| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第15-23页 |
| 1 泡状棘球蚴与泡状棘球蚴病 | 第15-19页 |
| 1.1 泡状棘球蚴概述及生活史 | 第15-16页 |
| 1.2 泡状棘球蚴病 | 第16-18页 |
| 1.3 泡状棘球蚴的生长发宵调控 | 第18-19页 |
| 2 Aurora是重要的有丝分裂调节因子 | 第19-21页 |
| 2.1 Aurora的结构及生物学功能 | 第19-20页 |
| 2.2 极光激酶Aurora的相关研究进展 | 第20-21页 |
| 3 论文研究内容及其研究意义 | 第21-23页 |
| 第二章 泡状棘球蚴Aurora基因的克隆 | 第23-41页 |
| 1 材料与试剂 | 第23-24页 |
| 1.1 实验材料 | 第23页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第23-24页 |
| 2 仪器与耗材 | 第24-25页 |
| 3 溶液配制 | 第25页 |
| 4 实验方法 | 第25-30页 |
| 4.1 泡状棘球蚴的体外培养 | 第25-26页 |
| 4.2 泡状棘球蚴RNA的提取 | 第26-27页 |
| 4.3 泡状棘球蚴EmAurora基因序列的克隆 | 第27-29页 |
| 4.4 转化Trans1-T1感受态细胞 | 第29-30页 |
| 4.5 测序 | 第30页 |
| 4.6 Em Aurora与不同物种的Aurora蛋白的序列比对 | 第30页 |
| 5 实验结果及分析 | 第30-39页 |
| 5.1 泡状棘球蚴RNA的提取 | 第30页 |
| 5.2 EmAurora全长基因的克隆 | 第30-31页 |
| 5.3 EmAurora-pBKS重组质粒的菌液PCR检测 | 第31-32页 |
| 5.4 EmAurora基因序列分析 | 第32-35页 |
| 5.5 EmAurora与不同物种的Aurora家族蛋白的序列比对 | 第35-37页 |
| 5.6 EmAurora的系统进化分析 | 第37-38页 |
| 5.7 EmAurora蛋白的三维结构分析 | 第38-39页 |
| 6 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 EmAurora的表达及功能分析 | 第41-65页 |
| 1 材料与试剂 | 第41-43页 |
| 1.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 1.2 试剂与药品 | 第42-43页 |
| 2 仪器与耗材 | 第43页 |
| 3 溶液配制 | 第43-46页 |
| 4 实验方法 | 第46-55页 |
| 4.1 特异性抗原片段的选取 | 第46页 |
| 4.2 EmAurora-pcDNA3.3-HA重组质粒的构建 | 第46-47页 |
| 4.3 EmAurora-pcDNA3.3-HA点突变载体的构建 | 第47-48页 |
| 4.4 点突变质粒的鉴定 | 第48-49页 |
| 4.5 EmAurora-pcDNA3.3-HA转染293T细胞 | 第49页 |
| 4.6 细胞蛋白的提取 | 第49页 |
| 4.7 泡状棘球蚴囊泡蛋白的提取 | 第49-50页 |
| 4.8 免疫印迹分析 | 第50-51页 |
| 4.9 原核表达载体H3-pET-28a的构建及表达 | 第51-54页 |
| 4.10 体外激酶实验 | 第54-55页 |
| 4.11 EmAurora的体外表达定位分析 | 第55页 |
| 5 实验结果及分析 | 第55-63页 |
| 5.1 EmAurora抗体的制备 | 第55页 |
| 5.2 EmAurora-pcDNA3.3-HA真核表达质粒的构建 | 第55-56页 |
| 5.3 EmAurora的真核表达 | 第56-58页 |
| 5.4 泡状棘球蚴EmAurora的转录水平分析 | 第58页 |
| 5.5 泡状棘球蚴阶段EmAurora的蛋白水平分析 | 第58-59页 |
| 5.6 组蛋白H3-pET-28a的酶切检测 | 第59页 |
| 5.7 组蛋白H3-pET-28a的原核表达 | 第59-61页 |
| 5.8 体外激酶实验分析 | 第61-62页 |
| 5.9 EmAurora体外表达定位分析 | 第62-63页 |
| 6 讨论 | 第63-65页 |
| 第四章 Aurora抑制剂对泡状棘球蚴生长发育的影响 | 第65-76页 |
| 1 材料与试剂 | 第65-66页 |
| 1.1 实验材料 | 第65页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第65-66页 |
| 2 仪器与耗材 | 第66页 |
| 3 溶液配制 | 第66-67页 |
| 4 实验方法 | 第67-70页 |
| 4.1 泡状棘球蚴与Hela细胞共培养 | 第67-68页 |
| 4.2 泡状棘球蚴组织在Hela细胞培养液中的培养体系 | 第68页 |
| 4.3 Aurora抑制剂VX680、MLN8237、AZD1152对体外培养原头节及泡囊发育的影响 | 第68-69页 |
| 4.4 Aurora抑制剂VX680、MLN8024、AZD1152对体外培养泡状棘球蚴泡囊的影响 | 第69-70页 |
| 4.5 泡状棘球蚴泡囊贴片制备 | 第70页 |
| 5 实验结果及分析 | 第70-74页 |
| 5.1 对体外培养泡状棘球蚴生长发育的影响 | 第70-73页 |
| 5.2 对体外培养的泡状棘球蚴泡囊的EdU染色情况 | 第73-74页 |
| 6 讨论 | 第74-76页 |
| 总结与展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
