摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 绪论 | 第13-19页 |
·棘球蚴病的病原学 | 第13-14页 |
·棘球蚴病的流行病学 | 第14页 |
·棘球蚴病的防治 | 第14-15页 |
·棘球蚴病 EG95 疫苗的研究进展 | 第15-18页 |
·EG95 蛋白 | 第15页 |
·基因工程亚单位疫苗 | 第15-16页 |
·多肽疫苗 | 第16页 |
·核酸疫苗 | 第16-17页 |
·EG95 重组 BCG 疫苗 | 第17页 |
·EG95 重组酵母 | 第17-18页 |
·EG95 重组牛痘病毒疫苗 | 第18页 |
·展望 | 第18-19页 |
第二章 细粒棘球蚴 EG95 蛋白的可溶性表达 | 第19-36页 |
·实验材料 | 第19-23页 |
·菌株和质粒 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·试验所用溶液及配置 | 第20-22页 |
·主要仪器设备 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-28页 |
·重组质粒的构建 | 第23-26页 |
·重组蛋白的表达 | 第26-27页 |
·重组蛋白的Western-blot 鉴定 | 第27页 |
·重组蛋白的可溶性分析 | 第27页 |
·重组蛋白的纯化 | 第27-28页 |
·结果 | 第28-34页 |
·阳性质粒的鉴定 | 第28-30页 |
·重组蛋白的表达 | 第30-32页 |
·重组蛋白的Western-blot 鉴定 | 第32页 |
·重组蛋白的可溶性分析 | 第32-33页 |
·重组蛋白的纯化 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
第三章 EG95s 重组蛋白表达条件的优化 | 第36-46页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·菌株 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36页 |
·溶液的配制及主要仪器 | 第36-37页 |
·方法 | 第37-39页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第37页 |
·宿主菌的优化 | 第37页 |
·诱导条件的优化 | 第37-38页 |
·培养条件的优化 | 第38-39页 |
·优化结果的验证 | 第39页 |
·结果 | 第39-44页 |
·宿主菌的优化 | 第39-40页 |
·培养条件的优化 | 第40-42页 |
·培养条件的优化 | 第42-44页 |
·优化结果的验证 | 第44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
第四章 EG95s 重组蛋白间接ELISA 方法的建立 | 第46-58页 |
·实验材料 | 第46-48页 |
·质粒和血清 | 第46页 |
·主要试剂和器材 | 第46-47页 |
·试验所用溶液及配制 | 第47页 |
·主要仪器设备 | 第47-48页 |
·方法 | 第48-50页 |
·EG95s 重组蛋白的表达 | 第48页 |
·透析袋的处理 | 第48页 |
·EG95s 重组蛋白的纯化和 Western-blot 鉴定 | 第48页 |
·EG95s 重组蛋白的定量 | 第48-49页 |
·EG95s 重组蛋白间接 ELISA 方法的建立 | 第49-50页 |
·结果 | 第50-56页 |
·EG95s 重组蛋白的纯化和 Western-blot 鉴定 | 第50-51页 |
·蛋白的定量 | 第51页 |
·间接ELISA 方法的建立 | 第51-56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
第五章 EG95s 重组蛋白免疫原性分析 | 第58-64页 |
·实验材料 | 第58-59页 |
·实验动物 | 第58页 |
·主要试剂和器材 | 第58页 |
·溶液配制及仪器设备 | 第58-59页 |
·方法 | 第59-60页 |
·重组蛋白的诱导表达,纯化及Western-blot 检验 | 第59页 |
·免疫程序 | 第59页 |
·样本采集 | 第59页 |
·ELISA 方法检测小鼠血清特异性抗体 | 第59-60页 |
·结果 | 第60-63页 |
·重组蛋白的纯化和Western-blot 验证 | 第60-61页 |
·免疫后小鼠抗体动态水平监测结果 | 第61页 |
·免疫后42 天小鼠最终抗体滴度的检测 | 第61-63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
第六章 全文总结 | 第64-65页 |
·细粒棘球蚴EG95s 蛋白的表达及表达条件的优化 | 第64页 |
·EG95s 重组蛋白间接 ELISA 方法的建立 | 第64页 |
·EG95s 重组蛋白免疫原性分析 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简历 | 第70页 |