| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 简写及缩略语 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-38页 |
| 第一章 猪单精子胞浆内注射技术研究进展 | 第13-38页 |
| 1 单精子胞浆内注射的研究简史 | 第13-15页 |
| 2 猪单精子胞浆内注射的研究现状 | 第15-17页 |
| 3 单精子胞浆内注射的操作程序 | 第17-18页 |
| ·卵母细胞采集与处理 | 第17页 |
| ·精子准备 | 第17页 |
| ·显微操作 | 第17-18页 |
| ·注射卵激活 | 第18页 |
| ·ICSI胚胎的培养 | 第18页 |
| 4 影响ICSI效果的因素 | 第18-25页 |
| ·精子状态 | 第19-21页 |
| ·卵子状态 | 第21-23页 |
| ·显微操作技术 | 第23-24页 |
| ·培养系统 | 第24-25页 |
| 5 DNA甲基化对ICSI胚胎发育的影响 | 第25-26页 |
| 6 存在问题 | 第26-27页 |
| ·设备昂贵、成本较高,不利于生产推广 | 第26-27页 |
| ·总体效率低 | 第27页 |
| ·遗传因素及染色体异常 | 第27页 |
| 7 应用前景 | 第27-30页 |
| ·在受精机理研究上的应用 | 第28页 |
| ·提高珍稀野生动物的精子利用率 | 第28页 |
| ·为转基因研究开辟新途径 | 第28-29页 |
| ·有效用于性别控制 | 第29页 |
| ·治疗雄性不育 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-38页 |
| 第二部分 试验研究 | 第38-68页 |
| 第二章 用冻精体外生产猪ICSI胚胎研究 | 第38-56页 |
| 摘要 | 第38-39页 |
| 1 材料 | 第39-42页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·主要试剂和药品 | 第39-41页 |
| ·各种试剂、激素、制剂的配制 | 第41-42页 |
| ·显微操作针的制备 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-46页 |
| ·卵巢卵母细胞采集 | 第42-43页 |
| ·卵母细胞体外成熟 | 第43页 |
| ·体外受精与胚胎培养 | 第43-44页 |
| ·颗粒细胞共培养饲养层的制备 | 第44页 |
| ·卵丘细胞共培养饲养层的制备 | 第44页 |
| ·单精注射与胚胎培养 | 第44-45页 |
| ·ICSI胚胎原核形成的评价 | 第45页 |
| ·试验设计 | 第45-46页 |
| ·数据处理 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-49页 |
| ·不同激活方法对ICSI胚发育效果的影响 | 第46-47页 |
| ·成熟培养对猪卵母细胞ICSI胚胎发育的影响 | 第47页 |
| ·添加L-半胱氨酸对猪ICSI胚胎发育的影响 | 第47-48页 |
| ·共培养对猪ICSI胚胎发育的影响 | 第48页 |
| ·猪ICSI胚胎与IVF胚胎的体外发育比较 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| ·不同激活方法对ICSI胚发育效果的比较 | 第49-50页 |
| ·成熟培养对猪卵母细胞ICSI胚胎发育的影响 | 第50-51页 |
| ·添加L-半胱氨酸对猪ICSI胚胎发育的影响 | 第51页 |
| ·共培养对猪ICSI胚胎发育的影响 | 第51-52页 |
| ·猪ICSI胚胎与IVF胚胎的体外发育比较 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 第三章 猪ICSI胚胎培养过程中DNA甲基化水平的变化 | 第56-68页 |
| 摘要 | 第56页 |
| 1 材料 | 第56-58页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第57页 |
| ·实验所用引物及试剂配制 | 第57-58页 |
| 2 方法 | 第58-60页 |
| ·总RNA的提取及鉴定 | 第58-59页 |
| ·逆转录cDNA | 第59页 |
| ·Real-time PCR | 第59-60页 |
| ·试验设计 | 第60页 |
| ·数据处理 | 第60页 |
| 3 结果 | 第60-64页 |
| ·猪ICSI胚胎DNMT1 mRNA和DNMT3A mRNA表达水平的变化 | 第60-62页 |
| ·猪ICSI胚胎Bcl-2 mRNA表达水平的变化 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| ·猪ICSI胚胎DNMT1 mRNA和DNMT3AmRNA表达水平的变化 | 第64-65页 |
| ·猪ICSI胚胎Bcl-2 mRNA表达水平的变化 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 全文总结 | 第68-69页 |
| 附录一 溶液配置 | 第69-71页 |
| 附录二 图版及说明 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
