英文缩略词表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
英文摘要 | 第13-16页 |
1.引言 | 第17-22页 |
2.材料与方法 | 第22-40页 |
2.1 实验用细胞株 | 第22页 |
2.2 临床标本采集 | 第22-23页 |
2.3 实验用质粒 | 第23页 |
2.4 实验用抗体 | 第23页 |
2.5 其他主要实验用试剂 | 第23-24页 |
2.6 实验用主要仪器与设备 | 第24页 |
2.7 实验中常用试剂溶液配制 | 第24-26页 |
2.8 质粒鉴定 | 第26-28页 |
2.9 质粒大抽 | 第28-29页 |
2.10 c-fos-SIRNA以及c-jun-SIRNA的合成 | 第29页 |
2.11 引物合成 | 第29-30页 |
2.12 免疫组化实验过程 | 第30页 |
2.13 免疫荧光双标 | 第30-31页 |
2.14 蛋白质印迹技术WESTERNBLOT | 第31-32页 |
2.15 双荧光素酶报告基因实验 | 第32-34页 |
2.16 免疫共沉淀实验 | 第34-37页 |
2.17 REAL-TIMEPCR实验 | 第37-38页 |
2.18 TRANSWELL侵袭(铺胶)和迁移实验(不铺胶) | 第38-39页 |
2.19 软琼脂克隆形成实验 | 第39页 |
2.20 平板克隆形成实验 | 第39-40页 |
2.21 统计学分析 | 第40页 |
3.实验结果 | 第40-66页 |
3.1 AP-1上调肝癌细胞MANF的表达 | 第40-46页 |
3.2 人MANF基因上游AP-1结合位点的分析和预测 | 第46-47页 |
3.3 双荧光素酶报告基因方法证实AP1上调MANF的转录 | 第47-49页 |
3.4 c-fos和c-jun与MANF启动子区DNA的相互结合 | 第49页 |
3.5 c-fos或c-jun抑制肝癌细胞的增殖和侵袭迁移能力 | 第49-63页 |
3.6 AP-1和MANF在原发性肝细胞癌组织中的表达及其相关性分析 | 第63-66页 |
4.讨论 | 第66-70页 |
4.1 转录因子AP-1上调肝癌细胞MANF的转录和翻译 | 第66页 |
4.2 转录因子AP-1与人MANF基因的顺式作用元件结合并增强MANF的转录活性 | 第66-67页 |
4.3 c-fos或c-jun可能通过正调控MANF表达抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移功能 | 第67-69页 |
4.4 人HCC组织中AP-1的表达及与MANF的关系 | 第69-70页 |
5.结论 | 第70页 |
6.创新之处 | 第70页 |
7.参考文献 | 第70-80页 |
附录 | 第80-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
综述 | 第83-98页 |
参考文献 | 第91-98页 |