| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-20页 |
| 1.1 L-精氨酸的概述 | 第8-11页 |
| 1.1.1 L-精氨酸的理化性质 | 第8页 |
| 1.1.2 L-精氨酸的生理功能及应用 | 第8-9页 |
| 1.1.3 L-精氨酸的生产方法 | 第9-11页 |
| 1.2 谷氨酸棒杆菌合成L-精氨酸的概述 | 第11-13页 |
| 1.2.1 谷氨酸棒杆菌的简介 | 第11页 |
| 1.2.2 谷氨酸棒杆菌合成L-精氨酸的代谢合成途径 | 第11-12页 |
| 1.2.3 谷氨酸棒杆菌合成L-精氨酸的代谢调控机制 | 第12-13页 |
| 1.3 代谢工程育种 | 第13-16页 |
| 1.3.1 代谢工程概述 | 第13-14页 |
| 1.3.2 辅因子代谢工程 | 第14页 |
| 1.3.3 谷氨酸棒杆菌基因敲除载体现状 | 第14-16页 |
| 1.4 本课题研究的背景、意义和主要内容 | 第16-20页 |
| 1.4.1 本课题的来源 | 第16页 |
| 1.4.2 本课题研究的背景及意义 | 第16-17页 |
| 1.4.3 本课题研究的主要内容 | 第17-20页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第20-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第20-21页 |
| 2.1.2 实验所用引物 | 第21页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第21页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.5 主要培养基和溶液 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 异源基因表达质粒的构建 | 第23-26页 |
| 2.2.2 异源基因表达菌株的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.3 敲除质粒的构建 | 第27-32页 |
| 2.2.4 敲除菌株的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.5 谷氨酸棒杆菌的摇瓶发酵 | 第33页 |
| 2.2.6 谷氨酸棒杆菌的补料分批发酵 | 第33-34页 |
| 2.2.7 菌体生长量、葡萄糖含量、精氨酸浓度等发酵参数的测定 | 第34页 |
| 2.2.8 嘧啶核苷酸转氢酶活性测定 | 第34-35页 |
| 2.2.9 胞内辅酶浓度的测定 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-56页 |
| 3.1 谷氨酸棒杆菌重组菌的构建 | 第36-46页 |
| 3.1.1 异源基因表达菌株的构建 | 第36-37页 |
| 3.1.2 敲除菌株的构建 | 第37-45页 |
| 3.1.3 高产L-精氨酸谷氨酸棒杆菌重组菌的构建 | 第45-46页 |
| 3.2 异源基因表达对L-精氨酸发酵的影响 | 第46-51页 |
| 3.2.1 pntAB的异源表达对菌株合成L-精氨酸的影响 | 第46-49页 |
| 3.2.2 ppnK的异源表达对菌株合成L-精氨酸的影响 | 第49-50页 |
| 3.2.3 pntAB和ppnK串联表达对菌株合成L-精氨酸的影响 | 第50-51页 |
| 3.3 基因敲除对L-精氨酸发酵的影响 | 第51-53页 |
| 3.3.1 argR的敲除对菌株合成L-精氨酸的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.2 farR的敲除对菌株合成L-精氨酸的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.3 ldh的敲除对菌株合成L-精氨酸的影响 | 第53页 |
| 3.4 高产L-精氨酸谷氨酸棒杆菌重组菌的发酵 | 第53-56页 |
| 主要结论和展望 | 第56-58页 |
| 主要结论 | 第56页 |
| 展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录1：实验中所用的引物 | 第65-68页 |
| 附录2：标准曲线 | 第68-70页 |
| NADPH标准曲线 | 第68页 |
| NADP~+标准曲线 | 第68-69页 |
| 葡萄糖标准曲线 | 第69页 |
| L-精氨酸标准曲线 | 第69-70页 |
| 附录3：作者在攻读硕士期间发表的论文 | 第70页 |
