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一组新的胃癌中性糖脂糖蛋白抗原的纯化鉴定及其在临床诊断中应用的实验研究

一、论文摘要第1-8页
Abstract第8-11页
二、引言第11-12页
三、文献回顾第12-23页
四、材料与方法第23-43页
 (一) 单克隆抗体的纯化及其鉴定第26页
 (二) 单克隆抗体—酶、荧光素、同位素、标记物的制备第26-27页
 (三) 亲和层析吸附剂的制备第27-28页
  1.McAb-Sepharose4B免疫吸附剂制备第27-28页
  2.ConA-Sepharose4B亲和吸附剂制备第28页
  3.羊抗鼠IgG-Agarose免疫吸附剂制备第28页
  4.亲和吸附刹的鉴定第28页
 (四) 胃癌组织可溶性抗原提取液的制备第28-30页
  1.胞浆、胞膜抗原及胞核抗原的制备及检测第28-29页
  2.总脂、中性糖脂及酸性糖脂的分离提取第29-30页
  3.胃癌可溶性抗原提取液中鞘糖脂分离方法的建立第30页
 (五) MG单抗相应抗原理化特性分析及组织内分布第30-32页
  1.鞘糖脂抗原的定性分析第30-31页
  2.外源性凝集素结合试验第31页
  3.抗原的热稳定性试验第31页
  4.癌组织及正常粘膜中MG相应抗原的分布第31-32页
 (六) MGd1、MGe1、MG5、MG9、MGc1、MGb1相应抗原的纯化第32-34页
  1.Sepharose 4B过滤第32-33页
  2.ConA-Sepharose 4B亲和层析第33页
  3.MG-Sepharose 4B免疫亲和层析第33页
  4.羊抗鼠IgG-Agarose免疫过滤第33页
  5.Sepharcryl S300层析第33-34页
 (七) 抗原的鉴定第34-38页
  1.抗原的免疫活性检测第34-35页
  2.抗原决定簇位置的初步分析第35页
  3.脂蛋白染色分析第35页
  4.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定第35-36页
  5.转移电泳、免疫印渍分析第36-37页
  6.高效薄层色谱层析分析第37页
  7.抗原氨基酸组成分析第37页
  8.MG-Ags与CEA、AFP、P21及常见肿瘤抗原的关系第37-38页
   (1) AFP、CEA放射免疫交叉试验第37页
   (2) P21酶联免疫分析第37-38页
   (3) MGd1-Ag与MG7-Ag的关系第38页
   (4) MG-Ags与Tn、Le~x、Le~y及涎酸化Le~x抗原的关系第38页
 (八) 血清、胃液、胸腹水中MG—Ag的检测及意义第38-43页
  1.研究对象第38-40页
  2.MG微球免疫荧光定性诊断方法的建立及初步应用第40页
  3.MG微球荧光计量诊断方法的建立及初步应用第40-41页
  4.ConA-McAb ELISA法的建立及在血清诊断中的应用第41页
  5.MG微球EL ISA(试管)法的建立及应用第41-42页
  6.MG-Ags检测在人群普查中的试用第42-43页
五、实验结果第43-81页
六、讨论第81-96页
 (一) 免疫吸附剂的制备及其在抗原纯化中应用第81-85页
  1.单克隆抗体偶联条件的选择第82页
  2.抗原、抗体解离条件的选择第82-83页
  3.抗原提取液的亲和提取次数第83页
  4.亲和层析中如何鉴定亲和吸附剂的活性第83-84页
  5.非有机相分离免疫亲和纯化胃癌中性糖脂方法的建立及意义第84-85页
 (二) 关于MG单抗相应抗原的理化特性分析第85-87页
  1.MG-Ags的分布特点第85-86页
  2.MG-Ags糖苷链类型判定第86-87页
  3.MG9、MG5、MGd1-Ags是一组新的胃癌相关抗原第87页
 (三) MG-Ags检测方法的建立及意义第87-89页
 (四) MG-Ags检测的临床意义第89-96页
  1.MG-Ags检测对消化道肿瘤诊断价值第89页
  2.MG-Ags检测与CEA的关系第89-91页
  3.血清中MG-Ags的表达与手术治疗的关系第91-92页
  4.血清、体液中MG-Ags的表达关系第92-94页
  5.MG-Ags表达及其与病理分型的关系第94-96页
七、小结第96-97页
八、附录第97-105页
 1.发表论文题录第97-101页
 2.致谢第101-102页
 3.国际微机检索材料第102-104页
 4.本研究成果及部分论文获奖情况第104-105页
九、参考文献第105-116页

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