| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 第一部分 研究背景 | 第9-51页 |
| 一、PTPRO基因及其研究进展 | 第9-26页 |
| （一） 酪氨酸激酶 | 第9-16页 |
| （二） 酪氨酸酯酶 | 第16-23页 |
| （三） PTPRO | 第23-26页 |
| 二、细胞周期和 E2F1 基础知识及研究进展 | 第26-34页 |
| （一） 细胞周期 | 第26-31页 |
| （二） 细胞周期G1/S检验点 | 第31-33页 |
| （三） E2F1 | 第33-34页 |
| 三、microRNA 基础及研究进展 | 第34-49页 |
| （一） 概述 | 第35-36页 |
| （二） microRNA的确定 | 第36-38页 |
| （三） microRNA的功能 | 第38-45页 |
| （四） 细胞周期中的microRNA | 第45-48页 |
| （五） microRNA-17-92 | 第48-49页 |
| 四、本论文研究的内容和意义 | 第49-51页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第51-68页 |
| 一、实验材料 | 第51-52页 |
| （一） 质粒 | 第51页 |
| （二） 蛋白质和抗体 | 第51页 |
| （三） 哺乳动物细胞系 | 第51页 |
| （四） 试剂 | 第51-52页 |
| 二、实验方法 | 第52-68页 |
| I. 生物信息学分析 | 第52页 |
| II. 分子生物学实验方法 | 第52-61页 |
| （一） 分子克隆 | 第52页 |
| （二） DNA的琼脂糖电泳 | 第52页 |
| （三） 质粒大量制备的方法 | 第52-54页 |
| （四） 哺乳动物细胞总RNA的提取和反转录 | 第54-55页 |
| （五） 逆转录 | 第55页 |
| （六） PCR和荧光适时定量realtime PCR | 第55-57页 |
| （七） microRNA的提取和检测 | 第57页 |
| （八） 凝胶迟滞电泳 | 第57-59页 |
| （九） 染色质免疫沉淀实验 | 第59-61页 |
| III. 细胞生物学实验方法 | 第61-65页 |
| （一） 哺乳动物细胞系的培养 | 第61-62页 |
| （二） 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第62-64页 |
| （三） 细胞周期同步化 | 第64页 |
| （四） 流式细胞术 | 第64-65页 |
| IV. 蛋白的生物化学试验方法 | 第65-67页 |
| （一） 细胞总蛋白的提取 | 第65页 |
| （二） 细胞核蛋白的提取 | 第65-66页 |
| （三） SDS-PAGE电泳和Western Blotting | 第66-67页 |
| IV. 统计分析 | 第67-68页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第68-85页 |
| 一、基因启动子,UTR 报告基因的构建 | 第68-70页 |
| 二、E2F1转录调控PTPRO | 第70-75页 |
| （一） 生物信息学分析可能参与PTPRO调控的因子 | 第70页 |
| （二） 过表达E2F1上调内源PTPRO的mRNA水平 | 第70-71页 |
| （三） 过表达 E2F1 能够激活 PTPRO 启动子 | 第71-72页 |
| （四） 确定PTPRO启动子上的E2F1结合元件 | 第72-75页 |
| （五） E2F1通过乙酰化激活PTPRO启动子 | 第75页 |
| 三、microRNA-17-92靶定PTPRO | 第75-80页 |
| （一） 生物信息学分析可能参与PTPRO调控的因子 | 第75-76页 |
| （二） PTPR03’UTR上miR-17-92位点的功能性分析 | 第76-78页 |
| （三） miR-17-92能下调PTPRO的mRNA和蛋白水平 | 第78-79页 |
| （四） miR-17-92能直接调控PTPRO | 第79-80页 |
| 四、E2F1和microRNA17-92协同调控PTPRO | 第80-85页 |
| （一） 同时含有启动子和UTR的报告基因对E2F1的响应 | 第80-81页 |
| （二） HeLa细胞同步化PTPRO，E2F1和miR-17-92的表达框架 | 第81-83页 |
| （三） 报告基因实验辅助证实E2F1和miR-17-92对PTPRO的共调控 | 第83-85页 |
| 第四部分 讨论 | 第85-88页 |
| 一、PTPRO基因的转录调控 | 第85-86页 |
| 二、PTPRO基因的转录后调控 | 第86-87页 |
| 三、PTPRO的细胞周期性表达的意义及启示 | 第87-88页 |
| 主要结论 | 第88页 |
| 主要创新点 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-101页 |
| 附录 | 第101-103页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
