| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第1章 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 猪脑心肌炎病毒 | 第11-16页 |
| 1.1.1 EMCV基因组结构 | 第11-12页 |
| 1.1.2 EMCV基因组编码蛋白 | 第12-14页 |
| 1.1.3 EMCV流行病学和宿主范围 | 第14-15页 |
| 1.1.4 EMCV的公共卫生学意义 | 第15-16页 |
| 1.2 RPS20生物学特性及其功能 | 第16-18页 |
| 1.2.1 核糖体蛋白 | 第16-17页 |
| 1.2.2 RPS20的研究概况 | 第17-18页 |
| 1.3 单克隆抗体技术 | 第18-19页 |
| 1.3.1 单克隆抗体的原理 | 第18-19页 |
| 1.3.2 单克隆抗体的应用 | 第19页 |
| 1.4 酵母双杂交系统 | 第19-21页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 EMCVVP1蛋白单克隆抗体的制备 | 第22-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 毒株、细胞、载体、质粒和实验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.4 培养基、抗生素和缓冲液的配制 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 质粒转化实验 | 第23-24页 |
| 2.2.2 His-VP1蛋白表达、纯化与鉴定 | 第24-26页 |
| 2.2.3 VP1多克隆抗体的制备 | 第26页 |
| 2.2.4 VP1多克隆抗体的特异性鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.5 VP1单克隆抗体的制备 | 第27-29页 |
| 2.2.6 腹水的制备 | 第29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-32页 |
| 2.3.1 VP1蛋白的表达与纯化 | 第29-30页 |
| 2.3.2 VP1多克隆抗体的制备与鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.3 VP1单克隆抗体的制备与鉴定 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第3章 EMCVVP1蛋白与宿主蛋白RPS20相互作用 | 第34-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 细胞、菌株、载体和实验动物 | 第34页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 3.1.3 主要试剂配制 | 第34-35页 |
| 3.2 试验方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 酵母双杂交筛选试验及共转化试验 | 第35页 |
| 3.2.2 免疫共沉淀试验(Co-IP)验证VP1与RPS20蛋白相互作用 | 第35-36页 |
| 3.2.3 激光共聚焦检测VP1与RPS20共定位 | 第36页 |
| 3.2.4 过度表达RPS20对EMCV病毒复制影响 | 第36-37页 |
| 3.3 实验结果 | 第37-41页 |
| 3.3.1 利用酵母双杂交方法筛选与EMCVVP1相互作用的宿主蛋白 | 第37-38页 |
| 3.3.2 酵母共转化试验验证VP1蛋白与RPS20蛋白相互作用 | 第38页 |
| 3.3.3 过度表达的VP1和RPS20相互作用 | 第38-39页 |
| 3.3.4 内源性RPS20与VP1相互作用 | 第39-40页 |
| 3.3.5 过表达RPS20后对EMCV病毒复制的影响 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第4章 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
