补表达第77-78页
   ·讨论第78-80页
   ·参考文献第80-84页
 第三章 盐藻硝酸还原酶基因缺失突变体的筛选鉴定和互补转化第84-105页
   ·介绍第84-86页
   ·材料和方法第86-89页
     ·细胞及培养条件第86-87页
     ·MNNG 诱变盐藻筛选硝酸还原缺陷突变体的方法第87页
     ·盐藻硝酸还原酶活性测定方法第87-88页
     ·DNA 和RNA 分析第88-89页
   ·结果第89-100页
     ·盐藻硝酸还原缺陷突变体的筛选和初步鉴定第89-93页
     ·突变体的分子鉴定第93页
     ·突变缺失区域的序列分析第93-96页
     ·pDSNR 在突变体中的互补表达第96-100页
   ·讨论第100-102页
     ·硝酸还原酶突变体的筛选第100-101页
     ·硝酸还原酶基因缺陷突变体的鉴定第101-102页
     ·功能互补转化子的鉴定和分析第102页
   ·参考文献第102-105页
第三部分 结论第105-107页
发表文章目录第107-108页
致谢第108页

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