第一部分 综述 | 第1-48页 |
第一章 盐藻(Dunaliella salina)研究进展 | 第6-25页 |
·引言 | 第6-7页 |
·盐藻的分子生物学研究 | 第7-17页 |
·盐藻耐受盐胁迫分子机制的研究 | 第7-13页 |
·盐藻突变体的分离鉴定研究 | 第13-14页 |
·光胁迫的研究 | 第14-16页 |
·类胡萝卜素合成相关的研究 | 第16-17页 |
·盐藻代谢产物合成的研究 | 第17-20页 |
·建立盐藻遗传转化系统的研究 | 第20页 |
参考文献 | 第20-25页 |
第二章 莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)遗传转化研究进展 | 第25-48页 |
·引言 | 第26-28页 |
·核基因组转化研究 | 第28-38页 |
·内源互补基因 | 第30-32页 |
·精氨酸裂解酶基因 | 第30-31页 |
·硝酸还原酶基因 | 第31-32页 |
·内源抗性筛选标记基因 | 第32-33页 |
·CRY1 基因 | 第32-33页 |
·乙酰乳酸合成酶基因 | 第33页 |
·外源抗性筛选标记基因 | 第33-36页 |
·氨基糖苷磷酸转移酶基因 | 第33-34页 |
·ble 基因 | 第34-35页 |
·氨基3’腺苷转移酶基因 | 第35-36页 |
·转化方法 | 第36-37页 |
·报道基因 | 第37-38页 |
·遗传转化系统的应用 | 第38-41页 |
·启动子的分析和改善 | 第38-39页 |
·插入突变筛选基因 | 第39页 |
·核基因组同源重组的研究 | 第39-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
第二部分 研究论文 | 第48-105页 |
第一章 外源ble 基因在电击转化盐藻中的表达 | 第48-66页 |
·介绍 | 第48-50页 |
·材料和方法 | 第50-52页 |
·细胞及培养方法 | 第50页 |
·质粒及其制备 | 第50页 |
·电击方法 | 第50-51页 |
·细胞存活效率检测 | 第51页 |
·DNA 分析 | 第51页 |
·RNA 提取和RT-PCR 分析 | 第51-52页 |
·结果 | 第52-59页 |
·电场强度和电击缓冲液离子强度对电击细胞存活的影响 | 第52-53页 |
·盐藻细胞对zeocin 敏感程度的检测 | 第53-54页 |
·ble 基因在盐藻中的滞留和表达 | 第54-56页 |
·Zeocin 抗性转化子稳定性检测 | 第56-57页 |
·抗性转化子中ble 基因的存在状态 | 第57-59页 |
·讨论 | 第59-62页 |
·参考文献 | 第62-66页 |
第二章 盐藻硝酸还原酶基因的筛选和鉴定 | 第66-84页 |
·介绍 | 第66-68页 |
·材料和方法 | 第68-70页 |
·细胞及培养条件 | 第68页 |
·文库的筛选 | 第68-69页 |
·DNA 和RNA 分析 | 第69页 |
·衣藻遗传转化 | 第69-70页 |
·结果 | 第70-78页 |
·盐藻硝酸还原酶cDNA 和基因的筛选 | 第70-75页 |
·硝酸还原酶基因的诱导表达情况 | 第75-76页 |
·转化载体pUCNRT1245 的构建 | 第76-77页 |
·莱茵衣藻的转化和互补表达 | 第77-78页 |
·讨论 | 第78-80页 |
·参考文献 | 第80-84页 |
第三章 盐藻硝酸还原酶基因缺失突变体的筛选鉴定和互补转化 | 第84-105页 |
·介绍 | 第84-86页 |
·材料和方法 | 第86-89页 |
·细胞及培养条件 | 第86-87页 |
·MNNG 诱变盐藻筛选硝酸还原缺陷突变体的方法 | 第87页 |
·盐藻硝酸还原酶活性测定方法 | 第87-88页 |
·DNA 和RNA 分析 | 第88-89页 |
·结果 | 第89-100页 |
·盐藻硝酸还原缺陷突变体的筛选和初步鉴定 | 第89-93页 |
·突变体的分子鉴定 | 第93页 |
·突变缺失区域的序列分析 | 第93-96页 |
·pDSNR 在突变体中的互补表达 | 第96-100页 |
·讨论 | 第100-102页 |
·硝酸还原酶突变体的筛选 | 第100-101页 |
·硝酸还原酶基因缺陷突变体的鉴定 | 第101-102页 |
·功能互补转化子的鉴定和分析 | 第102页 |
·参考文献 | 第102-105页 |
第三部分 结论 | 第105-107页 |
发表文章目录 | 第107-108页 |
致谢 | 第108页 |