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基于实时PCR的多靶检测技术研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-15页
前言第15-25页
 §1 实时PCR概述第15-17页
 §2 实时PCR多靶检测第17-18页
 §3 论文的提出第18-19页
 参考文献第19-25页
第一部分 多色组合探针编码技术的研究第25-87页
 第一章 多色组合探针编码技术用于八种食源性致病菌的识别第27-45页
  第一节 引言第27-28页
  第二节 材料和方法第28-32页
  第三节 结果第32-39页
   §3.1 MCPC体系的设计第32-33页
   §3.2 单重实时PCR检测各种目标菌第33-34页
   §3.3 单色荧光标记探针与双色荧光标记探针的比较第34-35页
   §3.4 MCPC体系的建立第35-38页
   §3.5 118份菌株标本对MCPC体系的评价第38-39页
  第四节 讨论第39-41页
  参考文献第41-45页
 第二章 Taq DNA聚合酶的5′→3′核酸外切酶活性对荧光双链置换探针的影响第45-64页
  第一节 引言第45-46页
  第二节 材料和方法第46-49页
  第三节 结果第49-60页
   §3.1 Taq酶5′外切酶活性对实时PCR非特异荧光信号的影响第49-50页
   §3.2 Taq酶5′外切活性对荧光双链置换探针影响第50-52页
   §3.3 探针所标记的荧光基团和淬灭基团对Taq酶酶切效率的影响第52-54页
   §3.4 标记不同的荧光基团和淬灭基团对Taq酶酶切效率的影响第54-55页
   §3.5 荧光双链置换探针的核苷酸序列对Taq酶酶切效率的影响第55-58页
   §3.6 不同的5′末端的结构以及环境因素对Taq酶酶切效率的影响第58页
   §3.7 改进的荧光双链置换探针实时PCR检测体系第58-60页
  第四节 讨论第60-61页
  参考文献第61-64页
 第三章 多色组合探针编码技术用于β-珠蛋白基因多种突变的检测第64-87页
  第一节 引言第64-66页
  第二节 材料和方法第66-70页
  第三节 结果第70-80页
   §3.1 MCPC体系的设计第70-73页
   §3.2 荧光双链置换探针的特异性第73-74页
   §3.3 单重实时PCR检测体系的建立第74页
   §3.4 MCPC检测体系的建立第74-76页
   §3.5 MCPC检测体系的灵敏度第76-77页
   §3.6 临床标本检测第77-80页
  第四节 讨论第80-83页
  参考文献第83-87页
第二部分 探针熔解曲线分析技术的研究第87-139页
 第一章 几种常用的荧光探针用于熔解曲线分析的比较第88-107页
  第一节 引言第88-89页
  第二节 材料和方法第89-92页
  第三节 结果第92-100页
   §3.1 几种常用的荧光探针用于熔解曲线分析的可行性考察第92-96页
   §3.2 实时PCR扩增体系及探针熔解曲线分析体系的建立第96-99页
   §3.3 各探针用于均相熔解曲线分析体系的比较第99-100页
  第四节 讨论第100-104页
  参考文献第104-107页
 第二章 改良分子信标探针熔解曲线法用于β-珠蛋白基因多种突变的检测第107-139页
  第一节 引言第107-108页
  第二节 材料和方法第108-116页
  第三节 结果第116-133页
   §3.1 β-地中海贫血中国常见突变质粒的构建第116-117页
   §3.2 人工合成的靶序列熔解曲线分析考察各探针检测突变的能力第117-122页
   §3.3 单重单色实时PCR体系及熔解曲线分析体系的建立第122-123页
   §3.4 同种荧光标记的不同探针检测不同区域的突变第123-125页
   §3.5 改良分子信标探针熔解曲线法可以检出的杂合比例范围第125-126页
   §3.6 多重多色实时PCR体系及熔解曲线分析体系的建立第126-129页
   §3.7 多重多色突变检测体系的检测灵敏度第129-131页
   §3.8 临床标本检测第131-133页
  第四节 讨论第133-137页
  参考文献第137-139页
英文缩写索引第139-140页
博士期间发表交流论文第140-142页
致谢第142页

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