重组毕赤酵母生产人生长激素的发酵条件研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 第一章 综述 | 第7-20页 |
| ·人生长激素概述 | 第7-11页 |
| ·人生长激素结构特点 | 第7-10页 |
| ·人生长激素基因及其表达 | 第7-8页 |
| ·人生长激素分子结构 | 第8-10页 |
| ·人生长激素的生理功能 | 第10-11页 |
| ·重组人生长激素 | 第11-14页 |
| ·重组人生长激素的研究进展 | 第11-12页 |
| ·重组人生长激素的临床应用 | 第12-14页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第14-18页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统概述 | 第15页 |
| ·毕赤酵母表达载体 | 第15-16页 |
| ·毕赤酵母表达系统表达外源蛋白的一般步骤 | 第16页 |
| ·外源蛋白的表达方式 | 第16-17页 |
| ·外源蛋白的翻译后修饰加工 | 第17页 |
| ·培养条件 | 第17页 |
| ·毕赤酵母表达系统的应用 | 第17-18页 |
| ·本研究目的与意义 | 第18-20页 |
| ·目的及意义 | 第18页 |
| ·实验内容及拟解决的问题 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-27页 |
| ·菌种 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·平板培养基 | 第20页 |
| ·种子培养基 | 第20页 |
| ·分批发酵培养基 | 第20-21页 |
| ·补料生长培养基 | 第21页 |
| ·诱导培养基 | 第21页 |
| ·鉴定培养基 | 第21页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-27页 |
| ·摇瓶培养方法 | 第22-23页 |
| ·单因素实验设计 | 第22页 |
| ·正交试验设计 | 第22-23页 |
| ·分批补料发酵方法 | 第23-24页 |
| ·种子夜制备 | 第23页 |
| ·分批补料方法 | 第23-24页 |
| ·分析测定方法 | 第24-27页 |
| ·实验数据分析方法 | 第24页 |
| ·细胞光密度分析 | 第24页 |
| ·温度、pH、转速、溶氧及补料速度检测 | 第24页 |
| ·表达产物分析 | 第24-25页 |
| ·总蛋白测定:考马斯亮蓝染色法 | 第25-27页 |
| 第三章 基因工程菌的发酵培养基优化 | 第27-36页 |
| ·Mut~s和Mut~+质粒表型鉴定 | 第27-28页 |
| ·最佳基本碳源的选择 | 第28-29页 |
| ·最佳基本氮源的选择 | 第29-30页 |
| ·单因素实验结果 | 第30-33页 |
| ·甘油单因素测定 | 第31页 |
| ·酵母粉单因素测定 | 第31页 |
| ·磷酸盐缓冲液单因素测定 | 第31-32页 |
| ·MgSO_4·7H_2O单因素测定 | 第32页 |
| ·pH单因素测定 | 第32-33页 |
| ·正交试验结果 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-36页 |
| 第四章 外源蛋白表达条件的选择 | 第36-42页 |
| ·接种量的选择 | 第36-37页 |
| ·生长时间的选择 | 第37页 |
| ·甲醇浓度的选择 | 第37-38页 |
| ·诱导时间的选择 | 第38-39页 |
| ·诱导起始pH的选择 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-42页 |
| 第五章 基因工程菌的发酵罐培养 | 第42-47页 |
| ·分批-补料培养策略 | 第42页 |
| ·分批-补料发酵方法 | 第42-43页 |
| ·甲醇的流加方法 | 第43-44页 |
| ·发酵产物分析 | 第44-45页 |
| ·本章小结 | 第45-47页 |
| 第六章 对后续工作的建议 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
