摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
英文缩略词表 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-21页 |
1.1 基于昆虫病毒的生物防治策略应用现状 | 第9-11页 |
1.1.1 基于昆虫病毒的生物防治满足绿色植保要求 | 第9-10页 |
1.1.2 棉铃虫核型多角体病毒防治害虫的作用机制 | 第10页 |
1.1.3 昆虫病毒制剂长远发展中面临的问题 | 第10-11页 |
1.2 基于Bt转基因作物的害虫防治策略 | 第11-12页 |
1.2.1 Bt蛋白是全球广泛分布的优良生防资源 | 第11-12页 |
1.2.2 全球面临严峻的Bt抗药性问题 | 第12页 |
1.3 基于高效RNAi的基因功能分析和害虫田间防治 | 第12-15页 |
1.3.1 RNAi技术在植物保护中的巨大潜力 | 第12-13页 |
1.3.2 昆虫关键基因功能解析为害虫防治奠定理论基础 | 第13-14页 |
1.3.3 昆虫的功能基因组快速发展有赖于高效的RNAi技术 | 第14-15页 |
1.3.4 RNAi技术的效率受限于dsRNA的递送障碍 | 第15页 |
1.4 基于纳米载体的害虫防治新方法 | 第15-20页 |
1.4.1 引入纳米载体有望增加病毒DNA对非寄主昆虫的毒力 | 第16页 |
1.4.2 引入纳米载体有望促进Bt优良生防资源的长久使用 | 第16-17页 |
1.4.3 利用纳米载体递送dsRNA提高RNAi效率 | 第17-20页 |
1.5 本研究目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 材料和方法 | 第21-33页 |
2.1 实验材料 | 第21页 |
2.2 主要仪器 | 第21-22页 |
2.3 主要试剂 | 第22-23页 |
2.4 培养基、缓冲溶液配方 | 第23-26页 |
2.5 实验方法 | 第26-33页 |
2.5.1. DNA提取 | 第26页 |
2.5.2. dsRNA合成 | 第26-27页 |
2.5.3 细胞培养 | 第27-28页 |
2.5.4 细胞传代 | 第28页 |
2.5.5 细胞的冻存 | 第28-29页 |
2.5.6 细胞计数 | 第29页 |
2.5.7 供试昆虫培养 | 第29页 |
2.5.8 纳米/药物复合体在细胞水平的摄取率 | 第29-30页 |
2.5.9 细胞水平的毒性测试 | 第30页 |
2.5.10 载体活体水平吸收率 | 第30-31页 |
2.5.11 害虫生物测定 | 第31-33页 |
第三章 结果与分析 | 第33-55页 |
3.1 利用纳米基因递送系统携带HaNPV核酸治理非寄主害虫 | 第33-39页 |
3.1.1 P2与HaNPV-DNA自发结合形成稳定的复合体 | 第33-35页 |
3.1.2 细胞水平摄取分析 | 第35-37页 |
3.1.3 P2/HaNPV-DNA复合体在非宿主昆虫中的毒力测试 | 第37-39页 |
小结 | 第39页 |
3.2 利用纳米蛋白递送系统增强害虫对Bt毒素的敏感性 | 第39-47页 |
3.2.1 P2与HaNPV-DNA自发结合形成稳定的P1/Cry1Ab复合体 | 第40-42页 |
3.2.2 体外蛋白递送分析 | 第42-44页 |
3.2.3 Pl/CrylAb复合体増强害虫对Bt的敏感性 | 第44-45页 |
3.2.4 Pl/CrylAb对细胞毒性测试 | 第45-46页 |
小结 | 第46-47页 |
3.3 基于纳米载体的体壁渗透法干扰大豆蚜基因表达 | 第47-55页 |
3.3.1 纳米载体/洗涤剂复合体液滴高效、无创进入大豆蚜体内 | 第47-49页 |
3.3.2 纳米载体/洗涤剂复合体穿透体壁进入体腔 | 第49-50页 |
3.3.3 纳米载体/洗涤剂复合体被大豆蚜体内重要组织高效吸收 | 第50-52页 |
3.3.4 体壁渗透法高效干扰大豆蚜基因 | 第52-53页 |
3.3.4.1 dsRNA与G2自发形成复合体 | 第52页 |
3.3.4.2 利用体壁渗透法干扰脂肪体合成基因表达并控制大豆蚜种群密度 | 第52-53页 |
小结 | 第53-55页 |
第四章 讨论和总结 | 第55-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
个人简历 | 第69页 |