| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 前言 | 第13-18页 |
| 1.1 宫颈癌概述 | 第13-14页 |
| 1.2 SLP-2基因概述 | 第14-16页 |
| 1.3 上皮间质转化与肿瘤转移 | 第16-18页 |
| 第二章 材料和方法 | 第18-38页 |
| 2.1 材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18-20页 |
| 2.1.3 主要耗材 | 第20页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第20-21页 |
| 2.2 细胞培养 | 第21-24页 |
| 2.2.1 细胞培养相关试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.2.3 细胞复苏、培养及换液 | 第22页 |
| 2.2.4 细胞传代 | 第22-23页 |
| 2.2.5 细胞冻存 | 第23页 |
| 2.2.6 细胞计数 | 第23-24页 |
| 2.3 细胞瞬时转染 | 第24-25页 |
| 2.3.1 靶向干扰SLP-2基因的siRNA的合成、保存和使用 | 第24-25页 |
| 2.3.2 细胞瞬时转染实验步骤 | 第25页 |
| 2.4 细胞功能实验 | 第25-28页 |
| 2.4.1 细胞划痕实验(wound healing assay) | 第25-26页 |
| 2.4.2 Transwell迁移实验 | 第26-27页 |
| 2.4.3 Transwell基质胶侵袭实验 | 第27页 |
| 2.4.4 MTT实验 | 第27-28页 |
| 2.4.5 细胞克隆形成实验 | 第28页 |
| 2.5 蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第28-34页 |
| 2.5.1 主要试剂的配制 | 第28-30页 |
| 2.5.2 细胞的全蛋白提取 | 第30页 |
| 2.5.3 蛋白浓度的测定(BCA法) | 第30-31页 |
| 2.5.4 蛋白质样品的变性及保存 | 第31页 |
| 2.5.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-34页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR (RT-PCR) | 第34-37页 |
| 2.6.1 细胞总RNA的提取和浓度测定 | 第34-36页 |
| 2.6.2 逆转录反应 | 第36页 |
| 2.6.3 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 2.7 统计学分析 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果 | 第38-46页 |
| 3.1 用RT-RCR及Western blot检测靶向沉默SLP-2的效果 | 第38-39页 |
| 3.2 沉默SLP-2可抑制Hela细胞及Siha细胞的迁移能力 | 第39-41页 |
| 3.2.1 划痕实验结果 | 第39-40页 |
| 3.2.2 Transwell迁移实验结果 | 第40-41页 |
| 3.3 沉默SLP-2可抑制Hela细胞及Siha细胞的侵袭能力 | 第41-42页 |
| 3.4 沉默SLP-2可抑制Hela细胞和Siha细胞的增殖能力 | 第42-44页 |
| 3.5 沉默SLP-2可抑制Hela细胞及Siha细胞的上皮间质转化(EMT) | 第44页 |
| 3.6 沉默SLP-2对EMT上游转录因子Twist的影响 | 第44-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-49页 |
| 全文小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 缩略词中英文对照 | 第58-60页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
