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基于纳米载体的害虫防治新策略

摘要第3-4页
Abstract第4页
英文缩略词表第8-9页
第一章 文献综述第9-21页
    1.1 基于昆虫病毒的生物防治策略应用现状第9-11页
        1.1.1 基于昆虫病毒的生物防治满足绿色植保要求第9-10页
        1.1.2 棉铃虫核型多角体病毒防治害虫的作用机制第10页
        1.1.3 昆虫病毒制剂长远发展中面临的问题第10-11页
    1.2 基于Bt转基因作物的害虫防治策略第11-12页
        1.2.1 Bt蛋白是全球广泛分布的优良生防资源第11-12页
        1.2.2 全球面临严峻的Bt抗药性问题第12页
    1.3 基于高效RNAi的基因功能分析和害虫田间防治第12-15页
        1.3.1 RNAi技术在植物保护中的巨大潜力第12-13页
        1.3.2 昆虫关键基因功能解析为害虫防治奠定理论基础第13-14页
        1.3.3 昆虫的功能基因组快速发展有赖于高效的RNAi技术第14-15页
        1.3.4 RNAi技术的效率受限于dsRNA的递送障碍第15页
    1.4 基于纳米载体的害虫防治新方法第15-20页
        1.4.1 引入纳米载体有望增加病毒DNA对非寄主昆虫的毒力第16页
        1.4.2 引入纳米载体有望促进Bt优良生防资源的长久使用第16-17页
        1.4.3 利用纳米载体递送dsRNA提高RNAi效率第17-20页
    1.5 本研究目的与意义第20-21页
第二章 材料和方法第21-33页
    2.1 实验材料第21页
    2.2 主要仪器第21-22页
    2.3 主要试剂第22-23页
    2.4 培养基、缓冲溶液配方第23-26页
    2.5 实验方法第26-33页
        2.5.1. DNA提取第26页
        2.5.2. dsRNA合成第26-27页
        2.5.3 细胞培养第27-28页
        2.5.4 细胞传代第28页
        2.5.5 细胞的冻存第28-29页
        2.5.6 细胞计数第29页
        2.5.7 供试昆虫培养第29页
        2.5.8 纳米/药物复合体在细胞水平的摄取率第29-30页
        2.5.9 细胞水平的毒性测试第30页
        2.5.10 载体活体水平吸收率第30-31页
        2.5.11 害虫生物测定第31-33页
第三章 结果与分析第33-55页
    3.1 利用纳米基因递送系统携带HaNPV核酸治理非寄主害虫第33-39页
        3.1.1 P2与HaNPV-DNA自发结合形成稳定的复合体第33-35页
        3.1.2 细胞水平摄取分析第35-37页
        3.1.3 P2/HaNPV-DNA复合体在非宿主昆虫中的毒力测试第37-39页
        小结第39页
    3.2 利用纳米蛋白递送系统增强害虫对Bt毒素的敏感性第39-47页
        3.2.1 P2与HaNPV-DNA自发结合形成稳定的P1/Cry1Ab复合体第40-42页
        3.2.2 体外蛋白递送分析第42-44页
        3.2.3 Pl/CrylAb复合体増强害虫对Bt的敏感性第44-45页
        3.2.4 Pl/CrylAb对细胞毒性测试第45-46页
        小结第46-47页
    3.3 基于纳米载体的体壁渗透法干扰大豆蚜基因表达第47-55页
        3.3.1 纳米载体/洗涤剂复合体液滴高效、无创进入大豆蚜体内第47-49页
        3.3.2 纳米载体/洗涤剂复合体穿透体壁进入体腔第49-50页
        3.3.3 纳米载体/洗涤剂复合体被大豆蚜体内重要组织高效吸收第50-52页
        3.3.4 体壁渗透法高效干扰大豆蚜基因第52-53页
            3.3.4.1 dsRNA与G2自发形成复合体第52页
            3.3.4.2 利用体壁渗透法干扰脂肪体合成基因表达并控制大豆蚜种群密度第52-53页
        小结第53-55页
第四章 讨论和总结第55-59页
参考文献第59-68页
致谢第68-69页
个人简历第69页

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