摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-14页 |
第一章 绪论 | 第14-31页 |
1. 化学发光免疫分析基本原理 | 第14-18页 |
·化学发光基本原理 | 第14-15页 |
·免疫分析基本原理 | 第15-16页 |
·非标记免疫分析法 | 第15-16页 |
·标记免疫分析法 | 第16页 |
·非均相免疫分析法 | 第16页 |
·均相免疫分析法 | 第16页 |
·化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay, CLIA)基本原理 | 第16-18页 |
·固相化学发光免疫分析基本原理 | 第16-17页 |
·直接法 | 第17页 |
·间接法 | 第17页 |
·双抗体夹心法 | 第17页 |
·双夹心法 | 第17页 |
·竞争法 | 第17页 |
·均相化学发光免疫分析基本原理 | 第17-18页 |
2 化学发光免疫分析主要类型 | 第18-22页 |
·化学发光免疫分析 | 第18-20页 |
·鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物标记的化学发光免疫分析 | 第18-19页 |
·吖啶酯化合物标记的化学发光免疫分析 | 第19-20页 |
·化学发光酶免疫分析 | 第20-22页 |
·HRP 标记的CLEIA | 第20-21页 |
·ALP 标记的CLEIA | 第21-22页 |
·电化学发光免疫分析 | 第22页 |
3 化学发光免疫分析的现状及发展趋势 | 第22-29页 |
·流动注射化学发光免疫分析(FI-CLIA) | 第23页 |
·毛细管电泳化学发光免疫分析(CE-CLIA) | 第23页 |
·高效液相色谱化学发光免疫分析法(HPLC-CLIA) | 第23页 |
·微流控芯片化学发光免疫分析 | 第23-24页 |
·免疫磁性微球技术的性质及其应用 | 第24-26页 |
·免疫磁性微球的性质 | 第24页 |
·免疫磁性微球技术的基本原理 | 第24-25页 |
·免疫磁性微球技术的应用 | 第25-26页 |
·免疫检测 | 第25页 |
·细胞分离 | 第25页 |
·生物大分子纯化 | 第25页 |
·分子生物学的应用 | 第25页 |
·细菌分离的应用 | 第25-26页 |
·纳米金粒子在免疫分析中的应用 | 第26-29页 |
·纳米金粒子的制备 | 第26-27页 |
·反相胶束法 | 第27页 |
·水相合成法 | 第27页 |
·纳米金粒子与抗体的连接 | 第27-29页 |
·静电作用连接 | 第28页 |
·Au-S 共价键连接 | 第28-29页 |
4 课题意义及主要内容 | 第29-31页 |
第二章 溴酚兰增强Luminol-H_2O_2-HRP化学发光体系的研究 | 第31-45页 |
1 引言 | 第31-32页 |
2 实验部分 | 第32-33页 |
·仪器与试剂 | 第32-33页 |
·仪器装置 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33页 |
·Luminol-H_2O_2-HRP–BPB增强化学发光体系的实验方法 | 第33页 |
·HRP 标记物的测定 | 第33页 |
·Luminol-H_2O_2-HRP直接化学发光测定方法 | 第33页 |
3 结果与讨论 | 第33-44页 |
·Luminol-H_2O_2-HRP -BPB增强化学发光体系的动力学曲线 | 第33-34页 |
·化学发光最佳条件的选择 | 第34-40页 |
·Luminol 溶液pH 值对化学发光强度的影响 | 第34-35页 |
·H_2O_2-HRP-BPB混合溶液pH值对化学发光强度的影响 | 第35-36页 |
·H_2O_2浓度对化学发光的影响 | 第36-37页 |
·Luminol 溶液浓度对化学发光的影响 | 第37页 |
·BPB 溶液浓度对化学发光的影响 | 第37-38页 |
·H_2O_2-HRP-BPB混合溶液静置时间对化学发光强度的影响 | 第38-39页 |
·不同进样方式对化学发光强度的影响 | 第39-40页 |
·游离HRP 的测定 | 第40-41页 |
·HRP 标记物的测定 | 第41-42页 |
·Luminol-H_2O_2-HRP-BPB增强化学发光体系反应机理的研究 | 第42-44页 |
4 小结 | 第44-45页 |
第三章 免疫磁性微球的制备 | 第45-50页 |
1 引言 | 第45-46页 |
2 实验部分 | 第46-48页 |
·仪器与试剂 | 第46-47页 |
·仪器装置 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46-47页 |
·实验方法 | 第47-48页 |
·羧基修饰磁性微球的表征 | 第47页 |
·磁性微球的活化 | 第47页 |
·磁性微球表面酶标抗体的偶联 | 第47页 |
·化学发光检测免疫磁性微球 | 第47-48页 |
3 结果与讨论 | 第48-49页 |
·羧基修饰磁性微球的表征 | 第48页 |
·磁性微球的活化与酶标抗体的偶联 | 第48-49页 |
4 小结 | 第49-50页 |
第四章 Luminol-H_2O_2-HRP-BPB增强化学发光磁酶联免疫分析测定癌胚抗原 | 第50-61页 |
1 引言 | 第50-51页 |
2 实验部分 | 第51-54页 |
·仪器与试剂 | 第51页 |
·仪器装置 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-54页 |
·实验原理 | 第51-52页 |
·实验过程 | 第52-54页 |
·CEA 单克隆抗体包被磁性微球的制备 | 第52-53页 |
·双抗体夹心磁性微球的制备 | 第53页 |
·化学发光测定CEA | 第53页 |
·ELISA 法测定CEA | 第53-54页 |
3 结果与讨论 | 第54-60页 |
· | 第54-56页 |
·CEA 单克隆抗体包被磁性微球的制备条件的选择 | 第54页 |
·单克隆抗体与抗原最佳免疫反应时间的选择 | 第54-55页 |
·抗原与酶标抗体最佳免疫反应时间的选择 | 第55-56页 |
·CEA 的检测 | 第56-59页 |
·血清样品分析 | 第59-60页 |
4 小结 | 第60-61页 |
第五章 增强化学发光磁酶联免疫分析测定血清总甲状腺素 | 第61-69页 |
1 引言 | 第61-62页 |
2 实验部分 | 第62-64页 |
·仪器与试剂 | 第62页 |
·仪器装置 | 第62页 |
·主要试剂 | 第62页 |
·实验方法 | 第62-64页 |
·实验原理 | 第62-63页 |
·实验过程 | 第63-64页 |
·T_4单克隆抗体包被磁性微球的制备 | 第63页 |
·竞争法制备免疫磁性微球 | 第63页 |
·化学发光测定T_4 | 第63-64页 |
·ELISA法测定测定T_4 | 第64页 |
3 结果与讨论 | 第64-68页 |
·最佳检测条件 | 第64页 |
·T_4的检测 | 第64-67页 |
·血清样品分析 | 第67-68页 |
4 小结 | 第68-69页 |
第六章 纳米金粒子的制备与标记 | 第69-80页 |
1 引言 | 第69-70页 |
2 实验部分 | 第70-72页 |
·仪器与试剂 | 第70-72页 |
·仪器装置 | 第70页 |
·主要试剂 | 第70页 |
·纳米金粒子的制备 | 第70-71页 |
·纳米金粒子的表征 | 第71页 |
·纳米金粒子保存条件的选择 | 第71页 |
·纳米金粒子与抗体用量比例的选择 | 第71-72页 |
·紫外-可见吸收光谱分析 | 第71页 |
·荧光光谱分析 | 第71-72页 |
·纳米金粒子和抗体的静电连接 | 第72页 |
3 结果与讨论 | 第72-79页 |
·紫外-可见吸收光谱分析 | 第72-73页 |
·透射电子显微镜分析 | 第73页 |
·纳米金粒子保存pH 条件的确定 | 第73-74页 |
·纳米金粒子与抗体用量比例的选择 | 第74-77页 |
·纳米金粒子标记抗体后的紫外-可见吸收光谱分析 | 第75-77页 |
·纳米金粒子标记抗体后的荧光光谱 | 第77页 |
·纳米金粒子标记抗体的表征 | 第77-79页 |
4 小结 | 第79-80页 |
第七章 免疫纳米金粒子在免疫分析中的应用 | 第80-89页 |
1 引言 | 第80-81页 |
2 实验部分 | 第81-84页 |
·仪器与试剂 | 第81-82页 |
·仪器装置 | 第81页 |
·主要试剂 | 第81-82页 |
·实验原理 | 第82-83页 |
·实验过程 | 第83-84页 |
·AFP 单克隆抗体包被磁性微球的制备 | 第83页 |
·双抗体夹心磁性微球的制备 | 第83页 |
·化学发光测定CEA | 第83-84页 |
·ELISA 法测定测定AFP | 第84页 |
3 结果与讨论 | 第84-88页 |
·最佳检测条件 | 第84页 |
·AFP 的检测 | 第84-87页 |
·血清样品分析 | 第87-88页 |
4 小结 | 第88-89页 |
结论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
攻读学位期间发表及待发表的学术论文目录 | 第101-102页 |