| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 主要缩略词表 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-15页 |
| 1 材料与方法 | 第15-40页 |
| 1.1 实验材料 | 第15-22页 |
| 1.1.1 主要材料与试剂 | 第15-16页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第16-17页 |
| 1.1.3 植物材料、菌株与质粒 | 第17-18页 |
| 1.1.4 培养基 | 第18-19页 |
| 1.1.5 引物序列 | 第19-22页 |
| 1.2 实验方法 | 第22-40页 |
| 1.2.1 转录组测序及数据分析 | 第22-23页 |
| 1.2.2 总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 1.2.3 RNA反转录 | 第24-26页 |
| 1.2.4 实时荧光定量分析 | 第26-29页 |
| 1.2.5 大肠杆菌超级感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 1.2.6 琼脂糖凝胶回收目的片段和质粒小量提取 | 第29-31页 |
| 1.2.7 基因克隆和单菌落PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 1.2.8 载体的构建 | 第32-37页 |
| 1.2.9 酿酒酵母感受态细胞的制备和转化 | 第37-39页 |
| 1.2.10 酵母工程菌的发酵 | 第39页 |
| 1.2.11 发酵产物检测 | 第39-40页 |
| 2 实验结果 | 第40-63页 |
| 2.1 黄芪转录组测序结果 | 第40-42页 |
| 2.1.1 转录组测序数据分析 | 第40-41页 |
| 2.1.2 P450基因的筛选 | 第41-42页 |
| 2.2 P450基因的实时荧光定量分析 | 第42-45页 |
| 2.2.1 扩增效率实验结果 | 第42-43页 |
| 2.2.2 在过表达SE株系中的荧光定量分析结果 | 第43-44页 |
| 2.2.3 组织特异性表达结果 | 第44-45页 |
| 2.3 基因克隆 | 第45-53页 |
| 2.3.1 RACE技术获得基因末端序列 | 第45-46页 |
| 2.3.2 基因的全长克隆结果 | 第46页 |
| 2.3.3 Am CYP82D47、Am CYP71A26、Am CYP93A3 基因的生物学信息分析 | 第46-53页 |
| 2.4 Am CYP82D47、Am CYP71A26、Am CYP93A3 基因的载体构建 | 第53-57页 |
| 2.4.1 克隆载体的构建 | 第53-54页 |
| 2.4.2 酵母表达载体的构建 | 第54-56页 |
| 2.4.3 植物表达载体的构建 | 第56-57页 |
| 2.5 在酿酒酵母中的转化和发酵 | 第57-58页 |
| 2.5.1 在酿酒酵母中的转化 | 第57-58页 |
| 2.5.2 在酿酒酵母中的发酵 | 第58页 |
| 2.6 工程菌酵母发酵产物的初步检测 | 第58-63页 |
| 3 分析和讨论 | 第63-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 附录一 文献综述 黄芪皂苷的研究进展 | 第70-80页 |
| 参考文献 | 第77-80页 |
| 附录二 硕士期间参加学术会议 | 第80页 |