| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 英文缩写词表 | 第17-18页 |
| 第一章绪论 | 第18-28页 |
| 1.1研究背景 | 第18页 |
| 1.2真菌毒素检测意义 | 第18页 |
| 1.3脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON) | 第18-21页 |
| 1.3.1DON简介 | 第18-19页 |
| 1.3.2DON理化性质 | 第19页 |
| 1.3.3DON在食品中的危害 | 第19-20页 |
| 1.3.4DON研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4核酸适配体 | 第21-25页 |
| 1.4.1核酸适配体概述 | 第21-22页 |
| 1.4.2核酸适配体技术的应用 | 第22-23页 |
| 1.4.3核酸适配体筛选方法 | 第23-25页 |
| 1.5氧化石墨烯(GO) | 第25-26页 |
| 1.5.1氧化石墨烯 | 第25页 |
| 1.5.2氧化石墨烯理化性质 | 第25页 |
| 1.5.3氧化石墨烯在生物领域应用 | 第25-26页 |
| 1.6立题意义和主要研究内容 | 第26-28页 |
| 1.6.1立题意义 | 第26-27页 |
| 1.6.2主要研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章DON核酸适配体体外筛选技术 | 第28-41页 |
| 2.1前言 | 第28页 |
| 2.2实验材料 | 第28-30页 |
| 2.2.1实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.2实验试剂 | 第29页 |
| 2.2.3主要试剂配制 | 第29-30页 |
| 2.2.4引物设计 | 第30页 |
| 2.3实验步骤 | 第30-35页 |
| 2.3.1ssDNA文库扩增 | 第30-31页 |
| 2.3.2DON与免疫亲和柱孵育结合 | 第31-32页 |
| 2.3.3固定化SELEX流程 | 第32-33页 |
| 2.3.4克隆和测序 | 第33-34页 |
| 2.3.5鉴定阳性克隆 | 第34页 |
| 2.3.6核酸适配体二级结构分析 | 第34-35页 |
| 2.4结果与讨论 | 第35-41页 |
| 2.4.1SELEX法的DNA浓度测定 | 第35页 |
| 2.4.2SELEX琼脂糖凝胶电泳 | 第35-36页 |
| 2.4.3单克隆连接、转化 | 第36页 |
| 2.4.4一代测序 | 第36-38页 |
| 2.4.5核酸适配体二级结构预测 | 第38-39页 |
| 2.4.6讨论 | 第39-41页 |
| 第三章ELONA法鉴定核酸适配体 | 第41-53页 |
| 3.1前言 | 第41页 |
| 3.2实验材料 | 第41-44页 |
| 3.2.1实验仪器 | 第41-42页 |
| 3.2.2实验主要试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.3相关溶液配制 | 第43页 |
| 3.2.4引物设计 | 第43-44页 |
| 3.3实验方法 | 第44-47页 |
| 3.3.1适配体DON-A15特异性分析 | 第44-45页 |
| 3.3.2适配体DON-A15亲和力分析 | 第45页 |
| 3.3.3适配体DON-A15灵敏度分析 | 第45-46页 |
| 3.3.4适配体DON-A16特异性分析 | 第46页 |
| 3.3.5适配体DON-A16亲和力分析 | 第46-47页 |
| 3.3.6适配体DON-A16灵敏度分析 | 第47页 |
| 3.4结果与讨论 | 第47-53页 |
| 3.4.1适配体DON-A15特异性分析 | 第47-48页 |
| 3.4.2适配体DON-A15亲和力分析 | 第48-49页 |
| 3.4.3适配体DON-A15灵敏度分析 | 第49页 |
| 3.4.4适配体DON-A16特异性分析 | 第49-50页 |
