| 缩写字母表 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 前言 | 第16-20页 |
| 第一部分 中国健康志愿者单次口服他克莫司的药物动力学研究 | 第20-40页 |
| 1 引言 | 第20-21页 |
| 2 实验仪器、药品和试剂 | 第21-22页 |
| ·主要化学品 | 第21-22页 |
| ·仪器和消耗品 | 第22页 |
| 3 方法 | 第22-26页 |
| ·人体试验方法 | 第22-24页 |
| ·受试者选择 | 第22-23页 |
| ·研究设计与血样采集 | 第23-24页 |
| ·他克莫司LC-MS/MS测定方法 | 第24-26页 |
| ·色谱条件 | 第24页 |
| ·质谱条件 | 第24页 |
| ·全血样品的处理 | 第24-25页 |
| ·标准曲线 | 第25页 |
| ·准确度和精密度 | 第25页 |
| ·提取回收率 | 第25页 |
| ·稳定性 | 第25-26页 |
| ·介质效应 | 第26页 |
| 4 结果 | 第26-28页 |
| ·人体试验 | 第26页 |
| ·他克莫司分析方法验证 | 第26-28页 |
| ·专一性 | 第26页 |
| ·线性范围 | 第26-27页 |
| ·最低定量限(LLOQ) | 第27页 |
| ·准确度和精密度 | 第27页 |
| ·提取回收率 | 第27页 |
| ·稳定性 | 第27-28页 |
| ·介质效应 | 第28页 |
| ·志愿者血药浓度测定 | 第28页 |
| ·药物动力学参数 | 第28页 |
| 5 讨论 | 第28-29页 |
| 6 结论 | 第29-30页 |
| 7 附图 | 第30-33页 |
| 图1-1 他克莫司化学结构图 | 第30页 |
| 图1-2 空白人全血的色谱图 | 第30-31页 |
| 图1-3 他克莫司在人全血中的标准曲线(1/X加权) | 第31页 |
| 图1-4 他克莫司的最低定量限(LLOQ)色谱图 | 第31-32页 |
| 图1-5 22名志愿者口服5mg普乐可复后平均药时曲线图 | 第32-33页 |
| 8 附表 | 第33-40页 |
| 表1-1 受试者一般资料 | 第33-34页 |
| 表1-2 验证试验(3批次)标准曲线结果 | 第34页 |
| 表1-3 批内(RUN1)精密度(Precision)和准确度(Bias) | 第34-35页 |
| 表1-4 批间(RUN1～RUN3)精密度(Precision)和准确度(Bias) | 第35页 |
| 表1-5 他克莫司和IS提取回收率 | 第35-36页 |
| 表1-6 提取后的样品放置于自动进样器中的稳定性 | 第36页 |
| 表1-7 质控样品经3次冻融试验的稳定性 | 第36-37页 |
| 表1-8 他克莫司和IS介质效应 | 第37-38页 |
| 表1-9 22名志愿者口服5mg普乐可复胶囊后72小时经时曲线浓度(ng/mL) | 第38-39页 |
| 表1-10 22名志愿者口服5mg普乐可复胶囊后主要药物动力学参数 | 第39-40页 |
| 第二部分 中国健康志愿者MDR1,CYP3A4*18B和CYP3A5*3基因和CYP3A表型研究 | 第40-52页 |
| 1 引言 | 第40页 |
| 2 实验仪器与试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器 | 第40-41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| 3 方法 | 第41-45页 |
| ·基因测序方法 | 第41-44页 |
| ·DNA抽提 | 第41-42页 |
| ·PCR扩增 | 第42-43页 |
| ·PCR产物纯化 | 第43页 |
| ·PCR产物测序 | 第43-44页 |
| ·统计分析 | 第44页 |
| ·CYP3A表型分型LC-MS/MS测定咪达唑仑和1’-羟基咪达唑仑方法 | 第44-45页 |
| ·溶液配制 | 第44页 |
| ·色谱条件 | 第44-45页 |
