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三种激发子诱导的过敏性细胞死亡和气孔关闭的分子机制研究

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
上篇 文献综述第14-67页
 第一章 激发子诱发的非寄主抗性第15-43页
  1 植物-微生物互作中MAMP触发抗性的诱发和抑制第15-19页
   ·Pattern识别受体在植物的先天免疫中的功能第15-18页
   ·效应因子抑制病原诱发的早期抗性第18-19页
  2 激发子信号第19-27页
   ·蛋白激酶及蛋白的磷酸化与植物的防卫反应第20-22页
   ·离子通道与植物的防卫反应第22-24页
   ·NO和AOS与植物的防卫反应第24-27页
  参考文献第27-43页
 第二章 保卫细胞信号传导第43-55页
  1 气孔运动的机制第43-44页
  2 保卫细胞信号第44-47页
   ·受体识别第44-45页
   ·Lipid第45-46页
   ·AOS第46-47页
   ·NO第47页
  3 蓝光和其它环境因素对气孔的影响第47-48页
  参考文献第48-55页
 第三章 病毒诱导基因沉默技术在植物功能基因组研究中的应用第55-67页
  1 VIGS:植物功能基因组的革新第55-61页
   ·VIGS技术的发展第55-57页
   ·VIGS技术的改进第57-59页
   ·VIGS的方法第59-60页
   ·本氏烟(Nicotiana benthamiana)是研究植物与病原互作的模式植物第60-61页
  2 VIGS和其它功能基因研究方法的比较第61-62页
   ·VIGS快速第61页
   ·VIGS不需要植物转化第61页
   ·VIGS克服基因的冗余第61页
   ·VIGS能快速地对不同植物中相同基因的功能进行比较第61-62页
   ·VIGS的局限性第62页
  参考文献第62-67页
下篇 研究内容第67-177页
 第一章 NADPH氧化酶在激发子诱发的过敏反应和气孔关闭中的功能研究第69-95页
  1 材料和方法第72-75页
   ·材料第72-73页
   ·方法第73-75页
  2 结果和分析第75-84页
   ·NbrbohA和NbrbohB参与激发子诱导的H_2O_2积累第75-78页
   ·RBOH不参与激发子诱导的过敏反应第78页
   ·RBOH沉默不影响激发子诱发的PR基因表达第78-80页
   ·Nbrboh沉默抑制激发子诱导的气孔关闭第80-81页
   ·NO参与激发子诱导的气孔关闭第81-83页
   ·RBOH沉默不影响激发子诱发的[Ca~(2+)]_(cyt)变化第83-84页
   ·H_2O_2和NO之外的AOS不参与激发子诱导的气孔关闭,但参与过敏反应第84页
  3 讨论第84-88页
   ·RBOH参与激发子诱导的H_2O_2积累第85-86页
   ·RBOH不参与激发子诱发的过敏反应第86页
   ·Ca~(2+)作用于RBOH的上游第86-87页
   ·RBOH沉默影响H_2O_2和NO的积累,抑制激发子诱导的气孔关闭,但不影响HR第87-88页
  参考文献第88-95页
 第二章 液泡加工酶(VACUOLAR PROCESSING ENZYME,VPE)在激发子诱发的过敏反应和气孔关闭中的功能研究第95-121页
  1 材料和方法第98-100页
   ·植物材料、激发子的准备及激发子处理植物第98页
   ·重组的马铃薯X病毒载体pgR107第98页
   ·农杆菌菌株第98页
   ·载体构建及农杆菌侵染烟草第98页
   ·DAB染色第98-99页
   ·烟草总RNA的提取及反转录PCR反应(reverse transcriptase polymerase chainreaction,RT-PCR)第99页
   ·气孔开度测量第99-100页
   ·保卫细胞中NO和AOS测量第100页
  2 结果和分析第100-108页
   ·NbVPE1a和NbVPE1a/lb沉默抑制harpin诱导的HR第100-102页
   ·NbVPE不参与激发子诱导的H_2O_2产生第102-103页
   ·NbVPE沉默抑制激发子诱导的气孔关闭第103-106页
   ·Nb VPE沉默抑制激发子诱导的NO产生第106-107页
   ·NbVPE1a/1b双沉默负调控激发子诱导的AOS产生第107-108页
   ·NbVPE1a/1b沉默影响活性氧相关的基因(NbrbohB)和转录因子(WRKY2)的转录第108页