| 3.4.5适配体DON-A16亲和力分析 | 第50-51页 |
| 3.4.6适配体DON-A16灵敏度分析 | 第51页 |
| 3.4.7讨论 | 第51-53页 |
| 第四章互补链竞争法检测DON方法建立 | 第53-65页 |
| 4.1前言 | 第53-54页 |
| 4.2实验材料 | 第54-56页 |
| 4.2.1实验仪器 | 第54页 |
| 4.2.2实验主要试剂 | 第54-55页 |
| 4.2.3相关溶液配制 | 第55-56页 |
| 4.2.4相关引物设计 | 第56页 |
| 4.3实验步骤 | 第56-60页 |
| 4.3.1SA浓度的优化 | 第56-57页 |
| 4.3.2适配体DON-A16浓度的优化 | 第57-58页 |
| 4.3.3适配体互补链DON-A16com的优化 | 第58-59页 |
| 4.3.4适配体DON-A16对DON特异性检测 | 第59-60页 |
| 4.3.5线性关系标准曲线建立 | 第60页 |
| 4.4结果与讨论 | 第60-65页 |
| 4.4.1SA优化结果 | 第60-61页 |
| 4.4.2适配体DON-A16浓度优化结果 | 第61-62页 |
| 4.4.3互补链DON-A16com浓度优化结果 | 第62页 |
| 4.4.4适配体DON-A16特异性分析 | 第62-63页 |
| 4.4.5线性关系曲线的建立 | 第63-64页 |
| 4.4.6讨论 | 第64-65页 |
| 第五章荧光猝灭法检测DON及实际样品检测 | 第65-83页 |
| 5.1前言 | 第65-66页 |
| 5.2实验材料 | 第66-67页 |
| 5.2.1实验仪器 | 第66页 |
| 5.2.2实验试剂 | 第66-67页 |
| 5.2.3相关溶液配制 | 第67页 |
| 5.2.4相关引物设计 | 第67页 |
| 5.3实验步骤 | 第67-72页 |
| 5.3.1氧化石墨烯(GO)表征监测[93] | 第67-68页 |
| 5.3.2氧化石墨烯(GO)浓度的优化 | 第68页 |
| 5.3.3适配体DON-A16特异性分析 | 第68-69页 |
| 5.3.4适配体DON-A16灵敏度分析 | 第69页 |
| 5.3.5荧光适配体DON-A16对DON的传感特性 | 第69页 |
| 5.3.6样品前处理方法研究 | 第69-70页 |
| 5.3.7DON-ELISA检测实际样品回收率 | 第70-71页 |
| 5.3.7.1DON检测 | 第70页 |
| 5.3.7.2食品样品中DON检测 | 第70-71页 |
| 5.3.8荧光猝灭法检测DON | 第71-72页 |
| 5.3.8.1DON检测 | 第71页 |
| 5.3.8.2实际样品DON的检测 | 第71-72页 |
| 5.4结果与讨论 | 第72-83页 |
| 5.4.1氧化石墨烯(GO)表征监测 | 第72-74页 |
| 5.4.2氧化石墨烯(GO)浓度的优化 | 第74-75页 |
| 5.4.3适配体DON-A16特异性分析 | 第75页 |
| 5.4.4适配体DON-A16灵敏度分析 | 第75-76页 |
| 5.4.5适配体DON-A16对DON传感特性 | 第76-77页 |
| 5.4.6酶联免疫法检测DON曲线图绘制 | 第77页 |
| 5.4.7酶联免疫法检测实际样品中DON曲线图绘制 | 第77-79页 |
| 5.4.8荧光猝灭法检测DON标准曲线绘制 | 第79-80页 |
| 5.4.9两种方法对DON加标回收率的检测 | 第80-81页 |
| 5.4.10讨论 | 第81-83页 |
| 第六章分子对接模拟 | 第83-87页 |
| 6.1前言 | 第83页 |
| 6.2实验序列 | 第83页 |
| 6.3实验步骤 | 第83-84页 |
| 6.4结果与讨论 | 第84-87页 |
| 6.4.1分子对接结果 | 第84-86页 |
| 6.4.2讨论 | 第86-87页 |
| 总结与展望 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 附录A攻读硕士期间发表论文目录 | 第100页 |