| Ⅰ 主要英文缩写表 | 第1-9页 |
| Ⅱ 中英文摘要 | 第9-17页 |
| Ⅲ 前言 | 第17-20页 |
| Ⅳ 材料与方法 | 第20-32页 |
| 一、 试剂与材料 | 第20-22页 |
| 二、 实验方法 | 第22-32页 |
| 1 新生大鼠OECs的原代培养 | 第22页 |
| 2 成年大鼠OECs的原代培养 | 第22页 |
| 3 OECs的纯化 | 第22页 |
| 4 免疫细胞荧光染色 | 第22-23页 |
| 5 ABC法免疫细胞组化染色 | 第23页 |
| 6 OECs的标记移植 | 第23页 |
| 7 脊髓半横断损伤模型的建立 | 第23-24页 |
| 8 辣根过氧化物酶逆行示踪技术标记皮质、红核细胞 | 第24页 |
| 9 行为学评定 | 第24-26页 |
| 10 ELASA测定培养细胞上清中GDNF的含量 | 第26-27页 |
| 11 细胞存活和增殖实验 | 第27-28页 |
| 12 抽提细胞中的总RNA | 第28页 |
| 13 RT-PCR反应 | 第28-29页 |
| 14 脂质体法转染DNA | 第29-30页 |
| 15 G418筛选阳性克隆 | 第30页 |
| 16 病毒滴度的测定 | 第30页 |
| 17 重组逆转录病毒感染靶细胞 | 第30-31页 |
| 18 计算机图像分析和统计学处理 | 第31-32页 |
| Ⅴ 结果 | 第32-71页 |
| 一、 不同来源大鼠OECs的体外培养活性和纯化方法比较 | 第32-35页 |
| 1 OECs形态学和活力的观察 | 第32-34页 |
| 2 OECs细胞化学染色及纯度检测 | 第34-35页 |
| 二、 OECs与GDNF联合治疗脊髓损伤 | 第35-48页 |
| 1 建立脊髓半横断损伤模型 | 第35-36页 |
| 2 手术分组及移植OECs的标记 | 第36-39页 |
| 3 OECs和GDNF可促进大鼠脊髓损伤后轴突的再生 | 第39-44页 |
| 4 OECs和GDNF对大鼠脊髓损伤后神经元具有逆行性保护作用 | 第44-46页 |
| 5 OECs和GDNF对脊髓损伤大鼠行为学的改善作用 | 第46-48页 |
| 三、 外源性GDNF对体外培养的OECs具有促存活的作用及其可能机制 | 第48-57页 |
| 1 OECs上清中GDNF的含量甚微 | 第48页 |
| 2 外源性GDNF可促进体外培养的OECs存活，但不影响增殖 | 第48-51页 |
| 3 GDNF促进OECs存活的可能机制 | 第51-56页 |
| 4 RT-PCR显示OECs上面仅表达GFRα1，而不表达Ret | 第56-57页 |
| 四、 OECs-GDNF基因工程细胞对脊髓损伤的治疗作用 | 第57-71页 |
| 1 双拷贝逆转录病毒载体pN2A-GDNF的构建 | 第57-58页 |
| 2 构建PA317-GDNF包装细胞 | 第58-60页 |
| 3 获得高表达GDNF的OECs工程细胞 | 第60页 |
| 4 OECs-GDNF可以分泌有活性的GDNF | 第60-63页 |
| 5 动物分组及OECs-GDNF移植后存活检测 | 第63-64页 |
| 6 OECs-GDNF移植促进大鼠脊髓损伤后轴突再生 | 第64-68页 |
| 7 OECs-GDNF移植对大鼠脊髓损伤后神经元具有逆行性保护作用 | 第68-69页 |
| 8 OECs-GDNF移植对大鼠脊髓损伤后行为学的改善作用 | 第69-71页 |
| Ⅵ 讨论 | 第71-80页 |
| 一、 OECs的纯化、存活与增殖 | 第71-72页 |
| 二、 建立脊髓半横断损伤模型 | 第72-73页 |
| 三、 GDNF促进脊髓损伤修复 | 第73-74页 |
| 四、 OECs与GDNF在联合治疗脊髓损伤修复中的协同作用 | 第74-75页 |
| 五、 GDNF促进OECs存活的机制研究 | 第75-77页 |
| 六、 基因治疗中基因载体的选择 | 第77-78页 |
| 七、 基因治疗中移植细胞的选择 | 第78-79页 |
| 八、 GDNF基因修饰的OECs治疗大鼠脊髓半横断损伤 | 第79-80页 |
| Ⅶ 总结 | 第80-81页 |
| Ⅷ 参考文献 | 第81-88页 |
| Ⅸ 致谢 | 第88-89页 |
| Ⅹ 综述 | 第89-100页 |
| XIV 攻读博士学位期间的主要业务工作 | 第100-101页 |
