内容提要 | 第1-9页 |
主要英文缩写词表 | 第9-11页 |
第1篇 绪论(文献综述) | 第11-27页 |
第1章 前言 | 第11-12页 |
第2章 茶叶主要活性成分的结构及应用 | 第12-27页 |
第1节 茶多酚的结构、应用及抗肿瘤机制 | 第13-18页 |
1 茶多酚的化学组成与结构 | 第13-15页 |
2 茶多酚的应用 | 第15-16页 |
3 茶多酚的抗肿瘤机制 | 第16-18页 |
·启动阶段 | 第17页 |
·促进阶段 | 第17页 |
·增殖阶段 | 第17-18页 |
4 茶多酚及其儿茶素单体间效果差异 | 第18页 |
第2节 茶色素的结构、应用及抗肿瘤机制 | 第18-22页 |
1 茶色素的化学组成与结构 | 第18-20页 |
2 茶色素的应用 | 第20页 |
3 茶色素的抗肿瘤机制 | 第20-22页 |
·减少与修复DNA 损伤,防止细胞恶变 | 第20-21页 |
·抑制与肿瘤细胞生长相关的细胞因子 | 第21-22页 |
·降低肿瘤细胞的侵袭力 | 第22页 |
第3节 茶多酚及茶色素对肿瘤的化学预防作用 | 第22-23页 |
1 茶多酚 | 第22-23页 |
2 茶色素 | 第23页 |
第4节 咖啡碱的结构及药理作用 | 第23-24页 |
1 咖啡碱的化学性质 | 第23页 |
2 咖啡碱的药理作用 | 第23-24页 |
第5节 茶多糖的组成及药理作用 | 第24-25页 |
1 茶多糖的化学组成 | 第24页 |
2 茶多糖的药理作用 | 第24-25页 |
·降血糖 | 第24-25页 |
·降血脂 | 第25页 |
·降血压和保护心血管 | 第25页 |
·抗肿瘤 | 第25页 |
第6节 茶多酚对前列腺癌细胞生长的抑制作用 | 第25-27页 |
1 阻滞细胞周期,抑制Pca 细胞的生长增殖 | 第25页 |
2 阻断DNA 合成与修复,诱导Pca 细胞凋亡 | 第25-26页 |
3 影响Pca 癌基因与抗癌基因的表达 | 第26页 |
4 调节其他因素 | 第26-27页 |
第2篇 茶多酚对前列腺癌PC-3M 系细胞作用的实验研究 | 第27-92页 |
第1章 茶多酚对前列腺癌PC-3M 细胞增殖与凋亡的影响 | 第28-64页 |
第1节 材料与方法 | 第28-46页 |
1 主要设备与试剂 | 第28-35页 |
·主要仪器与设备 | 第28-29页 |
·试剂与药品 | 第29-31页 |
·主要试剂的配制 | 第31-35页 |
2 细胞系及培养方法 | 第35-36页 |
·细胞复苏 | 第35页 |
·细胞的传代培养 | 第35页 |
·细胞冻存 | 第35-36页 |
3 实验方法 | 第36-45页 |
·倒置显微镜观察TP 作用后细胞数量与形态变化 | 第36页 |
·细胞增殖抑制实验(MTT 比色法) | 第36页 |
·吖啶橙 | 第36-37页 |
·流式细胞术(flow cytometry,FCM) | 第37页 |
·RT-PCR 检测细胞cyclin D1、Caspase-3、Survivin m RNA | 第37-40页 |
·总RNA 提取(Trizol 法) | 第38-39页 |
·RT-PCR | 第39-40页 |
·总RNA 逆转录反应合成cDNA | 第39页 |
·RT-PCR 检测目的m RNA 表达 | 第39-40页 |
·免疫印迹法检测细胞cyclin D1、Caspase-3、Survivin 蛋白 | 第40-45页 |
·总蛋白提取 | 第40-41页 |
·蛋白浓度的测定(Bio-Rad 法) | 第41页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第41-42页 |
·蛋白样本的制备 | 第42页 |
·上样与电泳 | 第42-43页 |
·转膜 | 第43-45页 |
·液相转印法(湿转法) | 第43-44页 |
·半干式转印法 | 第44-45页 |
·封闭 | 第45页 |
·一抗杂交 | 第45页 |
