摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 引言 | 第11-21页 |
·EIAV 概述 | 第12-14页 |
·EIAV 结构及基因组 | 第12页 |
·EIAV 的生物学特性 | 第12-14页 |
·中国 EIAV 弱毒疫苗及相关研究概述 | 第14-18页 |
·EIAV 弱毒疫苗的研制 | 第14-15页 |
·中国EIAV 弱毒疫苗致弱和诱导免疫保护机制的研究 | 第15-18页 |
·病毒干扰现象 | 第18-19页 |
·国外研究概况 | 第18-19页 |
·国内研究概况 | 第19页 |
·本实验的研究目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-29页 |
·载体、毒株和细胞 | 第21页 |
·仪器与试剂 | 第21页 |
·检测 EIAVUK 二重 Real-time RT-PCR 试验 | 第21-24页 |
·EIAVUK-3 病毒的拯救 | 第21页 |
·PCR 引物及探针 | 第21-22页 |
·阳性质粒的构建 | 第22页 |
·体外转录 | 第22页 |
·转录产物纯化 | 第22-23页 |
·阳性标准品的制备 | 第23页 |
·Real-time RT-PCR 反应条件优化 | 第23页 |
·Real-time RT-PCR 标准曲线建立 | 第23页 |
·敏感性试验 | 第23页 |
·特异性试验 | 第23-24页 |
·干扰试验 | 第24页 |
·重复性试验 | 第24页 |
·EIAVFDDV 诱发的超感染抵制现象试验 | 第24-27页 |
·接毒 | 第24页 |
·二重Real-time RT-PCR 检测病毒液 | 第24页 |
·ViewRNA 检测细胞中感染的EIAV 的基因组RNA | 第24-27页 |
·荧光定量 PCR 方法检测病毒受体mRNA 表达变化 | 第27-29页 |
·SYBR Green real-time PCR 标准曲线建立 | 第27-28页 |
·接毒及RNA 的提取 | 第28页 |
·SYBR Green real-time PCR 检测受体RNA | 第28-29页 |
第三章 结果 | 第29-38页 |
·检测 EIAVUK 的二重荧光定量 PCR 试验 | 第29-33页 |
·Real-time RT-PCR 反应条件优化 | 第29页 |
·Real-time RT-PCR 标准曲线建立 | 第29-31页 |
·敏感性评价 | 第31页 |
·特异性评价 | 第31-32页 |
·干扰性评价 | 第32页 |
·重复性评价 | 第32-33页 |
·超感染抵制体外实验结果 | 第33-36页 |
·Real-time PCR 检测试验孔 EIAV_(UK-3)相对于对照孔病毒载量的改变 | 第33页 |
·ViewRNA 检测病毒超感染抵制 | 第33-36页 |
·荧光定量 PCR 检测受体基因变化 | 第36-38页 |
·荧光定量PCR 标准曲线的建立 | 第36-37页 |
·EIAV 受体ELR1 mRNA 表达水平的检测 | 第37-38页 |
第四章 讨论 | 第38-40页 |
第五章 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
作者简历 | 第48页 |