摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 前言 | 第11-19页 |
1 植物基因启动子的组成及功能 | 第11-12页 |
2 植物启动子的分类 | 第12-14页 |
·组成型启动子 | 第12页 |
·组织特异型启动子 | 第12-13页 |
·诱导型启动子 | 第13-14页 |
3 启动子的分析方法 | 第14-15页 |
4 启动子中与胁迫相关顺式作用元件研究进展 | 第15-17页 |
5 ERF类转录因子研究进展 | 第17-18页 |
6 本研究目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 水稻OsWTF1和OsWTF2基因启动子的生物信息学分析 | 第19-24页 |
1 材料与方法 | 第19页 |
2 结果与分析 | 第19-22页 |
·OsWTF1启动子序列分析结果 | 第19-20页 |
·OsWTF2启动子序列分析结果 | 第20-22页 |
3 讨论 | 第22-24页 |
第三章 OsWTF1和OsWTF2全长启动子与5'端缺失启动子的克隆以及表达载体构建 | 第24-33页 |
1 材料 | 第24页 |
·植物材料、质粒与菌种 | 第24页 |
·试剂 | 第24页 |
2 实验方法 | 第24-29页 |
·启动子表达载体构建技术路线 | 第24-25页 |
·引物设计 | 第25-26页 |
·CTAB法提取植物DNA | 第26页 |
·PCR扩增Os WTF1和OsWTF2全长启动子及缺失启动子 | 第26-27页 |
·PCR产物、表达载体的双酶切及纯化回收 | 第27页 |
·表达载体与目的DNA片断连接反应 | 第27-28页 |
·大肠杆菌、农杆菌感受态制备及质粒转化 | 第28页 |
·重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-32页 |
·PCR扩增OsWTF1和OsWTF2基因全长启动子及缺失启动子 | 第29-30页 |
·重组子的PCR和酶切鉴定 | 第30-31页 |
·表达载体转化到农杆菌的鉴定 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-33页 |
第四章 OsWTF1和OsWTF2启动子与缺失启动子的水稻遗传转化及表达分析 | 第33-50页 |
1 材料 | 第33-34页 |
·表达载体、植物材料 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·培养基 | 第34页 |
2 实验方法 | 第34-38页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第34-35页 |
·转基因阳性植株检测 | 第35-36页 |
·GUS组织化学分析 | 第36页 |
·GUS的定量检测 | 第36-37页 |
·T1代转基因水稻逆境处理 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-47页 |
·水稻遗传转化结果分析 | 第38-39页 |
·转基因阳性植株检测 | 第39页 |
·OsWTF1启动子及缺失启动子转化植株的GUS组织化学分析 | 第39-42页 |
·OsWTF2启动子及缺失启动子转化植株的GUS组织化学分析 | 第42-44页 |
·OsWTF1启动子以及缺失启动子转化植株的GUS定量检测 | 第44页 |
·OsWTF2启动子以及缺失启动子转化植株的GUS定量检测 | 第44-45页 |
·逆境条件下OsWTF1启动子以及缺失启动子表达特性 | 第45-46页 |
·逆境条件下OsWTF2启动子以及缺失启动子表达特性 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
附录 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |