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谷氨酰胺改善大鼠L6细胞胰岛素受体信号通路影响葡萄糖摄取的分子机制研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-10页
缩略语/符号说明第14-16页
前言第16-21页
    研究现状、成果第16-19页
    研究目的、方法第19-21页
1.对象和方法第21-38页
    1.1 试剂与仪器第21-25页
        1.1.1 实验细胞和试剂第21-23页
        1.1.2 实验器材第23页
        1.1.3 实验试剂配制第23-25页
    1.2 培养大鼠骨骼肌成肌细胞L6第25-27页
        1.2.1 L6细胞复苏第25-26页
        1.2.2 L6细胞培养传代第26页
        1.2.3 L6细胞冻存第26页
        1.2.4 L6细胞计数第26-27页
    1.3 实验分组第27页
    1.4 细胞葡萄糖摄取检测第27-29页
        1.4.1 葡萄糖氧化酶法检测原理第27-28页
        1.4.2 操作步骤第28页
        1.4.3 细胞葡萄糖摄取计算第28-29页
    1.5 RT-PCR检测L6细胞各目的因子mRNA表达第29-32页
        1.5.1 RT-PCR技术实验原理第29页
        1.5.2 总RNA提取第29-30页
        1.5.3 细胞RNA逆转录为cDNA第30页
        1.5.4 PCR免疫荧光定量各目的因子引物设计和合成第30-31页
        1.5.5 荧光定量PCR检测各目的基因mRNA表达水平第31-32页
    1.6 WesternBlotting方法检测L6细胞各目的因子蛋白表达第32-36页
        1.6.1 裂解L6细胞,提取总蛋白第32页
        1.6.2 提取L6细胞膜蛋白第32-33页
        1.6.3 BCA法检测蛋白浓度第33页
        1.6.4 配置电泳凝胶第33-34页
        1.6.5 蛋白上样第34页
        1.6.6 电泳第34页
        1.6.7 转膜及封闭第34-35页
        1.6.8 抗体蛋白免疫反应第35页
        1.6.9 增强化学发光法显色曝光第35-36页
    1.7 L6细胞免疫荧光实验第36页
    1.8 Gln浓度改变对L6细胞影响第36-37页
    1.9 统计学分析第37-38页
2.结果第38-48页
    2.1 谷氨酰胺增加L6细胞葡萄糖摄取第38页
    2.2 谷氨酰胺上调PI3K表达第38-39页
    2.3 谷氨酰胺激活下游因子PDK1第39-40页
    2.4 AKT磷酸化而激活第40-41页
    2.5 PKCζ磷酸化而激活第41-42页
    2.6 上调GLUT4表达并促进GLUT4细胞膜转位第42-43页
    2.7 免疫荧光显示GLUT4细胞膜转位第43-45页
    2.8 糖原合成通路中GSK的蛋白表达第45页
    2.9 不同浓度Gln对L6细胞的影响第45-48页
3.讨论第48-51页
    3.1 谷氨酰胺改善L6细胞葡萄糖摄取第48页
    3.2 谷氨酰胺增加PI3K/AKT信号通路的表达第48-49页
    3.3 谷氨酰胺增加PI3K/PDK1/PKCζ信号通路的表达第49页
    3.4 谷氨酰胺增加GLUT4表达和转位第49-50页
    3.5 谷氨酰胺增加糖原合成通路GSK磷酸化第50页
    3.6 不同浓度谷氨酰胺改变L6细胞葡萄糖摄取不同第50-51页
结论第51-52页
参考文献第52-59页
发表论文和参加科研情况说明第59-60页
综述 谷氨酰胺与糖尿病骨骼肌病变关系的研究进展第60-71页
    参考文献第65-71页
致谢第71-73页
个人简历第73页

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