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淹水胁迫下小麦胚乳线粒体损伤和细胞色素c释放对细胞程序性死亡的影响

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略表第12-13页
1 前言第13-25页
    1.1 细胞程序性死亡第13-14页
    1.2 胚乳细胞PCD第14-15页
    1.3 淹水胁迫对植物生长发育的影响第15-16页
        1.3.1 淹水对植物生理生化的影响第15-16页
        1.3.2 淹水胁迫诱导植物细胞PCD第16页
        1.3.3 植物对淹水胁迫的适应第16页
    1.4 PCD信号调控机制第16-19页
        1.4.1 死亡受体途径第17-18页
        1.4.2 线粒体和内质网途径第18-19页
    1.5 植物PCD相关的效应因子第19-23页
        1.5.1 线粒体第19-20页
        1.5.2 细胞色素c第20页
        1.5.3 Caspase第20-21页
        1.5.4 ROS第21-22页
        1.5.5 其他因素第22-23页
    1.6 外源药剂处理对植物PCD的影响第23页
    1.7 本研究的目的及意义第23-25页
2 材料与方法第25-36页
    2.1 材料培养与淹水处理第25页
    2.2 外源药剂处理第25页
    2.3 小麦胚乳PCD的检测第25-26页
    2.4 胚乳细胞线粒体提取与检测第26-27页
        2.4.1 胚乳细胞线粒体提取第26页
        2.4.2 线粒体纯度与完整性检测第26-27页
    2.5 胚乳细胞线粒体特性变化第27-28页
        2.5.1 线粒体膜通透性检测第27页
        2.5.2 胚乳细胞线粒体超微结构观察第27页
        2.5.3 线粒体膜通透性和细胞色素c/a比值第27-28页
    2.6 免疫荧光和免疫超微细胞化学定位第28-29页
        2.6.1 细胞色素c免疫荧光定位第28页
        2.6.2 细胞色素c的超微细胞化学定位第28-29页
    2.7 蛋白质免疫印记第29-30页
        2.7.1 胚乳蛋白质提取第29页
        2.7.2 SDS-PAG电泳分离胚乳蛋白第29-30页
        2.7.3 将蛋白转至硝酸纤维索膜第30页
        2.7.4 蛋白质免疫反应第30页
    2.8 基因表达量检测第30-32页
        2.8.1 胚乳细胞总RNA的提取第30-31页
        2.8.2 RNA反转录第31页
        2.8.3 实时定量PCR反应第31-32页
    2.9 小麦胚乳生理指标的测定第32-36页
        2.9.1 小麦胚乳中超氧阴离子(O~(2-))含量的测定第32-33页
        2.9.2 小麦胚乳中过氧化氢(H_2O_2)含量的测定第33页
        2.9.3 小麦胚乳中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定第33-34页
        2.9.4 小麦胚乳中过氧化氢酶(CAT)活性的测定第34页
        2.9.5 胚乳细胞caspase-like蛋白酶活性测定第34-35页
        2.9.6 数据统计分析第35-36页
3 结果与分析第36-54页
    3.1 淹水胁迫对小麦胚乳细胞PCD进程的影响第36-37页
    3.2 淹水胁迫对小麦胚乳细胞线粒体结构和活性的影响第37-40页
    3.3 淹水胁迫对小麦胚乳细胞细胞色素c释放的影响第40-45页
    3.4 线粒体膜通透性转换孔组分基因的相对表达量第45-47页
    3.5 外源药剂处理对小麦胚乳生理的影响第47-54页
        3.5.1 外源药剂处理对小麦胚乳PCD影响第47页
        3.5.2 外源药剂处理对小麦胚乳中ROS含量影响第47-49页
        3.5.3 外源药剂处理对小麦胚乳中抗氧化酶活性影响第49-50页
        3.5.4 外源药剂处理对线粒体膜透性影响第50-51页
        3.5.5 外源药剂处理对细胞色素c释放的影响第51-52页
        3.5.6 外源药剂处理对caspase活性影响第52-54页
4 讨论第54-58页
    4.1 线粒体参与淹水胁迫下胚乳细胞PCD过程第54-55页
    4.2 胚乳细胞PCD过程中细胞色素c的释放第55-56页
    4.3 不同耐湿性品种对外源药剂处理响应第56-57页
    4.4 本研究创新性和不足第57页
    4.5 展望第57-58页
参考文献第58-71页
附录1 实验所用试剂用量及配方第71-72页
附录2 在读期间发表文章第72-73页
附录3 论文图版第73-74页
致谢第74页

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