| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 常用缩写词中英文对照表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-19页 |
| 1 棘球蚴病的流行现状 | 第11-13页 |
| 1.1 细粒棘球蚴病 | 第11-12页 |
| 1.2 多房棘球蚴病 | 第12-13页 |
| 1.3 其他棘球蚴病 | 第13页 |
| 2 棘球蚴病的治疗措施 | 第13-14页 |
| 3 棘球蚴病治疗药物的研究手段概述 | 第14页 |
| 4 微管和微管蛋白 | 第14-17页 |
| 4.1 微管的结构特点 | 第14-15页 |
| 4.2 微管的动力学特征及生物学功能 | 第15页 |
| 4.3 寄生虫微管的研究现状 | 第15-16页 |
| 4.4 微管蛋白体外聚合反应的研究现状 | 第16页 |
| 4.5 微管蛋白抑制剂 | 第16-17页 |
| 5 苯并咪唑类药物的抗寄生虫作用 | 第17页 |
| 6 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 7 研究目标与内容 | 第18-19页 |
| 7.1 研究目标 | 第18页 |
| 7.2 研究内容 | 第18-19页 |
| 第一部分 细粒棘球蚴微管蛋白的表达水平分析 | 第19-30页 |
| 引言 | 第19页 |
| 1 材料与试剂 | 第19-21页 |
| 1.1 细粒棘球蚴原头节和囊壁组织 | 第19-20页 |
| 1.2 主要仪器与设备 | 第20-21页 |
| 1.3 主要试剂与试剂盒 | 第21页 |
| 2 方法与步骤 | 第21-25页 |
| 2.1 基因组的搜索与引物设计 | 第21-23页 |
| 2.2 总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.3 cDNA的合成 | 第24页 |
| 2.4 细粒棘球蚴Tubulin-α和Tubulin-β同型基因的表达分析 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-28页 |
| 3.1 总RNA的质量鉴定 | 第25-26页 |
| 3.2 细粒棘球蚴Tubulin-α和Tubulin-β基因mRNA的表达量 | 第26-28页 |
| 3.2.1 细粒棘球蚴Tubulin-α和Tubulin-β的扩增曲线及熔解曲线 | 第26-27页 |
| 3.2.2 细粒棘球蚴各同型微管蛋白的相对表达量 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-30页 |
| 第二部分 细粒棘球蚴微管蛋白的原核表达及纯化 | 第30-52页 |
| 引言 | 第30页 |
| 1 材料与试剂 | 第30-34页 |
| 1.1 原头节cDNA | 第30-31页 |
| 1.2 主要仪器与设备 | 第31-32页 |
| 1.3 主要试剂与试剂盒 | 第32-34页 |
| 2 方法与步骤 | 第34-42页 |
| 2.1 引物设计与合成 | 第34-35页 |
| 2.2 原核表达载体的构建 | 第35-39页 |
| 2.2.1 目标基因的扩增 | 第35-36页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶电泳及切胶 | 第36页 |
| 2.2.3 目标片段的胶回收 | 第36-37页 |
| 2.2.4 TA-克隆 | 第37页 |
| 2.2.5 感受态细胞的转化 | 第37页 |
| 2.2.6 质粒抽提 | 第37-38页 |
| 2.2.7 酶切及酶连 | 第38-39页 |
| 2.3 重组蛋白的诱导表达及可溶性分析 | 第39-40页 |
| 2.4 重组蛋白表达条件的优化 | 第40-41页 |
| 2.5 重组蛋白的大量表达及可溶性蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| 2.6 重组蛋白的Western Blot验证 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-49页 |
| 3.1 目标基因的扩增 | 第42-43页 |
| 3.2 菌落PCR验证 | 第43-44页 |
| 3.3 双酶切鉴定 | 第44页 |
| 3.4 重组蛋白的诱导表达及可溶性分析 | 第44-45页 |
| 3.5 重组蛋白表达条件的优化 | 第45-47页 |
| 3.6 重组蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| 3.7 重组蛋白的特异性鉴定 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 第三部分 细粒棘球蚴重组微管蛋白的体外聚合及苯并咪唑类药物的影响 | 第52-69页 |
| 引言 | 第52-53页 |
| 1 材料与试剂 | 第53-55页 |
| 1.1 原头节 | 第53页 |
| 1.2 主要仪器与设备 | 第53-54页 |
| 1.3 主要试剂与试剂盒 | 第54-55页 |
| 2 方法与步骤 | 第55-58页 |
| 2.1 重组微管蛋白的体外聚合 | 第55-56页 |
| 2.1.1 聚合产物的激光共聚焦观察 | 第56页 |
| 2.1.2 聚合产物的透射电镜观察 | 第56页 |
| 2.2 苯并咪唑类药物对重组微管蛋白体外聚合的影响 | 第56-57页 |
| 2.3 苯并咪唑类药物对猪脑微管蛋白体外聚合的影响 | 第57页 |
| 2.4 苯并咪唑类药物对原头节基因转录及蛋白表达的影响 | 第57-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-66页 |
| 3.1 重组微管蛋白体外聚合浓度的优化 | 第58-60页 |
| 3.1.1 聚合产物的激光共聚焦观察 | 第59页 |
| 3.1.2 聚合产物的透射电镜观察 | 第59-60页 |
| 3.2 苯并咪唑类药物对重组微管蛋白体外聚合的影响 | 第60-62页 |
| 3.3 苯并咪唑类药物对猪脑微管蛋白体外聚合的影响 | 第62-64页 |
| 3.4 苯并咪唑类药物对原头节微管蛋白基因mRNA表达量的影响 | 第64-65页 |
| 3.5 苯并咪唑类药物对原头节微管蛋白基因蛋白表达的影响 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-69页 |
| 结论和展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 综述 | 第78-83页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 论著 | 第83-90页 |
| 发表文章 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
