呕吐毒素核酸适配体的筛选及两种快速检测方法的建立

摘要第6-8页
Abstract第8-17页
英文缩写词表第17-18页
第一章绪论第18-28页
    1.1研究背景第18页
    1.2真菌毒素检测意义第18页
    1.3脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)第18-21页
        1.3.1DON简介第18-19页
        1.3.2DON理化性质第19页
        1.3.3DON在食品中的危害第19-20页
        1.3.4DON研究进展第20-21页
    1.4核酸适配体第21-25页
        1.4.1核酸适配体概述第21-22页
        1.4.2核酸适配体技术的应用第22-23页
        1.4.3核酸适配体筛选方法第23-25页
    1.5氧化石墨烯(GO)第25-26页
        1.5.1氧化石墨烯第25页
        1.5.2氧化石墨烯理化性质第25页
        1.5.3氧化石墨烯在生物领域应用第25-26页
    1.6立题意义和主要研究内容第26-28页
        1.6.1立题意义第26-27页
        1.6.2主要研究内容第27-28页
第二章DON核酸适配体体外筛选技术第28-41页
    2.1前言第28页
    2.2实验材料第28-30页
        2.2.1实验仪器第28-29页
        2.2.2实验试剂第29页
        2.2.3主要试剂配制第29-30页
        2.2.4引物设计第30页
    2.3实验步骤第30-35页
        2.3.1ssDNA文库扩增第30-31页
        2.3.2DON与免疫亲和柱孵育结合第31-32页
        2.3.3固定化SELEX流程第32-33页
        2.3.4克隆和测序第33-34页
        2.3.5鉴定阳性克隆第34页
        2.3.6核酸适配体二级结构分析第34-35页
    2.4结果与讨论第35-41页
        2.4.1SELEX法的DNA浓度测定第35页
        2.4.2SELEX琼脂糖凝胶电泳第35-36页
        2.4.3单克隆连接、转化第36页
        2.4.4一代测序第36-38页
        2.4.5核酸适配体二级结构预测第38-39页
        2.4.6讨论第39-41页
第三章ELONA法鉴定核酸适配体第41-53页
    3.1前言第41页
    3.2实验材料第41-44页
        3.2.1实验仪器第41-42页
        3.2.2实验主要试剂第42-43页
        3.2.3相关溶液配制第43页
        3.2.4引物设计第43-44页
    3.3实验方法第44-47页
        3.3.1适配体DON-A15特异性分析第44-45页
        3.3.2适配体DON-A15亲和力分析第45页
        3.3.3适配体DON-A15灵敏度分析第45-46页
        3.3.4适配体DON-A16特异性分析第46页
        3.3.5适配体DON-A16亲和力分析第46-47页
        3.3.6适配体DON-A16灵敏度分析第47页
    3.4结果与讨论第47-53页
        3.4.1适配体DON-A15特异性分析第47-48页
        3.4.2适配体DON-A15亲和力分析第48-49页
        3.4.3适配体DON-A15灵敏度分析第49页
        3.4.4适配体DON-A16特异性分析第49-50页
        3.4.5适配体DON-A16亲和力分析第50-51页
        3.4.6适配体DON-A16灵敏度分析第51页
        3.4.7讨论第51-53页
第四章互补链竞争法检测DON方法建立第53-65页
    4.1前言第53-54页
    4.2实验材料第54-56页
        4.2.1实验仪器第54页
        4.2.2实验主要试剂第54-55页
        4.2.3相关溶液配制第55-56页
        4.2.4相关引物设计第56页
    4.3实验步骤第56-60页
        4.3.1SA浓度的优化第56-57页
        4.3.2适配体DON-A16浓度的优化第57-58页
        4.3.3适配体互补链DON-A16com的优化第58-59页
        4.3.4适配体DON-A16对DON特异性检测第59-60页
        4.3.5线性关系标准曲线建立第60页
    4.4结果与讨论第60-65页
        4.4.1SA优化结果第60-61页
        4.4.2适配体DON-A16浓度优化结果第61-62页
        4.4.3互补链DON-A16com浓度优化结果第62页
        4.4.4适配体DON-A16特异性分析第62-63页
        4.4.5线性关系曲线的建立第63-64页
        4.4.6讨论第64-65页
第五章荧光猝灭法检测DON及实际样品检测第65-83页
    5.1前言第65-66页
    5.2实验材料第66-67页
        5.2.1实验仪器第66页
        5.2.2实验试剂第66-67页
        5.2.3相关溶液配制第67页
        5.2.4相关引物设计第67页
    5.3实验步骤第67-72页
        5.3.1氧化石墨烯(GO)表征监测[93]第67-68页
        5.3.2氧化石墨烯(GO)浓度的优化第68页
        5.3.3适配体DON-A16特异性分析第68-69页
        5.3.4适配体DON-A16灵敏度分析第69页
        5.3.5荧光适配体DON-A16对DON的传感特性第69页
        5.3.6样品前处理方法研究第69-70页
        5.3.7DON-ELISA检测实际样品回收率第70-71页
            5.3.7.1DON检测第70页
            5.3.7.2食品样品中DON检测第70-71页
        5.3.8荧光猝灭法检测DON第71-72页
            5.3.8.1DON检测第71页
            5.3.8.2实际样品DON的检测第71-72页
    5.4结果与讨论第72-83页
        5.4.1氧化石墨烯(GO)表征监测第72-74页
        5.4.2氧化石墨烯(GO)浓度的优化第74-75页
        5.4.3适配体DON-A16特异性分析第75页
        5.4.4适配体DON-A16灵敏度分析第75-76页
        5.4.5适配体DON-A16对DON传感特性第76-77页
        5.4.6酶联免疫法检测DON曲线图绘制第77页
        5.4.7酶联免疫法检测实际样品中DON曲线图绘制第77-79页
        5.4.8荧光猝灭法检测DON标准曲线绘制第79-80页
        5.4.9两种方法对DON加标回收率的检测第80-81页
        5.4.10讨论第81-83页
第六章分子对接模拟第83-87页
    6.1前言第83页
    6.2实验序列第83页
    6.3实验步骤第83-84页
    6.4结果与讨论第84-87页
        6.4.1分子对接结果第84-86页
        6.4.2讨论第86-87页
总结与展望第87-89页
致谢第89-90页
参考文献第90-100页
附录A攻读硕士期间发表论文目录第100页

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