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细粒棘球蚴微管蛋白的原核表达、体外聚合及药物作用研究

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
常用缩写词中英文对照表第10-11页
前言第11-19页
    1 棘球蚴病的流行现状第11-13页
        1.1 细粒棘球蚴病第11-12页
        1.2 多房棘球蚴病第12-13页
        1.3 其他棘球蚴病第13页
    2 棘球蚴病的治疗措施第13-14页
    3 棘球蚴病治疗药物的研究手段概述第14页
    4 微管和微管蛋白第14-17页
        4.1 微管的结构特点第14-15页
        4.2 微管的动力学特征及生物学功能第15页
        4.3 寄生虫微管的研究现状第15-16页
        4.4 微管蛋白体外聚合反应的研究现状第16页
        4.5 微管蛋白抑制剂第16-17页
    5 苯并咪唑类药物的抗寄生虫作用第17页
    6 研究目的和意义第17-18页
    7 研究目标与内容第18-19页
        7.1 研究目标第18页
        7.2 研究内容第18-19页
第一部分 细粒棘球蚴微管蛋白的表达水平分析第19-30页
    引言第19页
    1 材料与试剂第19-21页
        1.1 细粒棘球蚴原头节和囊壁组织第19-20页
        1.2 主要仪器与设备第20-21页
        1.3 主要试剂与试剂盒第21页
    2 方法与步骤第21-25页
        2.1 基因组的搜索与引物设计第21-23页
        2.2 总RNA的提取第23-24页
        2.3 cDNA的合成第24页
        2.4 细粒棘球蚴Tubulin-α和Tubulin-β同型基因的表达分析第24-25页
    3 结果与分析第25-28页
        3.1 总RNA的质量鉴定第25-26页
        3.2 细粒棘球蚴Tubulin-α和Tubulin-β基因mRNA的表达量第26-28页
            3.2.1 细粒棘球蚴Tubulin-α和Tubulin-β的扩增曲线及熔解曲线第26-27页
            3.2.2 细粒棘球蚴各同型微管蛋白的相对表达量第27-28页
    4 讨论第28-30页
第二部分 细粒棘球蚴微管蛋白的原核表达及纯化第30-52页
    引言第30页
    1 材料与试剂第30-34页
        1.1 原头节cDNA第30-31页
        1.2 主要仪器与设备第31-32页
        1.3 主要试剂与试剂盒第32-34页
    2 方法与步骤第34-42页
        2.1 引物设计与合成第34-35页
        2.2 原核表达载体的构建第35-39页
            2.2.1 目标基因的扩增第35-36页
            2.2.2 琼脂糖凝胶电泳及切胶第36页
            2.2.3 目标片段的胶回收第36-37页
            2.2.4 TA-克隆第37页
            2.2.5 感受态细胞的转化第37页
            2.2.6 质粒抽提第37-38页
            2.2.7 酶切及酶连第38-39页
        2.3 重组蛋白的诱导表达及可溶性分析第39-40页
        2.4 重组蛋白表达条件的优化第40-41页
        2.5 重组蛋白的大量表达及可溶性蛋白的纯化第41-42页
        2.6 重组蛋白的Western Blot验证第42页
    3 结果与分析第42-49页
        3.1 目标基因的扩增第42-43页
        3.2 菌落PCR验证第43-44页
        3.3 双酶切鉴定第44页
        3.4 重组蛋白的诱导表达及可溶性分析第44-45页
        3.5 重组蛋白表达条件的优化第45-47页
        3.6 重组蛋白的纯化第47-48页
        3.7 重组蛋白的特异性鉴定第48-49页
    4 讨论第49-52页
第三部分 细粒棘球蚴重组微管蛋白的体外聚合及苯并咪唑类药物的影响第52-69页
    引言第52-53页
    1 材料与试剂第53-55页
        1.1 原头节第53页
        1.2 主要仪器与设备第53-54页
        1.3 主要试剂与试剂盒第54-55页
    2 方法与步骤第55-58页
        2.1 重组微管蛋白的体外聚合第55-56页
            2.1.1 聚合产物的激光共聚焦观察第56页
            2.1.2 聚合产物的透射电镜观察第56页
        2.2 苯并咪唑类药物对重组微管蛋白体外聚合的影响第56-57页
        2.3 苯并咪唑类药物对猪脑微管蛋白体外聚合的影响第57页
        2.4 苯并咪唑类药物对原头节基因转录及蛋白表达的影响第57-58页
    3 结果与分析第58-66页
        3.1 重组微管蛋白体外聚合浓度的优化第58-60页
            3.1.1 聚合产物的激光共聚焦观察第59页
            3.1.2 聚合产物的透射电镜观察第59-60页
        3.2 苯并咪唑类药物对重组微管蛋白体外聚合的影响第60-62页
        3.3 苯并咪唑类药物对猪脑微管蛋白体外聚合的影响第62-64页
        3.4 苯并咪唑类药物对原头节微管蛋白基因mRNA表达量的影响第64-65页
        3.5 苯并咪唑类药物对原头节微管蛋白基因蛋白表达的影响第65-66页
    4 讨论第66-69页
结论和展望第69-70页
参考文献第70-78页
综述第78-83页
    参考文献第81-83页
论著第83-90页
发表文章第90-91页
致谢第91页

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