| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 1.本课题的研究目的 | 第13-14页 |
| 2.本课题的主要研究内容 | 第14-15页 |
| 3.本课题的研究意义 | 第15-16页 |
| 第一章 文献回顾 | 第16-38页 |
| ·禽流感的研究进展 | 第16-28页 |
| ·禽流感的历史及公共卫生意义 | 第16-19页 |
| ·禽流感病毒分子生物学特性 | 第19-25页 |
| ·血凝素是禽流感病毒亚型内新变种判断的主要依据 | 第25-27页 |
| ·禽流感诊断技术的研究现状及进展 | 第27-28页 |
| ·糖生物芯片研究现状及其发展前景 | 第28-38页 |
| ·糖生物学研究概况 | 第28-33页 |
| ·糖组学研究 | 第33-34页 |
| ·糖生物芯片研究现状及其发展前景 | 第34-36页 |
| ·本实验室在这方面的研究状况 | 第36-38页 |
| 第二章 禽流感HA基因在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的表达 | 第38-64页 |
| ·引言 昆虫杆状病毒表达系统的研究和应用进展 | 第38-42页 |
| ·杆状病毒表达系统的原理 | 第38-40页 |
| ·杆状病毒表达系统的优点 | 第40-41页 |
| ·杆状病毒/昆虫表达系统的发展历史 | 第41-42页 |
| ·试验材料 | 第42-45页 |
| ·病毒和血清样品 | 第42页 |
| ·细胞 | 第42页 |
| ·质粒载体及菌株 | 第42-43页 |
| ·引物设计 | 第43页 |
| ·主要仪器与耗材 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·实验用溶液 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-54页 |
| ·构建H5HA-pFastBacHTa和H9HA-pFastBacHTa供体质粒 | 第45-48页 |
| ·H5HA-Bacmid、H9HA-Bacmid重组穿梭载体的构建和鉴定 | 第48-50页 |
| ·重组H5HA-Bacmid、H9HA-Bacmid转染昆虫细胞及重组病毒的PCR鉴定 | 第50-52页 |
| ·重组HA蛋白的表达及鉴定 | 第52-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-63页 |
| ·H5HA、H9HA基因克隆 | 第54页 |
| ·重组转座载体H5HA-pFastHTa、H9HA-pFastHTa的鉴定 | 第54-57页 |
| ·重组HA-pFastBacHTa供体质粒的转座及重组杆粒H5HA-Bacmid、H9HA-Bacmid的PCR鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组杆粒H5HA-Bacmid、H9HA-Bacmid转染昆虫细胞及重组病毒的繁殖 | 第58-59页 |
| ·重组HA蛋白的表达及鉴定 | 第59-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 第三章 两种芯片制备方法的比较 | 第64-75页 |
| ·糖芯片作用原理 | 第64-65页 |
| ·实验材料与方法 | 第65-67页 |
| ·实验材料 | 第65页 |
| ·实验仪器 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-67页 |
| ·结果讨论 | 第67-74页 |
| ·基于两种不同片基的点样缓冲液对结果的影响 | 第67-68页 |
| ·基于两种不同片基的糖浓度对结果的影响 | 第68-71页 |
| ·基于两种片基不同的ConA浓度对结果的影响 | 第71-72页 |
| ·对ConA检测限的摸索 | 第72-73页 |
| ·糖芯片特异性的分析 | 第73-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 结论 | 第75-77页 |
| 1 禽流感病毒HA基因在昆虫-杆状病毒表达系统中的克隆表达 | 第75页 |
| 2 两种制备芯片方法的比较 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-89页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
