中文摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
上篇 文献综述 | 第14-67页 |
第一章 激发子诱发的非寄主抗性 | 第15-43页 |
1 植物-微生物互作中MAMP触发抗性的诱发和抑制 | 第15-19页 |
·Pattern识别受体在植物的先天免疫中的功能 | 第15-18页 |
·效应因子抑制病原诱发的早期抗性 | 第18-19页 |
2 激发子信号 | 第19-27页 |
·蛋白激酶及蛋白的磷酸化与植物的防卫反应 | 第20-22页 |
·离子通道与植物的防卫反应 | 第22-24页 |
·NO和AOS与植物的防卫反应 | 第24-27页 |
参考文献 | 第27-43页 |
第二章 保卫细胞信号传导 | 第43-55页 |
1 气孔运动的机制 | 第43-44页 |
2 保卫细胞信号 | 第44-47页 |
·受体识别 | 第44-45页 |
·Lipid | 第45-46页 |
·AOS | 第46-47页 |
·NO | 第47页 |
3 蓝光和其它环境因素对气孔的影响 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
第三章 病毒诱导基因沉默技术在植物功能基因组研究中的应用 | 第55-67页 |
1 VIGS:植物功能基因组的革新 | 第55-61页 |
·VIGS技术的发展 | 第55-57页 |
·VIGS技术的改进 | 第57-59页 |
·VIGS的方法 | 第59-60页 |
·本氏烟(Nicotiana benthamiana)是研究植物与病原互作的模式植物 | 第60-61页 |
2 VIGS和其它功能基因研究方法的比较 | 第61-62页 |
·VIGS快速 | 第61页 |
·VIGS不需要植物转化 | 第61页 |
·VIGS克服基因的冗余 | 第61页 |
·VIGS能快速地对不同植物中相同基因的功能进行比较 | 第61-62页 |
·VIGS的局限性 | 第62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
下篇 研究内容 | 第67-177页 |
第一章 NADPH氧化酶在激发子诱发的过敏反应和气孔关闭中的功能研究 | 第69-95页 |
1 材料和方法 | 第72-75页 |
·材料 | 第72-73页 |
·方法 | 第73-75页 |
2 结果和分析 | 第75-84页 |
·NbrbohA和NbrbohB参与激发子诱导的H_2O_2积累 | 第75-78页 |
·RBOH不参与激发子诱导的过敏反应 | 第78页 |
·RBOH沉默不影响激发子诱发的PR基因表达 | 第78-80页 |
·Nbrboh沉默抑制激发子诱导的气孔关闭 | 第80-81页 |
·NO参与激发子诱导的气孔关闭 | 第81-83页 |
·RBOH沉默不影响激发子诱发的[Ca~(2+)]_(cyt)变化 | 第83-84页 |
·H_2O_2和NO之外的AOS不参与激发子诱导的气孔关闭,但参与过敏反应 | 第84页 |
3 讨论 | 第84-88页 |
·RBOH参与激发子诱导的H_2O_2积累 | 第85-86页 |
·RBOH不参与激发子诱发的过敏反应 | 第86页 |
·Ca~(2+)作用于RBOH的上游 | 第86-87页 |
·RBOH沉默影响H_2O_2和NO的积累,抑制激发子诱导的气孔关闭,但不影响HR | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-95页 |
第二章 液泡加工酶(VACUOLAR PROCESSING ENZYME,VPE)在激发子诱发的过敏反应和气孔关闭中的功能研究 | 第95-121页 |
1 材料和方法 | 第98-100页 |
·植物材料、激发子的准备及激发子处理植物 | 第98页 |
·重组的马铃薯X病毒载体pgR107 | 第98页 |
·农杆菌菌株 | 第98页 |
·载体构建及农杆菌侵染烟草 | 第98页 |
·DAB染色 | 第98-99页 |
·烟草总RNA的提取及反转录PCR反应(reverse transcriptase polymerase chainreaction,RT-PCR) | 第99页 |
·气孔开度测量 | 第99-100页 |
·保卫细胞中NO和AOS测量 | 第100页 |
2 结果和分析 | 第100-108页 |
·NbVPE1a和NbVPE1a/lb沉默抑制harpin诱导的HR | 第100-102页 |
·NbVPE不参与激发子诱导的H_2O_2产生 | 第102-103页 |
·NbVPE沉默抑制激发子诱导的气孔关闭 | 第103-106页 |
·Nb VPE沉默抑制激发子诱导的NO产生 | 第106-107页 |
·NbVPE1a/1b双沉默负调控激发子诱导的AOS产生 | 第107-108页 |
·NbVPE1a/1b沉默影响活性氧相关的基因(NbrbohB)和转录因子(WRKY2)的转录 | 第108页 |
