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红豆杉细胞对紫杉醇防御响应的机理研究

中文摘要第1-3页
ABSTRACT第3-9页
前言第9-11页
第一章 文献综述第11-28页
   ·植物细胞防御反应第11-20页
     ·植物细胞对诱导刺激的应答反应第11-17页
     ·植物防御反应中的细胞程序化死亡第17-20页
   ·防御反应与次生代谢第20-24页
     ·防御反应中的植保素的合成第20页
     ·防御反应与诱导子第20-21页
     ·防御反应与植物细胞凋亡第21页
     ·防御反应与次生代谢产物的关系第21-23页
     ·防御反应与紫杉醇第23-24页
   ·DMSO 和乙醇对细胞生理生化的影响第24-26页
     ·对细胞活性氧的水平的影响第24-25页
     ·对酶活性的影响第25页
     ·对细胞膜通透性的影响第25-26页
   ·本文研究意义及主要研究内容第26-28页
第二章 DMSO 与乙醇对红豆杉细胞生物学的影响第28-39页
   ·材料与方法第28-31页
     ·试剂第28页
     ·培养条件第28-29页
     ·蛋白质含量的测定第29页
     ·酶反应液的提取与测定第29页
     ·生物量的测定第29-30页
     ·细胞活力的测定第30页
     ·DNA 的提取与分离第30页
     ·实验设计与数据处理第30-31页
   ·结果第31-36页
     ·对POD、SOD 酶活性的短期影响第31-32页
     ·对细胞生物量的影响第32-33页
     ·对细胞活力的影响第33-34页
     ·对细胞胞内外蛋白含量的影响第34-36页
     ·对DNA 降解的作用第36页
   ·讨论第36-38页
   ·小结第38-39页
第三章 DMSO 和乙醇对红豆杉细胞膜通透性的影响第39-47页
   ·材料和方法第39-41页
     ·试剂第39页
     ·细胞株系和培养条件第39页
     ·胞外pH 值的测定第39页
     ·电导率的测定第39-40页
     ·脂类的过氧化反应第40页
     ·细胞膜完整性的测定第40页
     ·实验设计第40-41页
   ·结果与讨论第41-45页
     ·对细胞培养介质pH 的影响第41-42页
     ·对脂类过氧化反应的影响第42-43页
     ·对介质电导率的影响第43-45页
     ·对细胞膜完整性的影响第45页
   ·小结第45-47页
第四章 Taxol 和taxotere 对红豆杉细胞代谢的影响第47-59页
   ·材料与方法第47-50页
     ·试剂第47页
     ·细胞株系及其培养第47-48页
     ·Taxol 与taxotere 母液的配制第48页
     ·细胞生物量的测定..第48页
     ·蛋白质含量的测定第48页
     ·细胞活力的测定第48页
     ·PAL 酶的提取与活性测定第48页
     ·Taxol 和taxotere 的提取及测定第48-49页
     ·PI-Hoechst 33342 双重染色及荧光显微镜观察第49页
     ·Taxol 与taxotere 诱导开始时刻的确立第49-50页
     ·实验设计第50页
   ·实验结果第50-56页
     ·对生物量的影响第50-51页
     ·对细胞活力的影响第51-52页
     ·对胞内可溶性蛋白含量的影响第52页
     ·对细胞形态的影响第52-55页
     ·对PAL 酶活的影响第55页
     ·Taxotere 对细胞合成紫杉醇的影响第55-56页
   ·讨论第56-58页
   ·小结第58-59页
第五章 紫杉醇跨膜运输机制的研究第59-66页
   ·材料与方法第59-60页
     ·试剂第59页
     ·细胞株系和培养条件..第59页
     ·Taxol 与taxotere 母液的配制第59页
     ·Taxol 和taxotere 的提取及测定第59-60页
     ·实验设计第60页
   ·结果第60-63页
     ·Taxol 和taxotere 在培养基中的稳定性第60-61页
     ·胞外taxol 和taxotere 含量的变化第61-62页
     ·胞内taxol 和taxotere 含量的变化第62-63页
     ·膜通透性的改变对释放taxol 的影响第63页
   ·讨论第63-65页
   ·小结第65-66页
第六章 红豆杉细胞对taxol 和taxotere 防御响应机制的研究第66-80页
   ·材料与方法第66-68页
     ·试剂第66页
     ·细胞株系及培养条件第66-67页
     ·胞外介质pH 的测定第67页
     ·胞内总活性氧(ROS)含量的监测第67页
     ·酶液的提取和酶活的测定第67页
     ·蛋白质的提取与二维凝胶电泳第67-68页
     ·实验设计第68页
   ·结果第68-75页
     ·对红豆杉细胞离子流的影响第68-69页
     ·对活性氧产生的影响第69-70页
     ·taxol 和taxotere 诱导细胞产生活性氧的机制第70-73页
     ·Taxol 对红豆杉细胞蛋白水平的影响第73-75页
   ·讨论第75-78页
   ·小结第78-80页
第七章 结论与展望第80-82页
   ·结论第80-81页
   ·展望第81-82页
参考文献第82-97页
发表论文和参加科研情况第97-98页
附录第98-99页
致谢第99页

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