中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第15-21页 |
1.1 昆虫表皮概述 | 第15-16页 |
1.2 昆虫表皮蛋白分类 | 第16-17页 |
1.3 昆虫表皮蛋白基因研究进展 | 第17-18页 |
1.4 研究目的和意义 | 第18-21页 |
第二章 飞蝗蛋白质组学测定及差异表皮蛋白分析 | 第21-35页 |
2.1 实验材料及试剂 | 第21-23页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第21页 |
2.1.2 相关试剂 | 第21页 |
2.1.3 主要溶液及缓冲液的配制 | 第21-22页 |
2.1.4 主要设备及仪器 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-25页 |
2.2.1 飞蝗表皮石蜡切片制备及H&E染色 | 第23-24页 |
2.2.2 表皮总蛋白提取 | 第24页 |
2.2.3 蛋白质组学测定与分析 | 第24-25页 |
2.3 实验结果 | 第25-32页 |
2.3.1 H&E染色观察 | 第25-26页 |
2.3.2 SDS-PAGE | 第26-27页 |
2.3.3 蛋白质组学测定分析 | 第27-30页 |
2.3.4 差异表皮蛋白分析 | 第30-32页 |
2.4 讨论 | 第32-35页 |
第三章 飞蝗内表皮蛋白生物信息学分析 | 第35-43页 |
3.1 实验方法 | 第35页 |
3.1.1 基因结构和序列分析 | 第35页 |
3.1.2 系统进化树分析 | 第35页 |
3.2 实验结果 | 第35-40页 |
3.3 讨论 | 第40-43页 |
第四章 飞蝗内表皮蛋白基因克隆及表达分析 | 第43-59页 |
4.1 实验材料及试剂 | 第43-44页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第43页 |
4.1.2 相关试剂 | 第43页 |
4.1.3 主要设备及仪器 | 第43-44页 |
4.2 实验方法 | 第44-48页 |
4.2.1 基因引物的设计 | 第44-45页 |
4.2.2 不同组织部位和龄期的表达分析 | 第45-46页 |
4.2.3 20 E诱导表达分析 | 第46-47页 |
4.2.4 目的片段扩增 | 第47页 |
4.2.5 目的片段检测及纯化 | 第47页 |
4.2.6 干扰20E核受体及早期转录因子HR3后靶基因的表达变化 | 第47-48页 |
4.2.7 数据分析 | 第48页 |
4.3 实验结果 | 第48-56页 |
4.3.1 目的基因的克隆 | 第48-49页 |
4.3.2 靶基因组织、时期表达分析 | 第49-52页 |
4.3.3 20E诱导表达结果 | 第52-54页 |
4.3.4 干扰20E受体基因LmEcR和早期转录因子LmHR3后靶基因的表达变化 | 第54-56页 |
4.4 讨论 | 第56-59页 |
第五章 飞蝗内表皮蛋白基因的功能分析 | 第59-65页 |
5.1 实验材料及试剂 | 第59页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第59页 |
5.1.2 相关试剂 | 第59页 |
5.1.3 主要设备及仪器 | 第59页 |
5.1.4 主要溶液配置 | 第59页 |
5.2 实验方法 | 第59-60页 |
5.2.1 dsRNA引物设计 | 第59-60页 |
5.2.2 体外合成dsRNA | 第60页 |
5.2.3 dsRNA体外注射以及沉默效率检测 | 第60页 |
5.2.4 飞蝗表皮取样及石蜡切片制备 | 第60页 |
5.2.5 H&E染色 | 第60页 |
5.3 实验结果 | 第60-63页 |
5.4 讨论 | 第63-65页 |
全文总结 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
个人简况 | 第77-80页 |