3 讨论 | 第108-112页 |
·NbVPE1a参与harpin诱导的HR,不参与boehmerin和Nep1诱导的HR | 第110页 |
·NbVPE和H_2O_2积累、激发子诱导的过敏反应的关系 | 第110-111页 |
·NbVPE依赖的NO积累参与激发子诱导的气孔关闭 | 第111页 |
·NbVPE调节基因的转录 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-121页 |
第三章 异三聚体G蛋白在激发子诱发的过敏反应和气孔关闭中的功能研究 | 第121-149页 |
1 材料和方法 | 第123-126页 |
·植物材料、激发子的准备及激发子处理植物 | 第123-124页 |
·重组的马铃薯X病毒载体pgR107 | 第124页 |
·农杆菌菌株 | 第124页 |
·载体构建及农杆菌侵染烟草 | 第124页 |
·DAB染色 | 第124-126页 |
·烟草总RNA的提取及反转录PCR反应(reverse transcriptase polymerase chainreaction,RT-PCR) | 第126页 |
·气孔开度测量 | 第126页 |
·保卫细胞中NO和AOS测量 | 第126页 |
2 结果和分析 | 第126-136页 |
·N.benthamiana Gα、Gβ1、Gβ2和AC基因的克隆 | 第126-127页 |
·Ga、Gβ2沉默抑制harpin诱导的过敏反应 | 第127-129页 |
·Ga、Gβ2和AC沉默植株削弱激发子诱导的H_2O_2积累 | 第129-130页 |
·Ga、Gβ1和Gβ2沉默抑制激发子诱导的气孔关闭 | 第130-132页 |
·Ga、Gβ1和Gβ2沉默抑制激发子诱导的NO积累 | 第132-133页 |
·Ga、Gβ1、Gβ2和AC沉默差异地调节不同激发子诱导的AOS积累 | 第133-134页 |
·与植物防卫、AOS平衡、转录相关的基因转录分析 | 第134-136页 |
3 讨论 | 第136-139页 |
·异三聚体G蛋白(Gα、Gβ)正调控激发子诱发的气孔关闭 | 第137页 |
·Gα和Gβ2参与对细菌蛋白诱导的过敏反应 | 第137-138页 |
·异三聚体G蛋白依赖的NO积累参与激发子诱导的气孔关闭 | 第138页 |
·AC可能不是一个重要的下游效应因子参与植物的防卫 | 第138页 |
·植物的异三聚体G蛋白信号的复杂性 | 第138-139页 |
参考文献 | 第139-149页 |
第四章 MAPK级联途径在激发子诱发的过敏反应中的功能研究 | 第149-177页 |
1 材料和方法 | 第152-154页 |
·植物材料、激发子的准备及激发子处理植物 | 第152页 |
·重组的马铃薯X病毒载体pgR107 | 第152页 |
·农杆菌菌株 | 第152页 |
·载体构建及农杆菌侵染烟草 | 第152-154页 |
·DAB染色 | 第154页 |
·烟草总RNA的提取及反转录PCR反应(reverse transcriptase polymerase chainreaction,RT-PCR) | 第154页 |
·保卫细胞中NO、AOS测量 | 第154页 |
·保卫细胞中Ca~(2+)测量 | 第154页 |
2 结果和分析 | 第154-164页 |
·MAPKKKα、MEK1、MEK2、WIPK、SIPK和NTF6沉默载体构建 | 第154-156页 |
·MAPKKKα-MEK2-WIPK级联途径介导Nep1诱导的HR,不参与boehmerin和harpin诱导的HR | 第156-157页 |
·MEK2-NTF6级联途径参与激发子诱导的H_2O_2积累 | 第157页 |
·MEK2和WIPK参与Nep1诱导的保卫细胞中NO积累 | 第157-159页 |
·MAPKKKα、MEK1、MEK2、WIPK、SIPK和NTF6沉默不影响激发子诱导的保卫细胞内[Ca~(2+)]_(cyt)和AOS积累 | 第159-161页 |
·与植物防卫、AOS平衡、转录相关的基因转录分析 | 第161-164页 |
·WRKY2参与Nep1诱导的HR,不参与boehmerin和harpin诱导的HR | 第164页 |
3 讨论 | 第164-168页 |
·MAPK级联途径参与植物的防卫反应是外源刺激物依赖的 | 第165-166页 |
·MAPK级联途径调控Nep1诱导的H_2O_2积累和过敏反应 | 第166-167页 |
·MAPK级联途径与NO和H_2O_2积累的交叉 | 第167页 |
·Nep1诱导的MAPK信号调节转录因子WRKY2的转录 | 第167-168页 |
参考文献 | 第168-177页 |
附录1 | 第177-178页 |
附录2 | 第178-179页 |
本论文创新点 | 第179-181页 |
攻读博士学位期间发表的研究论文 | 第181-183页 |
致谢 | 第183页 |