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根癌农杆菌介导的雪花莲凝集素基因转入新疆甜瓜的研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-8页
缩写词第8-9页
引言第9-11页
文献综述第11-24页
1 实验材料及设备第24-25页
 1.1 实验材料第24页
  1.1.1 植物材料第24页
  1.1.2 实验菌株第24页
 1.2 主要试剂第24-25页
 1.3 主要仪器及设备第25页
2 实验方法第25-29页
 2.1 甜瓜离体再生体系的建立第25-26页
  2.1.1 不定芽的诱导第25-26页
  2.1.2 不定芽的伸长第26页
  2.1.3 完整再生植株的获得第26页
  2.1.4 试管苗的茎段快繁第26页
  2.1.5 试管苗的移栽第26页
 2.2 根癌农杆菌介导的遗传转化第26-27页
  2.2.1 转化材料的准备第26页
  2.2.2 抗生素种类及浓度的确定第26页
  2.2.3 工程菌液的制备第26-27页
  2.2.4 甜瓜叶盘转化及抗Kan再生植株的获得第27页
 2.3 转基因植株的检测第27-29页
  2.3.1 转化株抗Kan检测第27-28页
  2.3.2 GUS酶活性检测第28页
  2.3.3 甜瓜再生苗的PCR分析第28-29页
   2.3.3.1 PCR扩增样品的制备第28页
   2.3.3.2 转基因甜瓜的PCR分析第28-29页
  2.3.4 转化植株的饲虫试验第29页
3 结果与分析第29-40页
 3.1 甜瓜离体再生体系的建立第29-34页
  3.1.1 不定芽的诱导第29-32页
   3.1.1.1 最佳外植体的确定第29-31页
   3.1.1.2 基本培养基和激素对不定芽诱导的影响第31-32页
   3.1.1.3 AgNO3及暗处理对不定芽分化的影响第32页
  3.1.2 不定芽的伸长第32页
  3.1.3 不定根的发生第32-33页
  3.1.4 试管苗的茎段快繁第33页
  3.1.5 试管苗的移栽第33-34页
 3.2 农杆菌介导的遗传转化第34-39页
  3.2.1 工程菌液的获得第34页
  3.2.2 乙酰丁香酮(AS)的作用第34页
  3.2.3 卡那霉素的敏感型试验第34-36页
  3.2.4 脱菌用的抗生素种类和浓度的抑菌效果及对外植体分化的影响第36-38页
  3.2.5 浸染时间及共培养时间的确定第38页
  3.2.6 GA3对转化芽伸长的作用第38-39页
  3.2.7 抗Kan完整植株的再生第39页
 3.3 转化植株的检测第39-40页
  3.3.1 转化株的Kan抗性检测第39页
  3.3.2 GUS基因在转基因甜瓜中的表达第39-40页
  3.3.3 转基因甜瓜的PCR分析第40页
  3.3.4 转基因甜瓜饲蚜初试第40页
4. 讨论第40-43页
 4.1 高效稳定离体再生体系的建立第40页
 4.2 暗期培养对不定芽分化的影响第40-41页
 4.3 AgNO_3对不定芽诱导的影响的影响第41页
 4.4 菌液处理对甜瓜转化的影响第41页
 4.5 AS、共培养方式及预培养对转化效率的影响第41-42页
 4.6 GUS基因活性表达第42-43页
5. 结论第43-44页
6. 参考文献第44-50页
7. 图版第50-56页

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