提要 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
中英文缩写词表 | 第12-13页 |
第1章 绪论 | 第13-27页 |
·前言 | 第13-14页 |
·胃蛋白酶原的研究进展 | 第14-21页 |
·胃蛋白酶及其酶原的结构特征 | 第14-15页 |
·胃蛋白酶原的分类与分布 | 第15页 |
·胃蛋白酶的性质和功能 | 第15-16页 |
·胃蛋白酶原在机体的生成机制 | 第16页 |
·胃蛋白酶原 A 的激活机制 | 第16页 |
·胃蛋白酶的来源 | 第16-17页 |
·胃蛋白酶的用途 | 第17-21页 |
·重组胃蛋白酶原表达的研究进展 | 第21页 |
·大肠杆菌表达系统简介 | 第21-22页 |
·酿酒酵母表达系统简介 | 第22-24页 |
·酿酒酵母表达系统的特点 | 第22-23页 |
·用于酵母表达的两类载体 | 第23页 |
·外源基因在酿酒酵母中高效表达的影响因素 | 第23-24页 |
·立题依据 | 第24页 |
·研究目的和内容 | 第24-25页 |
·研究目的 | 第24-25页 |
·研究内容 | 第25页 |
·技术路线 | 第25-27页 |
第2章 材料和方法 | 第27-43页 |
·实验材料和试剂 | 第27-30页 |
·实验材料 | 第27页 |
·质粒和菌种 | 第27页 |
·主要培养基 | 第27-28页 |
·主要溶液 | 第28-29页 |
·主要实验设备 | 第29-30页 |
·引物设计与合成 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-43页 |
·人胃蛋白酶原 A 的基因克隆 | 第30-34页 |
·质粒 pET-28a-PGA 在大肠杆菌中的转化和诱导表达 | 第34-35页 |
·大肠杆菌表达的 PGA 的纯化 | 第35-38页 |
·质粒 pYES2-PGA 在酿酒酵母中的转化和诱导表达 | 第38-40页 |
·酿酒酵母表达 PGA 的 Western blotting 鉴定 | 第40-43页 |
第3章 实验结果与分析 | 第43-61页 |
·PGA 在大肠杆菌中的表达 | 第43-53页 |
·PGA 编码基因的钓取及重组表达质粒的构建 | 第43-48页 |
·PGA 在大肠杆菌中的诱导表达 | 第48-50页 |
·PGA 重组蛋白的镍亲和层析和凝胶过滤层析纯化 | 第50-51页 |
·PGA 酶活性检测 | 第51-52页 |
·PGA 特异性抗血清的制备及抗体水平的测定 | 第52-53页 |
·人胃蛋白酶原在酿酒酵母中的表达 | 第53-61页 |
·PGA 编码基因的亚克隆及重组表达质粒的构建 | 第53-55页 |
·PGA 在酿酒酵母中的诱导表达 | 第55-58页 |
·酿酒酵母表达 PGA 的 Western blotting 鉴定 | 第58-59页 |
·酿酒酵母表达的 PGA 酶活性检测 | 第59-61页 |
第4章 讨论 | 第61-65页 |
结论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
作者简介及科研成果 | 第75-77页 |
致谢 | 第77页 |