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茶多酚对前列腺癌PC-3M系细胞作用的实验研究

内容提要第1-9页
主要英文缩写词表第9-11页
第1篇 绪论(文献综述)第11-27页
 第1章 前言第11-12页
 第2章 茶叶主要活性成分的结构及应用第12-27页
  第1节 茶多酚的结构、应用及抗肿瘤机制第13-18页
   1 茶多酚的化学组成与结构第13-15页
   2 茶多酚的应用第15-16页
   3 茶多酚的抗肿瘤机制第16-18页
   ·启动阶段第17页
   ·促进阶段第17页
   ·增殖阶段第17-18页
   4 茶多酚及其儿茶素单体间效果差异第18页
  第2节 茶色素的结构、应用及抗肿瘤机制第18-22页
   1 茶色素的化学组成与结构第18-20页
   2 茶色素的应用第20页
   3 茶色素的抗肿瘤机制第20-22页
   ·减少与修复DNA 损伤,防止细胞恶变第20-21页
   ·抑制与肿瘤细胞生长相关的细胞因子第21-22页
   ·降低肿瘤细胞的侵袭力第22页
  第3节 茶多酚及茶色素对肿瘤的化学预防作用第22-23页
   1 茶多酚第22-23页
   2 茶色素第23页
  第4节 咖啡碱的结构及药理作用第23-24页
   1 咖啡碱的化学性质第23页
   2 咖啡碱的药理作用第23-24页
  第5节 茶多糖的组成及药理作用第24-25页
   1 茶多糖的化学组成第24页
   2 茶多糖的药理作用第24-25页
   ·降血糖第24-25页
   ·降血脂第25页
   ·降血压和保护心血管第25页
   ·抗肿瘤第25页
  第6节 茶多酚对前列腺癌细胞生长的抑制作用第25-27页
   1 阻滞细胞周期,抑制Pca 细胞的生长增殖第25页
   2 阻断DNA 合成与修复,诱导Pca 细胞凋亡第25-26页
   3 影响Pca 癌基因与抗癌基因的表达第26页
   4 调节其他因素第26-27页
第2篇 茶多酚对前列腺癌PC-3M 系细胞作用的实验研究第27-92页
 第1章 茶多酚对前列腺癌PC-3M 细胞增殖与凋亡的影响第28-64页
  第1节 材料与方法第28-46页
   1 主要设备与试剂第28-35页
   ·主要仪器与设备第28-29页
   ·试剂与药品第29-31页
   ·主要试剂的配制第31-35页
   2 细胞系及培养方法第35-36页
   ·细胞复苏第35页
   ·细胞的传代培养第35页
   ·细胞冻存第35-36页
   3 实验方法第36-45页
   ·倒置显微镜观察TP 作用后细胞数量与形态变化第36页
   ·细胞增殖抑制实验(MTT 比色法)第36页
   ·吖啶橙第36-37页
   ·流式细胞术(flow cytometry,FCM)第37页
   ·RT-PCR 检测细胞cyclin D1、Caspase-3、Survivin m RNA第37-40页
     ·总RNA 提取(Trizol 法)第38-39页
     ·RT-PCR第39-40页
       ·总RNA 逆转录反应合成cDNA第39页
       ·RT-PCR 检测目的m RNA 表达第39-40页
   ·免疫印迹法检测细胞cyclin D1、Caspase-3、Survivin 蛋白第40-45页
     ·总蛋白提取第40-41页
     ·蛋白浓度的测定(Bio-Rad 法)第41页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的配制第41-42页
     ·蛋白样本的制备第42页
     ·上样与电泳第42-43页
     ·转膜第43-45页
       ·液相转印法(湿转法)第43-44页
       ·半干式转印法第44-45页
     ·封闭第45页
     ·一抗杂交第45页
     ·二抗杂交第45页
     ·底物显色第45页
   4 统计分析第45-46页
  第2节 结果第46-58页
   1 TP 作用后细胞数量与形态变化情况第46页
   2 细胞增殖抑制实验(MTT 比色法)第46-48页
   3 细胞周期与凋亡情况第48-50页
   ·吖啶橙/溴化乙锭染色第48-49页
   ·流式细胞术第49-50页
   4 mRNA RT-PCR 结果第50-54页
   ·cyclin D1 mRNA第50-51页
   ·Caspase-3 mRNA第51-52页
   ·Survivin mRNA第52-54页
   5 Western blot 结果第54-58页
   ·cyclin D1 蛋白第54-55页
   ·Caspase-3 蛋白第55-56页
   ·Survivin 蛋白第56-58页
  第3节 讨论第58-64页
   1 茶多酚对前列腺肿瘤细胞增殖的影响第58-60页
   2 茶多酚对前列腺肿瘤细胞凋亡的影响第60-64页
   ·凋亡促进因子-Caspase-3第61-62页
   ·凋亡抑制因子-Survivin第62-64页
 第2章 茶多酚对前列腺癌PC-3M 细胞侵袭力的影响第64-86页
  第1节 材料与方法第64-80页
   1 主要设备与试剂第64-70页
   ·主要仪器与设备第64-65页
   ·试剂与药品第65-67页
   ·主要试剂的配制第67-70页
   2 细胞系及培养条件第70页
   3 实验方法第70-79页
   ·划痕实验(scratch assay)第70-71页
   ·细胞侵袭实验(transwell assay)第71页
   ·RT-PCR 检测细胞MMP-2、TIMP-2 mRNA第71-74页
     ·总RNA 提取(Trizol 法)第72-73页
     ·RT-PCR第73-74页
       ·总RNA 逆转录反应合成cDNA第73页
       ·RT-PCR 检测目的mRNA 表达第73-74页
   ·Western blot 检测细胞MMP-2、TIMP-2 蛋白第74-79页
     ·总蛋白提取第74-75页
     ·蛋白浓度的测定(Bio-Rad 法)第75页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的配制第75-76页
     ·蛋白样本的制备第76页
     ·上样与电泳第76-77页
     ·转膜第77-78页
       ·液相转印法(湿转法)第77-78页
       ·半干式转印法第78页
     ·封闭第78-79页
     ·一抗杂交第79页
     ·二抗杂交第79页
     ·底物显色第79页
   4 统计分析第79-80页
  第2节 结果第80-86页
   1 划痕实验(scratch assay)第80页
   2 细胞侵袭实验(transwell assay)第80-81页
   3 mRNA RT-PCR 结果第81-84页
   ·MMP-2 mRNA第81-82页
   ·TIMP-2 mRNA第82-84页
   4 Western blot 结果第84-86页
   ·MMP-2 蛋白第84-85页
   ·TIMP-2 蛋白第85-86页
 第3节 讨论第86-92页
结论第92-93页
参考文献第93-105页
附录第105-111页
攻读学位期间发表的学术论文第111-112页
致谢第112-113页
摘要第113-117页
ABSTRACT第117-121页

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