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水稻花发育相关基因EL1的图位克隆与功能分析

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
引言第14-15页
第1章 文献综述第15-35页
   ·花分生组织的发育第16-20页
     ·植物开花时间的光周期调控第16-17页
     ·花序分生组织的起始第17页
     ·花分生组织的发育第17-20页
   ·花器官发育的分子生物学第20-30页
     ·花器官特征基因的ABC模型第20-23页
     ·花器官发育的特征基因第23-29页
     ·控制花器官数量的相关基因第29页
     ·水稻中花器官发育基因的ABCE模型第29-30页
   ·植物MADS-box基因概述第30-34页
     ·植物MADS-box基因的分布第30-32页
     ·植物MADS-box基因的结构特征第32页
     ·植物MADS-box基因的分类第32-33页
     ·MADS-box基因与花器官发育第33-34页
   ·前景展望第34-35页
第2章 材料与方法第35-50页
   ·材料第35页
     ·植物材料第35页
     ·菌种及质粒第35页
     ·主要分子生物学试剂第35页
     ·主要试剂盒第35页
     ·主要仪器第35页
   ·形态和组织学分析第35-36页
     ·解剖镜分析第35-36页
     ·石蜡切片分析第36页
     ·扫描电镜第36页
   ·水稻DNA的提取第36-37页
     ·CTAB法第36-37页
     ·简易碱煮法第37页
   ·水稻总RNA的分离和纯化第37-38页
     ·RNA的分离第37-38页
     ·RNA的纯化第38页
     ·mRNA的反转录第38页
   ·基因定位第38-41页
     ·遗传分析第38页
     ·定位群体的构建第38页
     ·连锁分析和图谱构建第38-39页
     ·SSR分析第39-41页
   ·EL1(OsMADS32)基因的克隆与序列分析第41页
   ·EL1基因的RT-PCR表达分析第41-43页
     ·EL1基因的半定量RT-PCR表达分析第41-42页
     ·已知花器官特征基因的RT-PCR表达分析第42页
     ·EL1基因的定量RT-PCR表达分析第42-43页
   ·mRNA原位杂交第43-46页
     ·材料的固定、包埋、切片和粘片第43页
     ·探针标记第43-44页
     ·切片预处理第44-45页
     ·杂交第45页
     ·洗片第45页
     ·检测第45-46页
   ·RNA干涉载体的设计与构建第46-47页
     ·引物的设计第46页
     ·干涉片段的获得第46页
     ·干涉表达载体pCAMBIA1305-35S::EL1Ri的构建第46-47页
   ·过量表达载体的设计与构建第47-48页
     ·引物的设计第47页
     ·EL1基因编码框的获得第47页
     ·EL1过量表达载体pCAMBIA1305-35S::EL1的构建第47-48页
   ·农杆菌介导法转化水稻第48-50页
     ·各种培养基第48页
     ·水稻愈伤组织的诱导第48页
     ·共培养第48-49页
     ·转化体的筛选和再生第49-50页
第3章 结果与分析第50-79页
   ·突变体的形态和组织学分析第50-54页
     ·早期形态分析第50-51页
     ·el1突变体花器官的观察分析第51页
     ·el1突变体花器官的观察统计第51-53页
     ·el1突变体花器官的石蜡切片分析第53-54页
   ·el1突变体的遗传分析第54-55页
   ·EL1基因的分子标记定位第55-57页
     ·EL1基因的初步定位第55-56页
     ·EL1基因的精细定位第56-57页
   ·候选基因的筛选和克隆分析第57-63页
     ·候选基因的筛选第57页
     ·候选基因的克隆分析第57-60页
     ·候选基因的酶切分析第60-61页
     ·EL1基因的核酸和蛋白质的分析第61页
     ·EL1基因的系统进化分析第61-63页
   ·EL1基因的表达模式分析第63-65页
     ·EL1基因在穗部特异表达第63页
     ·EL1基因在穗发育不同时期的表达第63-64页
     ·EL1基因的RNA原位杂交分析第64-65页
   ·EL1基因的RNAi功能分析第65-71页
     ·RNA干涉表达载体的构建第65-67页
     ·RNA干涉表达载体的转化及转基因植株的检测第67-69页
     ·转基因植株的表型分析第69-70页
     ·EL1基因在RNAi转基因植株的表达分析第70-71页
   ·EL1的过量表达分析第71-72页
     ·EL1的过量表达载体的构建第71-72页
     ·EL1的过量表达载体的转化及转基因植株的表型鉴定第72页
   ·EL1与其他花发育基因之间的关系第72-79页
     ·主要花发育基因在野生型和el1内的表达分析第72-73页
     ·EL1与其他主要花发育相关基因的多序列比较和系统进化分析第73-79页
第4章 结论与讨论第79-85页
   ·主要结论第79-80页
     ·el1突变体表型鉴定第79页
     ·遗传分析和基因定位第79页
     ·EL1基因的克隆和信息分析第79页
     ·EL1基因的时空表达分析第79页
     ·EL1基因的功能分析第79-80页
     ·EL1基因与其他花器官发育基因的关系第80页
   ·讨论第80-85页
     ·EL1基因调控水稻四轮花器官的确定性发育第81页
     ·EL1基因的表达模式第81-82页
     ·EL1基因独立于ABCE模型基因之外调控花器官的发育第82-83页
     ·EL1基因是禾本科特有的花器官发育基因第83-84页
     ·水稻的内颖和外颖与拟南芥花萼之间的对应关系第84-85页
参考文献第85-97页
附录第97-106页
致谢第106页

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