中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
英文缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第13-14页 |
第二章 背景回顾 | 第14-30页 |
·移植免疫抑制的基因治疗研究进展 | 第14-20页 |
·基因治疗克服移植免疫排斥反应及诱导免疫耐受的优点 | 第14页 |
·应用于基因治疗的载体 | 第14-18页 |
·用于基因治疗的靶分子 | 第18-20页 |
·腺相关病毒和腺相关病毒载体的研究进展 | 第20-23页 |
·腺相关病毒的生物学特性 | 第21-22页 |
·腺相关病毒载体的优点 | 第22页 |
·重组腺相关病毒(rAAV)的包装 | 第22页 |
·重组AAV(rAAV)对细胞的转染 | 第22-23页 |
·转基因治疗疾病的优点 | 第23页 |
·细胞内抗体的研究进展 | 第23-27页 |
·胞内抗体的优点 | 第24页 |
·胞内抗体的构建 | 第24-26页 |
·胞内抗体的应用 | 第26-27页 |
·信号肽的研究进展 | 第27-30页 |
·信号假说 | 第27-28页 |
·信号肽在蛋白质可分泌表达中的意义及应用 | 第28-30页 |
第三章 目的基因(F105VH-scFv-KDEL)的合成及克隆 | 第30-40页 |
一、实验方案 | 第30页 |
二、材料和方法 | 第30-35页 |
三、结果 | 第35-40页 |
1 克隆基因DNASIS的酶切鉴定及其酶谱 | 第35页 |
2 克隆DNASIS基因序列分析 | 第35-40页 |
第四章 pSSHG/DNASIS重组腺相关病毒载体的构建 | 第40-46页 |
一、实验方案 | 第40-41页 |
二、材料和方法 | 第41-45页 |
三、结果 | 第45-46页 |
第五章 重组腺相关病毒(rAAV/F105VH-scFv-KDEL)的包装及滴度测定 | 第46-51页 |
一、实验方案 | 第46页 |
二、材料和方法 | 第46-50页 |
三、结果 | 第50-51页 |
1 rAAV/F105VH-scFv-KDEL重组病毒的包装 | 第50-51页 |
2 重组病毒滴度的斑点杂交结果 | 第51页 |
第六章 重组病毒敲除血管内皮细胞MHC-Ⅰ的作用研究 | 第51-57页 |
一、实验方案 | 第51页 |
二、材料和方法 | 第51-56页 |
三、结果 | 第56-57页 |
1 RT-PCR产物电泳鉴定结果 | 第56页 |
2 细胞表面MHC-Ⅰ表达的鉴定 | 第56页 |
3 微量细胞毒实验结果 | 第56-57页 |
第七章 讨论 | 第57-63页 |
一、抗MHC-Ⅰ胞内抗体融合基因的构建 | 第58-59页 |
二、pSSHG/F105VH-scFv-KDEL重组腺相关病毒载体构建及包装 | 第59-60页 |
三、重组腺相关病毒载体的体外细胞效应 | 第60-61页 |
四、本研究的特色及创新 | 第61-62页 |
五、问题与展望 | 第62-63页 |
第八章 结论 | 第63-64页 |
附图 | 第64-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第76-77页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第77页 |