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人胃蛋白酶原A基因在大肠杆菌和酿酒酵母中的克隆与表达

提要第1-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-12页
中英文缩写词表第12-13页
第1章 绪论第13-27页
   ·前言第13-14页
   ·胃蛋白酶原的研究进展第14-21页
     ·胃蛋白酶及其酶原的结构特征第14-15页
     ·胃蛋白酶原的分类与分布第15页
     ·胃蛋白酶的性质和功能第15-16页
     ·胃蛋白酶原在机体的生成机制第16页
     ·胃蛋白酶原 A 的激活机制第16页
     ·胃蛋白酶的来源第16-17页
     ·胃蛋白酶的用途第17-21页
     ·重组胃蛋白酶原表达的研究进展第21页
   ·大肠杆菌表达系统简介第21-22页
   ·酿酒酵母表达系统简介第22-24页
     ·酿酒酵母表达系统的特点第22-23页
     ·用于酵母表达的两类载体第23页
     ·外源基因在酿酒酵母中高效表达的影响因素第23-24页
   ·立题依据第24页
   ·研究目的和内容第24-25页
     ·研究目的第24-25页
     ·研究内容第25页
   ·技术路线第25-27页
第2章 材料和方法第27-43页
   ·实验材料和试剂第27-30页
     ·实验材料第27页
     ·质粒和菌种第27页
     ·主要培养基第27-28页
     ·主要溶液第28-29页
     ·主要实验设备第29-30页
     ·引物设计与合成第30页
   ·实验方法第30-43页
     ·人胃蛋白酶原 A 的基因克隆第30-34页
     ·质粒 pET-28a-PGA 在大肠杆菌中的转化和诱导表达第34-35页
     ·大肠杆菌表达的 PGA 的纯化第35-38页
     ·质粒 pYES2-PGA 在酿酒酵母中的转化和诱导表达第38-40页
     ·酿酒酵母表达 PGA 的 Western blotting 鉴定第40-43页
第3章 实验结果与分析第43-61页
   ·PGA 在大肠杆菌中的表达第43-53页
     ·PGA 编码基因的钓取及重组表达质粒的构建第43-48页
     ·PGA 在大肠杆菌中的诱导表达第48-50页
     ·PGA 重组蛋白的镍亲和层析和凝胶过滤层析纯化第50-51页
     ·PGA 酶活性检测第51-52页
     ·PGA 特异性抗血清的制备及抗体水平的测定第52-53页
   ·人胃蛋白酶原在酿酒酵母中的表达第53-61页
     ·PGA 编码基因的亚克隆及重组表达质粒的构建第53-55页
     ·PGA 在酿酒酵母中的诱导表达第55-58页
     ·酿酒酵母表达 PGA 的 Western blotting 鉴定第58-59页
     ·酿酒酵母表达的 PGA 酶活性检测第59-61页
第4章 讨论第61-65页
结论第65-67页
参考文献第67-75页
作者简介及科研成果第75-77页
致谢第77页

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