摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-9页 |
实验材料 | 第9-11页 |
1 主要试剂及耗材 | 第9页 |
2 实验细胞 | 第9-10页 |
3 主要仪器和设备 | 第10-11页 |
实验方法与步骤 | 第11-20页 |
1 人脐静脉内皮细胞培养 | 第11页 |
1.1 细胞复苏 | 第11页 |
1.2 细胞传代 | 第11页 |
2 细胞转染 | 第11-13页 |
3 实时荧光定量PCR检测MALAT1表达水平 | 第13-15页 |
3.1 细胞总RNA的提取 | 第13页 |
3.2 逆转录反应 | 第13-14页 |
3.3 实时荧光定量PCR | 第14-15页 |
4 Westernblot检测细胞中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、RHEB、p70S6K、p-p70S6K、LC3蛋白的表达 | 第15-19页 |
4.1 主要试剂及配方 | 第15-16页 |
4.2 细胞总蛋白的提取 | 第16页 |
4.3 BCA法进行蛋白浓度测定 | 第16-17页 |
4.4 SDS-PAGE电泳 | 第17-19页 |
5 免疫荧光染色法观察LC3的点状聚集 | 第19页 |
6 透射电镜观察自噬体 | 第19页 |
7 统计学处理 | 第19-20页 |
实验结果 | 第20-27页 |
1 Ox-LDL激活脐静脉内皮细胞自噬 | 第20-21页 |
2 Ox-LDL上调HUVECs中MALAT1表达 | 第21页 |
3 Ox-LDL通过PI3K/AKT通路调控脐静脉内皮细胞自噬 | 第21-22页 |
4 过表达MALAT1抑制PI3K/AKT通路上调ox-LDL诱导的HUVECs自噬 | 第22-24页 |
5 下调MALAT1激活PI3K/AKT通路抑制ox-LDL诱导的HUVECs自噬 | 第24-27页 |
讨论 | 第27-29页 |
结论 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-33页 |
综述 | 第33-49页 |
综述参考文献 | 第42-49页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |