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Luminol-H2O2-HRP-BPB增强化学发光新体系的研究及其在磁酶免疫分析中的应用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-14页
第一章 绪论第14-31页
 1. 化学发光免疫分析基本原理第14-18页
   ·化学发光基本原理第14-15页
   ·免疫分析基本原理第15-16页
     ·非标记免疫分析法第15-16页
     ·标记免疫分析法第16页
     ·非均相免疫分析法第16页
     ·均相免疫分析法第16页
   ·化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay, CLIA)基本原理第16-18页
     ·固相化学发光免疫分析基本原理第16-17页
       ·直接法第17页
       ·间接法第17页
       ·双抗体夹心法第17页
       ·双夹心法第17页
       ·竞争法第17页
     ·均相化学发光免疫分析基本原理第17-18页
 2 化学发光免疫分析主要类型第18-22页
   ·化学发光免疫分析第18-20页
     ·鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物标记的化学发光免疫分析第18-19页
     ·吖啶酯化合物标记的化学发光免疫分析第19-20页
   ·化学发光酶免疫分析第20-22页
     ·HRP 标记的CLEIA第20-21页
     ·ALP 标记的CLEIA第21-22页
   ·电化学发光免疫分析第22页
 3 化学发光免疫分析的现状及发展趋势第22-29页
   ·流动注射化学发光免疫分析(FI-CLIA)第23页
   ·毛细管电泳化学发光免疫分析(CE-CLIA)第23页
   ·高效液相色谱化学发光免疫分析法(HPLC-CLIA)第23页
   ·微流控芯片化学发光免疫分析第23-24页
   ·免疫磁性微球技术的性质及其应用第24-26页
     ·免疫磁性微球的性质第24页
     ·免疫磁性微球技术的基本原理第24-25页
     ·免疫磁性微球技术的应用第25-26页
       ·免疫检测第25页
       ·细胞分离第25页
       ·生物大分子纯化第25页
       ·分子生物学的应用第25页
       ·细菌分离的应用第25-26页
   ·纳米金粒子在免疫分析中的应用第26-29页
     ·纳米金粒子的制备第26-27页
       ·反相胶束法第27页
       ·水相合成法第27页
     ·纳米金粒子与抗体的连接第27-29页
       ·静电作用连接第28页
       ·Au-S 共价键连接第28-29页
 4 课题意义及主要内容第29-31页
第二章 溴酚兰增强Luminol-H_2O_2-HRP化学发光体系的研究第31-45页
 1 引言第31-32页
 2 实验部分第32-33页
   ·仪器与试剂第32-33页
     ·仪器装置第32页
     ·主要试剂第32-33页
   ·实验方法第33页
     ·Luminol-H_2O_2-HRP–BPB增强化学发光体系的实验方法第33页
     ·HRP 标记物的测定第33页
     ·Luminol-H_2O_2-HRP直接化学发光测定方法第33页
 3 结果与讨论第33-44页
   ·Luminol-H_2O_2-HRP -BPB增强化学发光体系的动力学曲线第33-34页
   ·化学发光最佳条件的选择第34-40页
     ·Luminol 溶液pH 值对化学发光强度的影响第34-35页
     ·H_2O_2-HRP-BPB混合溶液pH值对化学发光强度的影响第35-36页
     ·H_2O_2浓度对化学发光的影响第36-37页
     ·Luminol 溶液浓度对化学发光的影响第37页
     ·BPB 溶液浓度对化学发光的影响第37-38页
     ·H_2O_2-HRP-BPB混合溶液静置时间对化学发光强度的影响第38-39页
     ·不同进样方式对化学发光强度的影响第39-40页
   ·游离HRP 的测定第40-41页
   ·HRP 标记物的测定第41-42页
   ·Luminol-H_2O_2-HRP-BPB增强化学发光体系反应机理的研究第42-44页
 4 小结第44-45页
第三章 免疫磁性微球的制备第45-50页
 1 引言第45-46页
 2 实验部分第46-48页
   ·仪器与试剂第46-47页
     ·仪器装置第46页
     ·主要试剂第46-47页
   ·实验方法第47-48页
     ·羧基修饰磁性微球的表征第47页
     ·磁性微球的活化第47页
     ·磁性微球表面酶标抗体的偶联第47页
     ·化学发光检测免疫磁性微球第47-48页
 3 结果与讨论第48-49页
   ·羧基修饰磁性微球的表征第48页
   ·磁性微球的活化与酶标抗体的偶联第48-49页
 4 小结第49-50页
第四章 Luminol-H_2O_2-HRP-BPB增强化学发光磁酶联免疫分析测定癌胚抗原第50-61页
 1 引言第50-51页
 2 实验部分第51-54页
   ·仪器与试剂第51页
     ·仪器装置第51页
     ·主要试剂第51页
   ·实验方法第51-54页
     ·实验原理第51-52页
     ·实验过程第52-54页
       ·CEA 单克隆抗体包被磁性微球的制备第52-53页
       ·双抗体夹心磁性微球的制备第53页
       ·化学发光测定CEA第53页
       ·ELISA 法测定CEA第53-54页
 3 结果与讨论第54-60页
   ·第54-56页
     ·CEA 单克隆抗体包被磁性微球的制备条件的选择第54页
     ·单克隆抗体与抗原最佳免疫反应时间的选择第54-55页
     ·抗原与酶标抗体最佳免疫反应时间的选择第55-56页
   ·CEA 的检测第56-59页
   ·血清样品分析第59-60页
 4 小结第60-61页
第五章 增强化学发光磁酶联免疫分析测定血清总甲状腺素第61-69页
 1 引言第61-62页
 2 实验部分第62-64页
   ·仪器与试剂第62页
     ·仪器装置第62页
     ·主要试剂第62页
   ·实验方法第62-64页
     ·实验原理第62-63页
     ·实验过程第63-64页
       ·T_4单克隆抗体包被磁性微球的制备第63页
       ·竞争法制备免疫磁性微球第63页
       ·化学发光测定T_4第63-64页
       ·ELISA法测定测定T_4第64页
 3 结果与讨论第64-68页
   ·最佳检测条件第64页
   ·T_4的检测第64-67页
   ·血清样品分析第67-68页
 4 小结第68-69页
第六章 纳米金粒子的制备与标记第69-80页
 1 引言第69-70页
 2 实验部分第70-72页
   ·仪器与试剂第70-72页
     ·仪器装置第70页
     ·主要试剂第70页
     ·纳米金粒子的制备第70-71页
     ·纳米金粒子的表征第71页
     ·纳米金粒子保存条件的选择第71页
     ·纳米金粒子与抗体用量比例的选择第71-72页
       ·紫外-可见吸收光谱分析第71页
       ·荧光光谱分析第71-72页
     ·纳米金粒子和抗体的静电连接第72页
 3 结果与讨论第72-79页
   ·紫外-可见吸收光谱分析第72-73页
   ·透射电子显微镜分析第73页
   ·纳米金粒子保存pH 条件的确定第73-74页
   ·纳米金粒子与抗体用量比例的选择第74-77页
     ·纳米金粒子标记抗体后的紫外-可见吸收光谱分析第75-77页
     ·纳米金粒子标记抗体后的荧光光谱第77页
   ·纳米金粒子标记抗体的表征第77-79页
 4 小结第79-80页
第七章 免疫纳米金粒子在免疫分析中的应用第80-89页
 1 引言第80-81页
 2 实验部分第81-84页
   ·仪器与试剂第81-82页
     ·仪器装置第81页
     ·主要试剂第81-82页
   ·实验原理第82-83页
   ·实验过程第83-84页
     ·AFP 单克隆抗体包被磁性微球的制备第83页
     ·双抗体夹心磁性微球的制备第83页
     ·化学发光测定CEA第83-84页
     ·ELISA 法测定测定AFP第84页
 3 结果与讨论第84-88页
   ·最佳检测条件第84页
   ·AFP 的检测第84-87页
   ·血清样品分析第87-88页
 4 小结第88-89页
结论第89-90页
参考文献第90-100页
致谢第100-101页
攻读学位期间发表及待发表的学术论文目录第101-102页

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