| 缩略语表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-14页 |
| Abstract | 第14-20页 |
| 前言 | 第20-22页 |
| 文献回顾 | 第22-44页 |
| 1. 原发性肝癌基因治疗现状 | 第22-37页 |
| 2. 原发性肝癌自杀基因治疗现状 | 第37-40页 |
| 3. 新型自杀基因linamarase/linamarin系统研究现状 | 第40-44页 |
| 正文 | 第44-97页 |
| 实验一 linamarase稳定转染肝癌细胞系的建立及研究 | 第44-60页 |
| 1 材料 | 第44-46页 |
| ·细胞系及动物 | 第44-45页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-53页 |
| ·真核表达载体pcDNA-lis的构建和鉴定 | 第46-48页 |
| ·稳定转染肝癌细胞系HepG2/lis的建立 | 第48-49页 |
| ·稳转细胞HepG2/lis的鉴定 | 第49-51页 |
| ·稳转细胞lis酶活性检测 | 第51-52页 |
| ·HepG2/lis细胞生物学特性分析 | 第52-53页 |
| ·lin的细胞毒性分析 | 第53页 |
| ·统计学分析 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-57页 |
| ·lis cDNA的克隆及真核表达载体构建 | 第53-54页 |
| ·稳定转染细胞系的鉴定 | 第54页 |
| ·稳定转染细胞lis酶活性鉴定 | 第54-55页 |
| ·稳转细胞形态学观察 | 第55页 |
| ·生长曲线及细胞周期分析 | 第55-56页 |
| ·稳转细胞系体内成瘤活性 | 第56-57页 |
| ·lin对HepG2 的细胞毒性分析 | 第57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 实验二 重组腺病毒介导lis/lin自杀基因系统对多种肿瘤细胞系的体内外杀伤 | 第60-79页 |
| 1 材料 | 第60-62页 |
| ·细胞系及动物 | 第60页 |
| ·主要试剂 | 第60-61页 |
| ·主要仪器 | 第61-62页 |
| 2 方法 | 第62-69页 |
| ·构建基于ViraPower?载体系统的重组腺病毒 | 第62-66页 |
| ·重组腺病毒体外杀伤实验 | 第66页 |
| ·重组腺病毒体外旁观者效应 | 第66-67页 |
| ·lis/lin系统抑制肿瘤作用机理 | 第67-68页 |
| ·重组腺病毒体内抑瘤实验 | 第68页 |
| ·肿瘤组织病理学检查 | 第68-69页 |
| ·统计学分析 | 第69页 |
| 3 结果 | 第69-76页 |
| ·重组腺病毒载体的构建 | 第69-70页 |
| ·重组腺病毒感染MOI的确定 | 第70-71页 |
| ·重组腺病毒感染后lis的表达 | 第71页 |
| ·重组腺病毒体外杀伤及旁观者效应 | 第71-73页 |
| ·lis/lin系统杀伤机理 | 第73-74页 |
| ·重组腺病毒体内抑瘤实验 | 第74页 |
| ·移植瘤组织学检查 | 第74-76页 |
| 4 讨论 | 第76-79页 |
| 实验三 AFP启动子调控lis/lin重组腺病毒系统靶向治疗原发性肝癌 | 第79-97页 |
| 1 材料 | 第79-81页 |
| ·细胞株及动物 | 第79-80页 |
| ·主要试剂 | 第80-81页 |
| ·主要仪器 | 第81页 |
| 2 方法 | 第81-87页 |
| ·AFP启动子的克隆、重组及鉴定 | 第81-83页 |
| ·AFP启动子与lis cDNA的连接重组 | 第83-84页 |
| ·含AFP启动子的lis重组腺病毒的构建及鉴定 | 第84-85页 |
| ·重组腺病毒体外杀伤实验 | 第85页 |
| ·重组腺病毒体外旁观者效应 | 第85页 |
| ·重组腺病毒体内实验 | 第85-87页 |
| ·统计学分析 | 第87页 |
| 3 结果 | 第87-94页 |
| ·AFP启动子的克隆、重组及鉴定 | 第87页 |
| ·AFP启动子转录活性鉴定 | 第87-88页 |
| ·构建AFP启动子引导的lis重组质粒 | 第88页 |
| ·重组腺病毒 Ad-AFP-lis 的构建、扩增及纯化 | 第88-89页 |
| ·重组腺病毒体外感染及目的基因表达测定 | 第89-90页 |
| ·重组腺病毒体外抑瘤实验 | 第90-91页 |
| ·重组腺病毒体内实验 | 第91-92页 |
| ·肿瘤组织病理及免疫组化分析 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-97页 |
| 小结 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-114页 |
| 个人简历和研究成果 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
