中英文对照缩略词表 | 第8-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
前言 | 第14-17页 |
第一章 不同分期EML4-ALK融合基因阳性NSCLC患者中TGF β RⅡ表达 | 第17-28页 |
1、实验材料 | 第17-18页 |
1.1 .研究对象 | 第17页 |
1.2 实验试剂与耗材 | 第17-18页 |
2、实验方法 | 第18-22页 |
2.1 肺腺癌石蜡组织样本免疫组织化学检测 | 第18-19页 |
2.2 肺腺癌石蜡组织样本实时荧光定量PCR(QPCR)检测ALKMRNA表达 | 第19-20页 |
2.2.1 引物设计与合成 | 第19页 |
2.2.2 RNA提取 | 第19-20页 |
2.2.3 反转录 | 第20页 |
2.2.4 定时定量PCR | 第20页 |
2.3 肺腺癌石蜡组织样本逆转录PCR(RT-PCR)检测TGFβRIImRNA表达 | 第20-22页 |
2.3.1 石蜡组织样本总RNA提取 | 第20-21页 |
2.3.2 引物设计与合成 | 第21页 |
2.3.3 逆转录反应 | 第21页 |
2.3.4 RT-PCR反应 | 第21-22页 |
3、统计学分析 | 第22页 |
4、实验结果 | 第22-26页 |
4.1 患者基本情况 | 第22-23页 |
4.2 RT-qPCR检测EML4-ALK结果 | 第23-24页 |
4.3 EML4-ALK 融合蛋白表达结果 | 第24页 |
4.4 TGFβRIImRNA在不同分期ALK阳性NSCLC患者中表达 | 第24-26页 |
4.4.1 IA期和IIIA期EML4-ALK阳性肺腺癌患者临床病理特征 | 第24-25页 |
4.4.2 IA期和IIIA期EML4-ALK阳性肺腺癌临床石蜡组织样本中TGFβRIImRNA表达 | 第25-26页 |
5、讨论 | 第26-28页 |
第二章 TGFΒRⅡ对肺腺癌H3122细胞侵袭行为的影响 | 第28-44页 |
1、实验材料 | 第28-29页 |
1.1 .研究对象 | 第28页 |
1.2 实验试剂与耗材 | 第28-29页 |
2、实验方法 | 第29-37页 |
2.1 DNA胶回收 | 第29-30页 |
2.2 质粒提取 | 第30页 |
2.3 细胞培养 | 第30-31页 |
2.4 细胞基因组DNA提取 | 第31页 |
2.5 实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
2.6 载体构建 | 第32-35页 |
2.6.1 TGFβRⅡ干扰载体构建 | 第32-35页 |
2.7 慢病毒包装 | 第35-36页 |
2.7.1 细胞转染 | 第35页 |
2.7.2 慢病毒感染及稳定株筛选 | 第35-36页 |
2.8 细胞迁移实验 | 第36页 |
2.9 Transwell细胞侵袭 | 第36页 |
2.10 细胞增殖实验 | 第36页 |
2.11 克唑替尼药物抑制实验 | 第36-37页 |
3、统计学分析 | 第37页 |
4、实验结果 | 第37-41页 |
4.1 TGFβRⅡshRNA转染效率 | 第37-38页 |
4.2 细胞迁移实验结果 | 第38-39页 |
4.3 细胞侵袭实验结果 | 第39页 |
4.4 细胞增殖实验结果 | 第39-40页 |
4.5 克唑替尼药物抑制实验 | 第40-41页 |
5、讨论 | 第41-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-53页 |
综述 | 第53-63页 |
1.EML4-ALK阳性NSCLC研究进展 | 第55-56页 |
1.1 EML4-ALK基因融合在NSCLC疾病中的临床现状 | 第55页 |
1.2 EML4-ALK阳性NSCLC患者治疗进展 | 第55-56页 |
2.TGFβ在EML4-ALK基因融合型NSCLC患者中的研究进展 | 第56-59页 |
2.1 TGFβ在NSCLC患者中的诊断研究 | 第56-57页 |
2.2 IGF-β在NSCLC患者治疗过程中获得性耐药的作用 | 第57-58页 |
2.3 TGFβ在EML4-ALK阳性NSCLC患者中抗耐药性研究 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
攻读期间的研究成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |