| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1. 家蚕雄性生殖器官的组成及功能 | 第14-15页 |
| 2. 家蚕雌性生殖器官的组成及功能 | 第15-16页 |
| 3. 家蚕精子细胞的形成过程 | 第16-17页 |
| 4. 精子的二型性 | 第17-18页 |
| 5. 温度和饥饿条件对精子形成过程中的影响 | 第18页 |
| 6. 昆虫雄性附腺的功能蛋白质的研究进展 | 第18-20页 |
| 7. 热激蛋白的概述 | 第20-24页 |
| ·小热激蛋白的研究进展 | 第20-21页 |
| ·家蚕中小热激蛋白的研究进展 | 第21-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-26页 |
| ·研究背景 | 第24页 |
| ·研究的目的及意义 | 第24页 |
| ·主要研究内容 | 第24-25页 |
| ·研究思路和实验技术路线 | 第25-26页 |
| 第三章 家蚕精巢组织的蛋白质组学分析 | 第26-42页 |
| ·实验材料与方法 | 第26-31页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第26-27页 |
| ·主要试剂配制 | 第27-31页 |
| ·实验步骤 | 第31-35页 |
| ·双向电泳蛋白样品的制备 | 第31页 |
| ·Bradford法进行蛋白定量 | 第31页 |
| ·第一向电泳——等点聚焦 | 第31-32页 |
| ·IPG胶条平衡 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第32页 |
| ·硝酸银染色 | 第32-33页 |
| ·图象扫描与软件分析 | 第33页 |
| ·质谱上样前样品处理 | 第33页 |
| ·质谱分析 | 第33-34页 |
| ·家蚕蛋白质数据库的构建与参数 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-39页 |
| ·家蚕大造和16-500五龄第7天精巢双向电泳图谱 | 第35-36页 |
| ·家蚕大造、16-500五龄第7天精巢差异蛋白点的质谱鉴定 | 第36-37页 |
| ·家蚕大造饥饿处理72h后精巢双向电泳图谱 | 第37-38页 |
| ·家蚕大造饥饿72h五龄第7天精巢差异蛋白点的质谱鉴定 | 第38页 |
| ·家蚕大造高温处理96h五龄第4天精巢双向电泳图谱 | 第38-39页 |
| ·家蚕大造高温96h后精巢差异蛋白点质谱鉴定 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| 第四章 化蛾第1天雄性附腺的蛋白质组学分析 | 第42-48页 |
| ·材料与方法 | 第42页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·实验试剂、方法、步骤 | 第42页 |
| ·实验结果与分析 | 第42-47页 |
| ·化蛾第1天雄性附腺双向电泳图谱 | 第42-43页 |
| ·家蚕化蛾第1天雄性附腺蛋白质鉴定结果 | 第43页 |
| ·高温处理后化蛾第1天雄性附腺的比较蛋白质组学分析 | 第43-44页 |
| ·雄性附腺中四个基因的芯片分析 | 第44-45页 |
| ·雄性附腺中四个基因的组织表达谱与时期表达谱分析 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 家蚕BmsHSP20.2基因克隆、原核表达和纯化 | 第48-66页 |
| ·实验材料与试剂 | 第48-53页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第48-50页 |
| ·主要溶液的配制 | 第50-53页 |
| ·实验方法和实验步骤 | 第53-58页 |
| ·BmsHSP20.2的信息分析 | 第53页 |
| ·特异引物的设计 | 第53页 |
| ·RNA的提取、反转录cDNA及检测 | 第53-54页 |
| ·BmsHSP20.2组织表达谱和时期表达谱分析 | 第54页 |
| ·目的基因克隆 | 第54-55页 |
| ·BmsHSP20.2的原核表达 | 第55-57页 |
| ·BmsHSP20.2的蛋白质的纯化 | 第57-58页 |
| ·BmsHSP20.2的抗体制备 | 第58页 |
| ·实验结果与分析 | 第58-64页 |
| ·BmsHSP20.2的信息分析 | 第58-59页 |
| ·BmsHSP20.2芯片分析 | 第59-60页 |
| ·BmsHSP20.2的组织表达谱和时期表达谱分析 | 第60-61页 |
| ·BmsHSP20.2基因的克隆 | 第61页 |
| ·重组质粒的构建 | 第61-62页 |
| ·BmsHSP20.2的原核表达结果检测 | 第62-63页 |
| ·目的蛋白质的纯化 | 第63-64页 |
| ·抗体制备及效价检测 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 第六章 BmsHSP20.2组织定位与分子伴侣功能的验证 | 第66-76页 |
| ·实验材料与试剂 | 第66-68页 |
| ·实验材料 | 第66页 |
| ·实验试剂 | 第66-67页 |
| ·重要溶液的配制 | 第67-68页 |
| ·实验方法与步骤 | 第68-70页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第68页 |
| ·Western-Blot实验步骤 | 第68-69页 |
| ·家蚕组织冰冻切片实验步骤 | 第69-70页 |
| ·溶菌酶DTT诱导实验 | 第70页 |
| ·实验结果与分析 | 第70-74页 |
| ·Western-Blot验证家蚕BmsHSP20.2在家蚕精巢中特异表达 | 第70-71页 |
| ·BmsHSP20.2在家蚕精巢中的免疫荧光定位 | 第71-72页 |
| ·高温和饥饿条件处理下,BmsHSP20.2的变化 | 第72-73页 |
| ·分子伴侣功能的验证——溶菌酶DTT诱导实验 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| 第七章 综合与结论 | 第76-78页 |
| ·家蚕精巢的蛋白质组学分析的蛋白质组学分析 | 第76页 |
| ·化蛾第1天雄性附腺蛋白质组学分析 | 第76页 |
| ·家蚕BmsHSP20.2的信息分析 | 第76页 |
| ·家蚕BmsHSP20.2的基因克隆、原核表达及蛋白质纯化 | 第76-77页 |
| ·家蚕BmsHSP20.2的组织定位 | 第77页 |
| ·家蚕BmsHSP20.2的基本功能分析 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 在读期间发表论文及参加课题 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