| ·血浆样品前处理 | 第45页 |
| ·质谱条件 | 第45页 |
| ·线性 | 第45页 |
| 4 结果 | 第45-46页 |
| ·基因测序结果 | 第46页 |
| ·咪达唑仑和1-羟基咪达唑仑浓度测定结果 | 第46页 |
| 5 讨论 | 第46页 |
| 6 结论 | 第46-47页 |
| 7 附表 | 第47-52页 |
| 表2-1 MDR1,CYP3A4和CYP3A5的单核酸多态性基因分型的引物序列 | 第47页 |
| 表2-2 基因检测样品反应体系 | 第47-48页 |
| 表2-3 PCR循环条件 | 第48页 |
| 表2-4 咪哒唑仑和1’-羟基-咪哒唑仑一系列标准血浆储备样本的制备 | 第48页 |
| 表2-5 LC-MS/MS检测条件 | 第48-49页 |
| 表2-6 22名健康志愿者MDR1等位基因和CYP3A4*18B,CYP3A5*3基因类型 | 第49-50页 |
| 表2-7 22名健康志愿者CYP3A4*18B,CYP3A5*3和MDR1等位基因和基因型频率 | 第50-51页 |
| 表2-8 21名健康志愿者口服咪哒唑仑4小时后血浆1’-羟基咪哒唑仑、咪哒唑仑浓度及比值 | 第51-52页 |
| 第三部分 中国健康志愿者的MDR1,CYP3A4*18B和CYP3A5*3基因多态性和咪达唑仑的CYP3A表型分析与他克莫司药动学相关性研究 | 第52-73页 |
| 1 引言 | 第52页 |
| 2 实验材料 | 第52页 |
| 3 方法 | 第52-56页 |
| ·非房室模型 | 第53-54页 |
| ·非房室药动学参数计算 | 第53页 |
| ·他克莫司药动学参数和咪达唑仑浓度之间的关系 | 第53-54页 |
| ·非线性多效模型 | 第54-56页 |
| ·数据分析程序 | 第54页 |
| ·基本模型 | 第54页 |
| ·统计学模型 | 第54-55页 |
| ·协变量筛选 | 第55页 |
| ·模型评价标准 | 第55页 |
| ·药动学参数计算 | 第55-56页 |
| ·模型评估 | 第56页 |
| 4 结果 | 第56-59页 |
| ·非房室模型结果 | 第56-59页 |
| ·CYP3A4,CYP3A5和MDR1 SNPs的作用 | 第56-57页 |
| ·MDR1单倍体/连接基因型和CYP3A4/5联合基因型的作用 | 第57-58页 |
| ·CYP3A表型探针咪达唑仑与他克莫司清除率之间的关系 | 第58-59页 |
| ·非线性多效模型 | 第59页 |
| 5 讨论 | 第59-62页 |
| 6 结论 | 第62-63页 |
| 7 附图 | 第63-69页 |
| 图3-1 22名志愿者CYP3A4*18B,CYP3A5*3,CYP3A4*18B-CYP3A5*3联合基因型与他克莫司AUC_(inf)的相关性 | 第63-65页 |
| 图3-2 基本拟合优度图 | 第65-67页 |
| 图3-3 他克莫司全血浓度观测值及模型对CYP3A4*1/*1-CYP3A5*3/*3携带者(右图)和非携带者(左图)90%区间预测 | 第67-68页 |
| 图3-4 100次模拟研究群体中CYP3A4*18B,CYP3A5*3和CYP3A4*18B-CYP3A5*3不同基因型他克莫司暴露频率分布 | 第68-69页 |
| 8 附表 | 第69-73页 |
| 表3-1 22名健康志愿者MDR1单核酸多态性,CYP3A4,CYP3A5,CYP3A4*18B-CYP3A5*3联合基因型和他克莫司药动学参数相关牲 | 第69-70页 |
| 表3-2 21名健康志愿者服咪哒唑仑4小时血浆1’-羟基咪哒唑仑、咪哒唑仑浓度及其比值与CYP3A基因型关系 | 第70-71页 |
| 表3-3 采用Spearman相关系数法分析21名健康志愿者服咪哒唑仑4小时血浆1’-羟基咪哒唑仑、咪哒唑仑浓度及其比值与他克莫司清除率关系 | 第71-72页 |
| 表3-4 他克莫司群体药动学参数在所有数据集和五个不同子集估计(交叉验证) | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 附录 | 第77-78页 |
