| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 1、研究综述 | 第10-21页 |
| ·猪链球菌2型的历史概况 | 第10-11页 |
| ·猪链球菌2型的研究进展 | 第11-20页 |
| ·猪链球菌2型流行病学研究 | 第11-12页 |
| ·猪链球菌2型的形态结构和理化性质 | 第12页 |
| ·猪链球菌的分类 | 第12-13页 |
| ·猪链球菌2型的毒力因子 | 第13-17页 |
| ·猪链球菌2型的致病机理 | 第17-18页 |
| ·猪链球菌2型的检测方法 | 第18-20页 |
| ·目的与意义 | 第20-21页 |
| 2、材料与方法 | 第21-34页 |
| ·材料 | 第21-27页 |
| ·阳性菌株 | 第21页 |
| ·对照菌株 | 第21页 |
| ·待检样品 | 第21页 |
| ·MRP基因测序菌株 | 第21-22页 |
| ·主要试剂及配制 | 第22-24页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·引物的设计与合成 | 第25-26页 |
| ·参考毒株 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-34页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| ·猪链球菌2型CPS、MRP、EF和Sly毒力因子四重PCR检测方法的建立 | 第28-30页 |
| ·广西菌株毒力基因型的检测 | 第30页 |
| ·对猪链球菌2型菌株mrp基因的克隆测序分析 | 第30-34页 |
| 3、实验结果 | 第34-43页 |
| ·四重PCR检测方法的建立 | 第34-36页 |
| ·单一PCR及多重PCR体系优化结果 | 第34页 |
| ·特异性试验结果 | 第34页 |
| ·敏感性试验结果 | 第34-36页 |
| ·广西菌株毒力基因型的检测 | 第36-38页 |
| ·猪链球菌2型MRP基因的扩增、克隆鉴定和序列分析 | 第38-43页 |
| ·猪链球菌2型MRP基因的扩增和电泳胶回收结果 | 第38页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·MRP基因核苷酸序列比对(见附表1) | 第39-40页 |
| ·MRP基因推导氨基酸序列的比较(见附表2) | 第40-41页 |
| ·MRP基因核苷酸遗传系统树分析(见图3-6) | 第41-43页 |
| 4、讨论 | 第43-48页 |
| ·毒力因子四重PCR检测方法的建立 | 第43-44页 |
| ·广西猪链球菌2型菌株毒力基因型调查 | 第44-45页 |
| ·猪链球菌2型MRP基因序列分析 | 第45-48页 |
| 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录 | 第58-95页 |
| 附表1 MRP基因核苷酸序列比对 | 第58-81页 |
| 附表2 MRP基因氨基酸序列比对 | 第81-89页 |
| 附表3 MRP基因核苷酸序列的同源性分析 | 第89-92页 |
| 附表4 MRP基因氨基酸序列的同源性分析 | 第92-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第96页 |