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Microglia/NLRP3/IL-1β通路在视网膜慢性光损伤中的作用研究

中文摘要第6-9页
Abstract第9-12页
前言第13-20页
    一、AMD的流行病学概述第13-14页
    二、AMD的分型与治疗进展第14-15页
    三、多种因素参与AMD的病理过程第15-16页
    四、光损伤是AMD的重要环境致病因素第16-17页
    五、小胶质细胞在AMD慢性光损伤中的作用尚未定论第17-18页
    六、炎性小体在视网膜免疫损伤中的作用渐受重视第18-20页
第一部分 慢性低能量蓝光诱导C57BL/6小鼠视网膜光损伤的实验研究第20-37页
    一、实验材料第20-24页
        1.实验材料、试剂第20-21页
        2.主要仪器第21页
        3.实验动物第21-22页
        4.主要光照设备搭建配置第22-24页
    二、实验方法第24-29页
        1.实验分组第24页
        2.实验动物的准备第24-25页
        3.动物麻醉第25页
        4.视网膜闪光视网膜电图记录(Flashelectroretinogram,F-ERG)第25页
        5.小鼠眼球取材第25-26页
        6.石蜡切片制备第26页
        7.冰冻切片制备第26-27页
        8.HE染色和视网膜厚度测量第27-28页
        9.IBA-1免疫荧光染色第28-29页
        10.统计学分析第29页
    三、实验结果第29-37页
        1.蓝光照射C57BL/6小鼠3月后F-ERG波幅下降第29-32页
        2.蓝光照射C57BL/6小鼠3月后视网膜外核层厚度变薄第32-35页
        3.蓝光照射C57BL/6小鼠1月、3月后视网膜内小胶质细胞的活化第35-37页
第二部分 CCR2基因敲除对慢性低能量蓝光诱导的小鼠视网膜光损伤的保护作用..第37-55页
    一、实验材料第37-40页
        1.实验材料、试剂第37-38页
        2.主要仪器第38页
        3.实验动物第38-39页
        4.主要光照设备搭建配置第39-40页
    二、实验方法第40-47页
        1.实验分组第40页
        2.实验动物的准备第40-41页
        3.动物麻醉第41页
        4.PCR基因鉴定第41-42页
        5.视网膜闪光视网膜电图记录(Flashelectroretinogram,F-ERG)第42-43页
        6.小鼠眼球取材第43页
        7.石蜡切片制备第43-44页
        8.冰冻切片制备第44页
        9.HE染色和视网膜厚度测量第44-45页
        10.TUNE视网膜细胞凋亡检测第45-46页
        11.IBA-1免疫荧光染色第46-47页
        12.统计学分析第47页
    三、实验结果第47-55页
        1.CCR2基因敲除降低低能量蓝光照后小鼠视网膜内小胶质细胞的活化量第47-50页
        2.CCR2基因敲除保护低能量蓝光照导致的小鼠视网膜功能损伤第50-52页
        3.CCR2基因敲除保护低能量蓝光照导致的小鼠视网膜形态损伤第52-53页
        4.CCR2基因敲除保护低能量蓝光照导致的小鼠视网膜细胞凋亡第53-55页
第三部分 小胶质细胞通过NLRP3途径介导小鼠视网膜光损伤的机制研究第55-68页
    一、实验材料第55-58页
        1.实验材料、试剂第55-56页
        2.主要仪器第56-57页
        3.实验动物第57页
        4.主要光照设备搭建配置第57-58页
    二、实验方法第58-63页
        1.实验分组第58页
        2.实验动物的准备第58-59页
        3.动物麻醉第59页
        4.小鼠眼球取材第59页
        5.冰冻切片制备第59-60页
        6.IBA-1、NLRP3、IL-1β免疫荧光染色第60-61页
        7.Westernblot第61-63页
        8.统计学分析第63页
    三、实验结果第63-68页
        1.CCR2基因敲除降少视网膜内IBA-1、NLRP3的共染第63-64页
        2.CCR2基因敲除降少视网膜内NLRP3、IL-1β的表达第64-65页
        3.CCR2基因敲除降低视网膜内NLRP3相关炎症因子的表达第65-68页
讨论第68-72页
参考文献第72-81页
文献综述第81-103页
    REFERENCES第96-103页
附录第103-105页
攻读学位期间取得学术成果第105-107页
致谢第107-108页

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