摘要 | 第1-20页 |
第一章 文献综述 | 第20-34页 |
·百合科植物的起源与分布 | 第20-21页 |
·百合的起源与分布 | 第20-21页 |
·中国百合的分布 | 第21页 |
·百合的经济意义 | 第21-23页 |
·百合的食用价值 | 第21-22页 |
·百合的药用价值 | 第22页 |
·百合的观赏价值 | 第22-23页 |
·百合切花生产市场现状与市场前景 | 第23-24页 |
·百合切花生产的现状 | 第23页 |
·中国的百合切花生产 | 第23-24页 |
·百合病毒研究进展 | 第24-29页 |
·百合无症病毒的研究进展 | 第24-25页 |
·侵染百合的黄瓜花叶病毒 | 第25-26页 |
·侵染百合的Potyvirus | 第26-28页 |
·侵染百合的Potexvirus | 第28页 |
·其它侵染百合的植物病毒 | 第28-29页 |
·侵染百合的植原体 | 第29页 |
·植物病毒的检测方法 | 第29-33页 |
·生物学测定 | 第31页 |
·病毒粒子特性测定 | 第31页 |
·电子显微镜技术 | 第31页 |
·血清学方法 | 第31-32页 |
·分子生物学技术 | 第32-33页 |
·PCR和RT-PCR检测技术 | 第32页 |
·dsRNA检测技术 | 第32页 |
·核酸杂交检测技术 | 第32-33页 |
·研究内容和目标 | 第33-34页 |
·研究内容 | 第33页 |
·预期目标 | 第33-34页 |
第二章 百合病毒病的调查与病原分析 | 第34-46页 |
·材料与方法 | 第34-37页 |
·毒源采集与保存 | 第34页 |
·病毒基因组双链RNA分析 | 第34-35页 |
·ELISA实验步骤 | 第35-36页 |
·病毒提纯 | 第36页 |
·病毒形态学与组织病变观察 | 第36-37页 |
·提纯病毒粒子的观察 | 第36页 |
·病毒粒子的负染检测 | 第36-37页 |
·组织病变观察 | 第37页 |
·结果与分析 | 第37-43页 |
·百合病毒病的田间症状 | 第37-38页 |
·ELISA检测结果 | 第38-41页 |
·dsRNA分析结果 | 第41页 |
·寄主反应测定结果 | 第41-42页 |
·病毒形态学观察结果 | 第42-43页 |
·病毒粒子形状 | 第42-43页 |
·内含体特征 | 第43页 |
·小结与讨论 | 第43-46页 |
第三章 百合CMV CP基因克隆和序列分析 | 第46-58页 |
·材料和方法 | 第46-50页 |
·病毒分离物 | 第46-47页 |
·酶与试剂 | 第47页 |
·引物设计 | 第47页 |
·病毒RNA模板的制备 | 第47页 |
·RT-PCR和cDNA合成 | 第47页 |
·PCR扩增 | 第47-48页 |
·PCR产物回收 | 第48页 |
·DNA片段的连接 | 第48-49页 |
·感受态细胞的制备 | 第49页 |
·重组质粒的转化 | 第49页 |
·重组质粒DNA制备 | 第49-50页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第50页 |
·DNA测序和序列同源性比较 | 第50页 |
·结果分析 | 第50-56页 |
·cDNA的克隆结果 | 第50-51页 |
·百合CMV的序列分析 | 第51-53页 |
·不同CMV分离物CP核苷酸序列分析 | 第53-55页 |
·不同CMV分离物CP氨基酸序列分析 | 第55-56页 |
·小结与讨论 | 第56-58页 |
第四章 百合斑驳病毒基因组3′-末端序列分析 | 第58-70页 |
·材料和方法 | 第58-60页 |
·病毒分离物 | 第58页 |
·酶与试剂 | 第58页 |
·引物设计 | 第58-59页 |
·病毒RNA模板的制备 | 第59页 |
·RT-PCR和cDNA合成 | 第59页 |
·PCR扩增 | 第59-60页 |
·PCR产物回收 | 第60页 |
·DNA片段的连接 | 第60页 |
·感受态细胞的制备 | 第60页 |
·重组质粒的转化 | 第60页 |
·重组质粒DNA的制备 | 第60页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第60页 |
