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SphK2敲除改善STZ诱导的糖尿病及其肾脏并发症的研究

摘要第4-7页
abstract第7-9页
第一章 序言第14-19页
    1.1 糖尿病第14-15页
    1.2 糖尿病肾病第15-16页
    1.3 SphK-S1P信号通路第16页
    1.4 SphK-S1P信号通路与糖尿病、肾病研究报道第16-18页
    1.5 本研究目的第18-19页
第二章 SphK2基因敲除小鼠繁殖与鉴定第19-28页
    2.1 前言第19页
    2.2 实验材料第19-21页
        2.2.1 主要仪器与设备第19-20页
        2.2.2 实验动物第20页
        2.2.3 主要试剂第20-21页
    2.3 实验方法第21-24页
        2.3.1 SphK2基因敲除小鼠的繁殖第21页
        2.3.2 配对情况第21页
        2.3.3 饲养环境第21页
        2.3.4 小鼠的基因型鉴定第21-22页
        2.3.5 SphK2蛋白检测第22-24页
    2.4 实验结果第24-26页
        2.4.1 小鼠的生长情况及基因型鉴定第24-25页
        2.4.2 小鼠基因型鉴定结果第25-26页
        2.4.3 SphK2敲除小鼠的繁育情况第26页
        2.4.4 基因敲除小鼠SphK2蛋白质表达第26页
    2.5 小结与讨论第26-28页
第三章 SphK2基因敲除对STZ诱导糖尿病小鼠降糖作用的研究第28-42页
    3.1 前言第28页
    3.2 实验材料第28-31页
        3.2.1 主要仪器与设备第28-29页
        3.2.2 实验动物第29页
        3.2.3 主要试剂第29-30页
        3.2.4 主要溶液的配置第30-31页
    3.3 实验方法第31-36页
        3.3.1 糖尿病小鼠模型的建立第31-32页
        3.3.2 小鼠血糖检测第32页
        3.3.3 小鼠眼眶取血第32页
        3.3.4 小鼠血浆胰岛素的检测第32-33页
        3.3.5 小鼠胰腺组织的固定、包埋和石蜡切片第33-34页
        3.3.6 H&E染色观察胰腺病理形态第34页
        3.3.7 免疫组织化学染色检测胰岛素和胰高血糖素表达第34-35页
        3.3.8 Tunel染色检测胰岛凋亡第35-36页
    3.4 实验结果第36-41页
        3.4.1 SphK2基因敲除抵抗STZ诱导的糖尿病小鼠第36-37页
        3.4.2 SphK2基因敲除对糖尿病小鼠血浆胰岛素的影响第37-38页
        3.4.3 SphK2基因敲除对糖尿病小鼠胰腺影响第38-39页
        3.4.4 SphK2基因敲除对胰腺组织胰岛素的影响第39页
        3.4.5 SphK2基因敲除对胰腺组织胰高血糖素的影响第39-40页
        3.4.6 SphK2基因敲除抑制胰腺细胞凋亡第40-41页
    3.5 小结与讨论第41-42页
第四章 SphK2敲除对STZ诱导的糖尿病小鼠肾脏保护作用的研究第42-57页
    4.1 前言第42页
    4.2 实验材料第42-45页
        4.2.1 主要仪器与设备第42-44页
        4.2.2 实验动物第44页
        4.2.3 主要试剂第44-45页
        4.2.4 主要试剂配制第45页
    4.3 实验方法第45-49页
        4.3.1 糖尿病小鼠模型的建立第45-46页
        4.3.2 收集小鼠 24 小时尿样,检测 24 小时尿蛋白含量第46页
        4.3.3 小鼠眼眶取血第46页
        4.3.4 小鼠血尿素氮、血肌酐的测定第46页
        4.3.5 小鼠血尿素氮、血肌酐的测定第46-47页
        4.3.6 制作APES玻片第47页
        4.3.7 小鼠肾脏组织的固定、包埋和石蜡切片第47页
        4.3.8 肾脏PAS染色第47-48页
        4.3.9 肾脏 PAS 染色第48页
        4.3.10 肾脏天狼猩红染色第48页
        4.3.11 免疫组织化学(IHC)染色检测SphK2、FN蛋白第48页
        4.3.12 Westernblot检测肾脏SphK2、FN蛋白的表达第48页
        4.3.13 RT-PCR检测肾脏FNmRNA表达第48-49页
        4.3.14 数据处理第49页
    4.4 实验结果第49-55页
        4.4.1 SphK2在糖尿病肾病肾脏组织中高表达第49-50页
        4.4.2 SphK2基因敲除对STZ诱导糖尿病小鼠代谢参数的影响第50-51页
        4.4.3 SphK2基因敲除对STZ诱导糖尿病小鼠肾脏整体形态的影响第51-52页
        4.4.4 SphK2基因敲除对肾脏细胞外基质影响第52页
        4.4.5 SphK2基因敲除对肾脏纤维化影响第52-53页
        4.4.6 SphK2基因敲除抑制肾脏FN表达第53-54页
        4.4.7 SphK2抑制剂对糖尿病肾病的治疗作用第54-55页
    4.5 小结与讨论第55-57页
第五章 全文结论与展望第57-59页
    5.1 结论与创新之处:第57页
    5.2 本实验展望与不足之处:第57-59页
参考文献第59-64页
附录一第64-66页
致谢第66-67页
攻读研究生硕士学位期间发表论文第67页

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