| 英文缩略词表 | 第3-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献研究 | 第13-25页 |
| 1 植物萜类化合物的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.1 三萜皂苷简介 | 第13页 |
| 1.2 三萜皂苷生物合成研究 | 第13-15页 |
| 1.3 α-amyrin与其它乌索烷型萜类的研究进展 | 第15-16页 |
| 2 合成生物学与代谢工程 | 第16-18页 |
| 2.1 合成生物学简介 | 第16-17页 |
| 2.2 代谢工程简介 | 第17页 |
| 2.3 合成生物学与代谢工程的应用 | 第17-18页 |
| 3 基于酿酒酵母系统的萜类合成生物学研究进展 | 第18-20页 |
| 3.1 酵母内源MVA途径研究及改造 | 第18-19页 |
| 3.2 在萜类药效活性成分代谢工程中的应用 | 第19-20页 |
| 4 基因编辑技术 | 第20-23页 |
| 4.1 ZFNs和TALENs基因组编辑技术 | 第20-21页 |
| 4.2 CRISPR/Cas9技术 | 第21-23页 |
| 5 课题组前期基础与研究思路 | 第23-25页 |
| 5.1 课题组前期基础 | 第23页 |
| 5.2 本课题研究思路 | 第23-25页 |
| 第二章 材料和方法 | 第25-40页 |
| 1 材料 | 第25-27页 |
| 1.1 菌株 | 第25页 |
| 1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第26页 |
| 1.4 培养基配制 | 第26-27页 |
| 1.5 酵母转化试剂 | 第27页 |
| 1.6 常用软件 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-40页 |
| 2.1 菌株的培养 | 第27-28页 |
| 2.2 酿酒酵母WAT11基因组分析 | 第28-29页 |
| 2.3 CRISPR/Cas9基因插入与敲除 | 第29-36页 |
| 2.4 酵母生长情况与代谢产物检测 | 第36-37页 |
| 2.5 pEXPR/IaAS1质粒的转化 | 第37-38页 |
| 2.6 IaAS1表达盒的基因敲入 | 第38页 |
| 2.7 酿酒酵母香树脂醇产量检测 | 第38-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-64页 |
| 1 CRISPR/Cas9靶位点分析 | 第40-42页 |
| 1.1 酿酒酵母WAT11基因组分析 | 第40-41页 |
| 1.2 小结与讨论 | 第41-42页 |
| 2 WAT11单基因编辑衍生菌株的构建与考察 | 第42-53页 |
| 2.1 WAT11t/f/s/i1/i2/Δg菌株的构建 | 第42-49页 |
| 2.2 WAT11t/f/s/i1/i2/Δg的生长曲线绘制 | 第49-50页 |
| 2.3 菌株角鲨烯产量的比较 | 第50-51页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第51-53页 |
| 3 WAT11多基因编辑衍生菌株的构建与考察 | 第53-59页 |
| 3.1 WAT11tf/ti1/ts菌株的构建 | 第53页 |
| 3.2 WAT11tf/ti1/ts的生长曲线绘制 | 第53-54页 |
| 3.3 角鲨烯产量的比较 | 第54-55页 |
| 3.4 乙酰辅酶A合酶的引入 | 第55-57页 |
| 3.5 WAT11tfA菌株生长曲线绘制 | 第57页 |
| 3.6 角鲨烯产量的比较 | 第57-58页 |
| 3.7 小结与讨论 | 第58-59页 |
| 4 α-amyrin的细胞工厂构建 | 第59-64页 |
| 4.1 IaAS1基因表达盒的制备 | 第59-60页 |
| 4.2 WAT11tfAX菌株构建与WAT11tfA游离质粒转化 | 第60页 |
| 4.3 各菌株的香树脂醇产量比较 | 第60-63页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第63-64页 |
| 结语 | 第64-66页 |
| 1 结论 | 第64页 |
| 2 创新点 | 第64-65页 |
| 3 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 附录 | 第71-81页 |
| 在校期间发表论文和参与科研情况 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 附件 | 第83页 |
