一、论文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
二、引言 | 第11-12页 |
三、文献回顾 | 第12-23页 |
四、材料与方法 | 第23-43页 |
(一) 单克隆抗体的纯化及其鉴定 | 第26页 |
(二) 单克隆抗体—酶、荧光素、同位素、标记物的制备 | 第26-27页 |
(三) 亲和层析吸附剂的制备 | 第27-28页 |
1.McAb-Sepharose4B免疫吸附剂制备 | 第27-28页 |
2.ConA-Sepharose4B亲和吸附剂制备 | 第28页 |
3.羊抗鼠IgG-Agarose免疫吸附剂制备 | 第28页 |
4.亲和吸附刹的鉴定 | 第28页 |
(四) 胃癌组织可溶性抗原提取液的制备 | 第28-30页 |
1.胞浆、胞膜抗原及胞核抗原的制备及检测 | 第28-29页 |
2.总脂、中性糖脂及酸性糖脂的分离提取 | 第29-30页 |
3.胃癌可溶性抗原提取液中鞘糖脂分离方法的建立 | 第30页 |
(五) MG单抗相应抗原理化特性分析及组织内分布 | 第30-32页 |
1.鞘糖脂抗原的定性分析 | 第30-31页 |
2.外源性凝集素结合试验 | 第31页 |
3.抗原的热稳定性试验 | 第31页 |
4.癌组织及正常粘膜中MG相应抗原的分布 | 第31-32页 |
(六) MGd1、MGe1、MG5、MG9、MGc1、MGb1相应抗原的纯化 | 第32-34页 |
1.Sepharose 4B过滤 | 第32-33页 |
2.ConA-Sepharose 4B亲和层析 | 第33页 |
3.MG-Sepharose 4B免疫亲和层析 | 第33页 |
4.羊抗鼠IgG-Agarose免疫过滤 | 第33页 |
5.Sepharcryl S300层析 | 第33-34页 |
(七) 抗原的鉴定 | 第34-38页 |
1.抗原的免疫活性检测 | 第34-35页 |
2.抗原决定簇位置的初步分析 | 第35页 |
3.脂蛋白染色分析 | 第35页 |
4.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 | 第35-36页 |
5.转移电泳、免疫印渍分析 | 第36-37页 |
6.高效薄层色谱层析分析 | 第37页 |
7.抗原氨基酸组成分析 | 第37页 |
8.MG-Ags与CEA、AFP、P21及常见肿瘤抗原的关系 | 第37-38页 |
(1) AFP、CEA放射免疫交叉试验 | 第37页 |
(2) P21酶联免疫分析 | 第37-38页 |
(3) MGd1-Ag与MG7-Ag的关系 | 第38页 |
(4) MG-Ags与Tn、Le~x、Le~y及涎酸化Le~x抗原的关系 | 第38页 |
(八) 血清、胃液、胸腹水中MG—Ag的检测及意义 | 第38-43页 |
1.研究对象 | 第38-40页 |
2.MG微球免疫荧光定性诊断方法的建立及初步应用 | 第40页 |
3.MG微球荧光计量诊断方法的建立及初步应用 | 第40-41页 |
4.ConA-McAb ELISA法的建立及在血清诊断中的应用 | 第41页 |
5.MG微球EL ISA(试管)法的建立及应用 | 第41-42页 |
6.MG-Ags检测在人群普查中的试用 | 第42-43页 |
五、实验结果 | 第43-81页 |
六、讨论 | 第81-96页 |
(一) 免疫吸附剂的制备及其在抗原纯化中应用 | 第81-85页 |
1.单克隆抗体偶联条件的选择 | 第82页 |
2.抗原、抗体解离条件的选择 | 第82-83页 |
3.抗原提取液的亲和提取次数 | 第83页 |
4.亲和层析中如何鉴定亲和吸附剂的活性 | 第83-84页 |
5.非有机相分离免疫亲和纯化胃癌中性糖脂方法的建立及意义 | 第84-85页 |
(二) 关于MG单抗相应抗原的理化特性分析 | 第85-87页 |
1.MG-Ags的分布特点 | 第85-86页 |
2.MG-Ags糖苷链类型判定 | 第86-87页 |
3.MG9、MG5、MGd1-Ags是一组新的胃癌相关抗原 | 第87页 |
(三) MG-Ags检测方法的建立及意义 | 第87-89页 |
(四) MG-Ags检测的临床意义 | 第89-96页 |
1.MG-Ags检测对消化道肿瘤诊断价值 | 第89页 |
2.MG-Ags检测与CEA的关系 | 第89-91页 |
3.血清中MG-Ags的表达与手术治疗的关系 | 第91-92页 |
4.血清、体液中MG-Ags的表达关系 | 第92-94页 |
5.MG-Ags表达及其与病理分型的关系 | 第94-96页 |
七、小结 | 第96-97页 |
八、附录 | 第97-105页 |
1.发表论文题录 | 第97-101页 |
2.致谢 | 第101-102页 |
3.国际微机检索材料 | 第102-104页 |
4.本研究成果及部分论文获奖情况 | 第104-105页 |
九、参考文献 | 第105-116页 |