| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 GPV分类地位、形态特征和理化特性 | 第10-11页 |
| 1.2 GPV的培养特性 | 第11页 |
| 1.3 GPV分子生物学研究 | 第11-13页 |
| 1.3.1 基因组结构 | 第11-12页 |
| 1.3.2 蛋白质 | 第12-13页 |
| 1.4 小鹅瘟流行病学与症状 | 第13-14页 |
| 1.5 小鹅瘟的诊断 | 第14-15页 |
| 1.5.1 临床诊断 | 第14页 |
| 1.5.2 血清学检测 | 第14-15页 |
| 1.5.3 分子生物学诊断 | 第15页 |
| 1.6 小鹅瘟疫苗的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.6.1 GPV常规疫苗 | 第15-16页 |
| 1.6.2 GPV基因工程苗 | 第16-17页 |
| 1.7 腺病毒载体表达系统 | 第17-18页 |
| 1.7.1 腺病毒载体概述 | 第17-18页 |
| 1.7.2 腺病毒在动物疫苗研制中的应用 | 第18页 |
| 1.8 本研究目的及意义 | 第18-21页 |
| 2 鹅细小病毒VP3基因重组腺病毒的构建与鉴定 | 第21-42页 |
| 2.1 材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 菌株、毒株、细胞及质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-33页 |
| 2.2.1 GPVVP3基因的扩增 | 第24页 |
| 2.2.2 包含GPVVP3基因的重组穿梭质粒的构建 | 第24-27页 |
| 2.2.3 腺病毒在HEK293AD细胞中的包装 | 第27-29页 |
| 2.2.4 重组腺病毒的RT-PCR鉴定 | 第29-31页 |
| 2.2.5 小鼠抗GPV阳性血清制备 | 第31-32页 |
| 2.2.6 重组腺病毒的Westernblot分析 | 第32-33页 |
| 2.2.7 重组腺病毒的间接免疫荧光(IFA)分析 | 第33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-39页 |
| 2.3.1 GPVVP3基因的扩增 | 第33-34页 |
| 2.3.2 转化子的PCR筛选 | 第34-35页 |
| 2.3.3 重组穿梭质粒的酶切鉴定 | 第35页 |
| 2.3.4 质粒共转染HEK293AD细胞的结果 | 第35-36页 |
| 2.3.5 腺病毒的传代和滴度测定 | 第36-37页 |
| 2.3.6 重组腺病毒的RT-PCR鉴定 | 第37-38页 |
| 2.3.7 重组腺病毒Western-blot鉴定 | 第38页 |
| 2.3.8 重组腺病毒的IFA鉴定 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-41页 |
| 2.5 小结 | 第41-42页 |
| 3 重组腺病毒rAd-VP3的免疫原性 | 第42-54页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42页 |
| 3.1.1 材料 | 第42页 |
| 3.1.2 ELISA相关试剂的配制 | 第42页 |
| 3.2 方法 | 第42-45页 |
| 3.2.1 小鼠免疫试验 | 第42-44页 |
| 3.2.2 雏鹅免疫试验 | 第44页 |
| 3.2.3 结果统计 | 第44-45页 |
| 3.3 结果 | 第45-51页 |
| 3.3.1 GPV病毒TCID50的测定结果 | 第45页 |
| 3.3.2 小鼠免疫试验血清特异抗体的检测 | 第45-50页 |
| 3.3.3 雏鹅免疫试验血清特异抗体水平的检测 | 第50-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-53页 |
| 3.5 小结 | 第53-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65-66页 |
| 导师简介 | 第66页 |
