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番鸭GnRH基因的cDNA克隆及就巢相关基因的差异表达研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一部分 文献综述第12-24页
 1 家禽就巢机理的研究进展第12-14页
   ·就巢行为的内分泌调控第12-13页
   ·就巢行为的环境调控第13页
   ·就巢行为的遗传调控第13-14页
 2 禽类就巢相关候选基因的研究进展第14-18页
   ·Gonadotropin-releasing hormone(GnRH)基因第14-15页
     ·GnRH 的结构及特点第14页
     ·GnRH 的功能及特性第14-15页
     ·GnRH 的研究进展第15页
   ·Prolactin(PRL)基因第15-16页
     ·PRL 的结构及特点第15-16页
     ·PRL 的功能及特性第16页
     ·PRL 的研究进展第16页
   ·Growth hormone(GH)基因第16-17页
     ·GH 的结构及特点第16-17页
     ·GH 的功能及特性第17页
     ·GH 的研究进展第17页
   ·Follicle stimulating hormone(FSH)基因第17-18页
     ·FSH 的结构及特点第17页
     ·FSH 的功能及特性第17-18页
     ·FSH 的研究进展第18页
 3 Rapid Amplification of cDNA Ends(RACE)技术的研究与应用进展第18-21页
   ·RACE 技术的原理第19-20页
     ·cDNA 3’末端的获得第19页
     ·cDNA5’末端的获得第19-20页
   ·RACE 技术的应用第20页
   ·RACE 技术的前景与展望第20-21页
 4 Real-time Fluorecent Quantitative Polymerase Chain Reaction(PT- FQ- PCR)技术的研究与应用进展第21-22页
   ·PT-FQPCR 技术的原理第21页
   ·PT-FQPCR 技术的应用第21-22页
   ·PT-FQPCR 技术的前景与展望第22页
 5 本研究的目的与意义第22-24页
第二部分 试验研究第24-51页
 试验一 番鸭 GnRH 基因的 cDNA 克隆及序列分析第24-38页
  1 材料与方法第24-30页
   ·试验动物第24页
   ·主要试剂和仪器第24-25页
     ·主要试剂第24页
     ·主要仪器第24-25页
   ·引物设计与合成第25页
   ·试验方法第25-30页
     ·番鸭下丘脑 Total RNA 的提取第25-26页
     ·RT-PCR第26-27页
     ·3-’RACE第27-28页
     ·5-’RACE第28-29页
     ·序列验证第29-30页
     ·序列分析第30页
  2 结果与分析第30-36页
   ·下丘脑总 RNA 的电泳结果第30-31页
   ·番鸭 GnRH 基因 RT-PCR 的实验结果第31-32页
     ·RT-PCR 电泳及测序结果第31页
     ·番鸭 GnRH 基因部分 cDNA 序列的获得第31-32页
   ·扩增的 GnRH 基因 cDNA 全序列第32-34页
     ·3’RACE 和 5’RACE 的电泳检测及测序结果第32-33页
     ·番鸭 GnRH 基因全长 cDNA 序列的获得第33页
     ·序列验证第33-34页
   ·CDS 序列同源性分析第34-35页
   ·编码蛋白的基本性质分析第35-36页
   ·CDS 结构分析第36页
  3 讨论第36-38页
 试验二 番鸭 GnRH, GH, FSH, PRL 基因的差异表达研究第38-51页
  1 材料与方法第38-41页
   ·试验动物第38页
   ·主要试剂和仪器第38-39页
     ·主要试剂第38页
     ·主要仪器第38-39页
   ·引物设计及合成第39页
   ·总 RNA 的提取与反转录第39-40页
   ·引物可用性检测第40页
   ·定量 PCR 扩增效率检测第40-41页
   ·荧光定量 PCR 检测第41页
   ·数据处理与统计分析第41页
  2 结果与分析第41-47页
   ·组织总 RNA 检测第41-42页
   ·各基因普通 PCR 产物电泳结果第42页
   ·定量 PCR 扩增效率检测结果第42-44页
   ·RT-FQPCR 检测结果第44-47页
     ·GnRH 基因在就巢期与非就巢期的组织表达差异第44-45页
     ·PRL 基因在就巢期与非就巢期的组织表达差异第45-46页
     ·GH 基因在就巢期与非就巢期的组织表达差异第46页
     ·FSH 基因在就巢期与非就巢期的组织表达差异第46-47页
  3 讨论第47-51页
   ·RT-FQPCR 方法的建立第47-48页
   ·GnRH 基因的组织表达第48页
   ·PRL 基因的组织表达第48-49页
   ·GH 基因的组织表达第49页
   ·FSH 基因的组织表达第49-50页
   ·就巢相关基因在就巢期与非就巢期的差异表达第50-51页
全文结论第51-53页
参考文献第53-63页
致谢第63页

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