·二抗杂交 | 第45页 |
·底物显色 | 第45页 |
4 统计分析 | 第45-46页 |
第2节 结果 | 第46-58页 |
1 TP 作用后细胞数量与形态变化情况 | 第46页 |
2 细胞增殖抑制实验(MTT 比色法) | 第46-48页 |
3 细胞周期与凋亡情况 | 第48-50页 |
·吖啶橙/溴化乙锭染色 | 第48-49页 |
·流式细胞术 | 第49-50页 |
4 mRNA RT-PCR 结果 | 第50-54页 |
·cyclin D1 mRNA | 第50-51页 |
·Caspase-3 mRNA | 第51-52页 |
·Survivin mRNA | 第52-54页 |
5 Western blot 结果 | 第54-58页 |
·cyclin D1 蛋白 | 第54-55页 |
·Caspase-3 蛋白 | 第55-56页 |
·Survivin 蛋白 | 第56-58页 |
第3节 讨论 | 第58-64页 |
1 茶多酚对前列腺肿瘤细胞增殖的影响 | 第58-60页 |
2 茶多酚对前列腺肿瘤细胞凋亡的影响 | 第60-64页 |
·凋亡促进因子-Caspase-3 | 第61-62页 |
·凋亡抑制因子-Survivin | 第62-64页 |
第2章 茶多酚对前列腺癌PC-3M 细胞侵袭力的影响 | 第64-86页 |
第1节 材料与方法 | 第64-80页 |
1 主要设备与试剂 | 第64-70页 |
·主要仪器与设备 | 第64-65页 |
·试剂与药品 | 第65-67页 |
·主要试剂的配制 | 第67-70页 |
2 细胞系及培养条件 | 第70页 |
3 实验方法 | 第70-79页 |
·划痕实验(scratch assay) | 第70-71页 |
·细胞侵袭实验(transwell assay) | 第71页 |
·RT-PCR 检测细胞MMP-2、TIMP-2 mRNA | 第71-74页 |
·总RNA 提取(Trizol 法) | 第72-73页 |
·RT-PCR | 第73-74页 |
·总RNA 逆转录反应合成cDNA | 第73页 |
·RT-PCR 检测目的mRNA 表达 | 第73-74页 |
·Western blot 检测细胞MMP-2、TIMP-2 蛋白 | 第74-79页 |
·总蛋白提取 | 第74-75页 |
·蛋白浓度的测定(Bio-Rad 法) | 第75页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第75-76页 |
·蛋白样本的制备 | 第76页 |
·上样与电泳 | 第76-77页 |
·转膜 | 第77-78页 |
·液相转印法(湿转法) | 第77-78页 |
·半干式转印法 | 第78页 |
·封闭 | 第78-79页 |
·一抗杂交 | 第79页 |
·二抗杂交 | 第79页 |
·底物显色 | 第79页 |
4 统计分析 | 第79-80页 |
第2节 结果 | 第80-86页 |
1 划痕实验(scratch assay) | 第80页 |
2 细胞侵袭实验(transwell assay) | 第80-81页 |
3 mRNA RT-PCR 结果 | 第81-84页 |
·MMP-2 mRNA | 第81-82页 |
·TIMP-2 mRNA | 第82-84页 |
4 Western blot 结果 | 第84-86页 |
·MMP-2 蛋白 | 第84-85页 |
·TIMP-2 蛋白 | 第85-86页 |
第3节 讨论 | 第86-92页 |
结论 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-105页 |
附录 | 第105-111页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第111-112页 |
致谢 | 第112-113页 |
摘要 | 第113-117页 |
ABSTRACT | 第117-121页 |