| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-30页 |
| ·硒与硒蛋白 | 第14-15页 |
| ·硒蛋白的分类、亚细胞定位及功能 | 第15-20页 |
| ·硒蛋白基因表达的调控 | 第20-22页 |
| ·Sel N 的研究进展 | 第22-27页 |
| ·人Sel N 的发现、亚细胞定位及体内分布 | 第22页 |
| ·SelN 的表达特点 | 第22-23页 |
| ·SelN 的分子遗传学 | 第23-24页 |
| ·SelN 基因突变的鉴定 | 第24-25页 |
| ·SelN 在分子和细胞水平的功能 | 第25-27页 |
| ·鸡SelN 的研究现状 | 第27页 |
| ·肌肉相关因子 | 第27-28页 |
| ·生肌调节因子 | 第27页 |
| ·肌肉细胞特异性增强因子2 | 第27-28页 |
| ·实验的目的与意义 | 第28-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-38页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要的菌株与载体 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·实验动物及分组 | 第31-32页 |
| ·SelN 基因组织分布的检测 | 第31页 |
| ·不同浓度硒对育成公鸡肌肉组织 SelN、SecS 及 SPS1 mRNA表达水平影响的检测 | 第31页 |
| ·硒对不同日龄鸡肌肉组织 SelN、SecS 及 SPS1 mRNA 表达水平影响的检测 | 第31页 |
| ·硒对不同日龄鸡胚肌肉组织 SelN、SecS 及 SPS1 mRNA 表达水平影响的检测 | 第31-32页 |
| ·引物的设计与合成 | 第32页 |
| ·鸡SelN 基因的克隆、原核表达、多克隆抗体的制备 | 第32-35页 |
| ·鸡SelN mRNA 基因序列的克隆与鉴定 | 第32-33页 |
| ·鸡SelN 重组表达载体的构建与鉴定 | 第33页 |
| ·鸡SelN 基因在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定 | 第33-34页 |
| ·抗鸡SelN 多克隆抗体的制备和鉴定 | 第34-35页 |
| ·鸡Sel N 组织分布的检测 | 第35页 |
| ·组织总RNA 的抽提反转录反应的操作方法 | 第35页 |
| ·基因的PCR 扩增及其产物的分析 | 第35页 |
| ·组织蛋白样品的制备 | 第35页 |
| ·Western blot 检测组织中的SelN | 第35页 |
| ·全血及肌肉组织中硒含量的测定方法 | 第35-36页 |
| ·鸡胚成肌细胞的制备与处理 | 第36页 |
| ·鸡胚成肌细胞的制备 | 第36页 |
| ·鸡胚成肌细胞的处理 | 第36页 |
| ·鸡SelN、SecS、SPS1 mRNA及Myf5、Pax7和MEF2A mRNA表达的检测 | 第36-37页 |
| ·实时PCR 扩增 | 第36页 |
| ·融解曲线分析 | 第36-37页 |
| ·PfaffL 法分析基因表达的相对差异 | 第37页 |
| ·试验数据的分析与统计 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-67页 |
| ·鸡SelN mRNA 基因的克隆、原核表达、多抗的制备 | 第38-42页 |
| ·肌肉组织中总RNA 的提取与鉴定 | 第38页 |
| ·鸡SelN 基因的PCR 扩增结果 | 第38-39页 |
| ·鸡SelN m RNA 序列的测序结果 | 第39页 |
| ·鸡SelN 基因cDNA 片段的RT-PCR 扩增结果 | 第39页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第39-40页 |
| ·融合蛋白的表达、鉴定与纯化 | 第40-42页 |
| ·多克隆抗体的制备和鉴定结果 | 第42页 |
| ·鸡组织中SelN 组织分布的检测结果 | 第42-44页 |
| ·目的基因实时PCR 检测方法的建立 | 第44-46页 |
| ·硒对肌肉组织 SelN、SecS 及 SPS1 mRNA 表达影响的检测结果 | 第46-58页 |
| ·肌肉组织及全血中硒含量的测定结果 | 第46-47页 |
| ·不同浓度硒对育成公鸡肌肉组织SelN、SecS 及SPS1 mRNA 表达影响的检测结果 | 第47-50页 |
| ·硒对不同日龄鸡肌肉组织SelN、SecS 及SPS1 mRNA 表达水平影响的检测结果 | 第50-54页 |
| ·硒对不同日龄鸡胚肌肉组织SelN、SecS 及SPS1 mRNA 表达水平影响的检测结果 | 第54-58页 |
| ·硒对鸡胚成肌细胞SelN、SecS、SPS1 mRNA 及Myf5、Pax7 和MEF2A mRNA 表达影响的检测结果 | 第58-63页 |
| ·鸡胚成肌细胞的形态学观察 | 第58页 |
| ·硒对鸡胚成肌细胞SelN、SecS 及SPS1 mRNA 表达影响的检测结果 | 第58-61页 |
| ·硒对鸡胚成肌细胞Myf5、Pax7 和MEF2A m RNA 表达影响的检测结果 | 第61-62页 |
| ·鸡胚成肌细胞SelN m RNA 与Myf5、Pax7 和MEF2A mRNA 表达水平变化的相关性 | 第62-63页 |
| ·鸡早期发育中肌肉组织SelN、SecS 及SPS1 mRNA 表达水平变化的检测结果 | 第63-67页 |
| ·鸡早期发育中肌肉组织SelN mRNA 表达水平的检测结果 | 第63-64页 |
| ·鸡早期发育中肌肉组织 SecS mRNA 表达水平的检测结果 | 第64-65页 |
| ·鸡早期发育中肌肉组织 SPS1 mRNA 表达水平的检测结果 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-75页 |
| ·鸡SelN 的克隆、原核表达、多克隆抗体的制备 | 第67页 |
| ·鸡SelN 的组织分布 | 第67-68页 |
| ·硒对肌肉SelN 表达的调控 | 第68-72页 |
| ·不同浓度硒对育成公鸡肌肉组织SelN mRNA 表达的调控 | 第69-70页 |
| ·硒对不同日龄鸡肌肉组织SelN m RNA 表达的调控 | 第70-71页 |
| ·硒对不同日龄鸡胚肌肉组织SelN mRNA 表达的调控 | 第71-72页 |
| ·硒对鸡胚成肌细胞SelNmRNA 表达的调控及对肌肉相关因子表达的影响 | 第72-73页 |
| ·鸡早期发育过程中肌肉组织SelN、SecS 及SPS1 mRNA 表达水平的变化 | 第73-75页 |
| 5 结论 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 附录 | 第86-96页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文 | 第96页 |