  3 讨论第108-112页
   ·NbVPE1a参与harpin诱导的HR,不参与boehmerin和Nep1诱导的HR第110页
   ·NbVPE和H_2O_2积累、激发子诱导的过敏反应的关系第110-111页
   ·NbVPE依赖的NO积累参与激发子诱导的气孔关闭第111页
   ·NbVPE调节基因的转录第111-112页
  参考文献第112-121页
 第三章 异三聚体G蛋白在激发子诱发的过敏反应和气孔关闭中的功能研究第121-149页
  1 材料和方法第123-126页
   ·植物材料、激发子的准备及激发子处理植物第123-124页
   ·重组的马铃薯X病毒载体pgR107第124页
   ·农杆菌菌株第124页
   ·载体构建及农杆菌侵染烟草第124页
   ·DAB染色第124-126页
   ·烟草总RNA的提取及反转录PCR反应(reverse transcriptase polymerase chainreaction,RT-PCR)第126页
   ·气孔开度测量第126页
   ·保卫细胞中NO和AOS测量第126页
  2 结果和分析第126-136页
   ·N.benthamiana Gα、Gβ1、Gβ2和AC基因的克隆第126-127页
   ·Ga、Gβ2沉默抑制harpin诱导的过敏反应第127-129页
   ·Ga、Gβ2和AC沉默植株削弱激发子诱导的H_2O_2积累第129-130页
   ·Ga、Gβ1和Gβ2沉默抑制激发子诱导的气孔关闭第130-132页
   ·Ga、Gβ1和Gβ2沉默抑制激发子诱导的NO积累第132-133页
   ·Ga、Gβ1、Gβ2和AC沉默差异地调节不同激发子诱导的AOS积累第133-134页
   ·与植物防卫、AOS平衡、转录相关的基因转录分析第134-136页
  3 讨论第136-139页
   ·异三聚体G蛋白(Gα、Gβ)正调控激发子诱发的气孔关闭第137页
   ·Gα和Gβ2参与对细菌蛋白诱导的过敏反应第137-138页
   ·异三聚体G蛋白依赖的NO积累参与激发子诱导的气孔关闭第138页
   ·AC可能不是一个重要的下游效应因子参与植物的防卫第138页
   ·植物的异三聚体G蛋白信号的复杂性第138-139页
  参考文献第139-149页
 第四章 MAPK级联途径在激发子诱发的过敏反应中的功能研究第149-177页
  1 材料和方法第152-154页
   ·植物材料、激发子的准备及激发子处理植物第152页
   ·重组的马铃薯X病毒载体pgR107第152页
   ·农杆菌菌株第152页
   ·载体构建及农杆菌侵染烟草第152-154页
   ·DAB染色第154页
   ·烟草总RNA的提取及反转录PCR反应(reverse transcriptase polymerase chainreaction,RT-PCR)第154页
   ·保卫细胞中NO、AOS测量第154页
   ·保卫细胞中Ca~(2+)测量第154页
  2 结果和分析第154-164页
   ·MAPKKKα、MEK1、MEK2、WIPK、SIPK和NTF6沉默载体构建第154-156页
   ·MAPKKKα-MEK2-WIPK级联途径介导Nep1诱导的HR,不参与boehmerin和harpin诱导的HR第156-157页
   ·MEK2-NTF6级联途径参与激发子诱导的H_2O_2积累第157页
   ·MEK2和WIPK参与Nep1诱导的保卫细胞中NO积累第157-159页
   ·MAPKKKα、MEK1、MEK2、WIPK、SIPK和NTF6沉默不影响激发子诱导的保卫细胞内[Ca~(2+)]_(cyt)和AOS积累第159-161页
   ·与植物防卫、AOS平衡、转录相关的基因转录分析第161-164页
   ·WRKY2参与Nep1诱导的HR,不参与boehmerin和harpin诱导的HR第164页
  3 讨论第164-168页
   ·MAPK级联途径参与植物的防卫反应是外源刺激物依赖的第165-166页
   ·MAPK级联途径调控Nep1诱导的H_2O_2积累和过敏反应第166-167页
   ·MAPK级联途径与NO和H_2O_2积累的交叉第167页
   ·Nep1诱导的MAPK信号调节转录因子WRKY2的转录第167-168页
  参考文献第168-177页
附录1第177-178页
附录2第178-179页
本论文创新点第179-181页
攻读博士学位期间发表的研究论文第181-183页
致谢第183页

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