·DNA测序和序列同源性比较 | 第60页 |
·结果分析 | 第60-68页 |
·LMoV3′-末端序列的克隆 | 第60-61页 |
·LMoV分离物的序列分析 | 第61-63页 |
·侵染百合与郁金香的Potyvirus CP基因核苷酸序列分析 | 第63-65页 |
·侵染百合与郁金香的Potyvirus CP氨基酸序列分析 | 第65-66页 |
·侵染百合与郁金香的Potyvirus NIb基因核苷酸序列分析 | 第66-67页 |
·侵染百合与郁金香的Potyvirus NIb氨基酸序列分析 | 第67-68页 |
·侵染百合与郁金香的Potyvirus3′-UTR序列分析 | 第68页 |
·小结与讨论 | 第68-70页 |
第五章 百合无症病毒分子鉴定与检测 | 第70-83页 |
·材料和方法 | 第70-75页 |
·病毒分离物 | 第70页 |
·酶与试剂 | 第70页 |
·引物设计 | 第70-71页 |
·病毒RNA模板的制备 | 第71页 |
·RT-PCR和cDNA合成 | 第71页 |
·PCR反应和目标片段的扩增 | 第71页 |
·PCR产物低融点胶回收 | 第71页 |
·DNA片段的连接 | 第71页 |
·感受态细胞的制备 | 第71-72页 |
·重组质粒的转化 | 第72页 |
·重组质粒DNA的制备(碱裂解法) | 第72页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第72页 |
·DNA测序和序列同源性比较 | 第72页 |
·植物总RNA的提取 | 第72页 |
·LSV的膜杂交检测 | 第72-73页 |
·RNA样品的变性和点样 | 第72-73页 |
·杂交反应 | 第73页 |
·预杂交 | 第73页 |
·~(32)P标记DNA探针的制备 | 第73页 |
·杂交反应和洗膜 | 第73页 |
·LSV的芯片杂交检测 | 第73-75页 |
·RNA样品的变性和点样 | 第73-74页 |
·杂交反应 | 第74-75页 |
·预杂交 | 第74页 |
·Cy5标记DNA探针的制备 | 第74页 |
·杂交反应、洗膜和扫描 | 第74-75页 |
·结果分析 | 第75-81页 |
·LSV3′-末端序列cDNA的克隆 | 第75-76页 |
·LSV CP基因核苷酸序列分析结果 | 第76-77页 |
·LSV CP氨基酸序列分析结果 | 第77-78页 |
·LSV 16kDa蛋白基因序列分析结果 | 第78页 |
·LSV 16KDa蛋白氨基酸序列分析结果 | 第78-79页 |
·LSV的RNA斑点杂交检测 | 第79-81页 |
·小结与讨论 | 第81-83页 |
第六章 侵染百合的李坏死环斑病毒 | 第83-93页 |
·材料和方法 | 第83-85页 |
·病毒分离物 | 第83页 |
·酶与试剂 | 第83页 |
·引物设计 | 第83-84页 |
·病毒RNA模板的制备 | 第84页 |
·RT-PCR和cDNA合成 | 第84页 |
·PCR反应和目标片段的扩增 | 第84页 |
·PCR产物低融点胶回收 | 第84页 |
·DNA片段的连接 | 第84页 |
·感受态细胞的制备 | 第84页 |
·重组质粒的转化 | 第84-85页 |
·重组质粒DNA的制备(碱裂解法) | 第85页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第85页 |
·DNA测序和序列同源性比较 | 第85页 |
·PNRSV的膜杂交检测 | 第85页 |
·RNA样品的变性和点样 | 第85页 |
·杂交反应 | 第85页 |
·预杂交 | 第85页 |
·~(32)P标记DNA探针的制备 | 第85页 |
·杂交反应和洗膜 | 第85页 |
·结果分析 | 第85-91页 |
·PNRSV CP基因cDNA克隆 | 第85-87页 |
·PNRSV CP基因序列分析 | 第87页 |
·PNRSV CP基因氨基酸序列分析 | 第87页 |
·PNRSV杂交检测结果 | 第87-91页 |
·小结与讨论 | 第91-93页 |
总讨论 | 第93-101页 |
附件1: 溶液配制 | 第101-103页 |
附件2: 在读硕士期间的研究论文 | 第103页 |
附件3: 在读硕士期间申请专利与鉴定成果 | 第103页 |