| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 文献回顾 | 第18-41页 |
| 第一部分GMBP1-GRP78复合物内化入耐药细胞及其机制研究 | 第41-59页 |
| 引言 | 第41页 |
| 1 材料 | 第41-44页 |
| 1.1 细胞株 | 第41-42页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第42-44页 |
| 2 方法 | 第44-51页 |
| 2.1 细胞培养 | 第44-45页 |
| 2.2 免疫荧光检测GRP78在耐药细胞的荧光定位 | 第45-46页 |
| 2.3 流式细胞技术检测FITC-GMBP1与耐药细胞的结合能力 | 第46页 |
| 2.4 细胞转染 | 第46-47页 |
| 2.5 细胞总蛋白样品制备 | 第47页 |
| 2.6 Western blot方法检测转染后的细胞中GRP78蛋白质的表达量 | 第47-48页 |
| 2.7 RT-PCR方法检测转染后的细胞中GRP78 m RNA的表达量 | 第48-50页 |
| 2.8 免疫荧光观察下调GRP78表达后GMBP1内化入耐药细胞的变化 | 第50页 |
| 2.9 激光共聚焦观察GMBP1内化机制 | 第50页 |
| 2.10 干预实验 | 第50-51页 |
| 2.11 统计学处理 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-57页 |
| 3.1 免疫荧光观察GRP78在胃癌耐药细胞的亚细胞定位 | 第51-52页 |
| 3.2 流式细胞分析结果 | 第52-53页 |
| 3.3 Western blot方法及RT-PCR方法检测转染效率 | 第53-54页 |
| 3.4 下调GRP78表达后短肽GMBP1内化入耐药细胞的变化 | 第54-55页 |
| 3.5 激光共聚焦技术研究GMBP1内化入细胞的机制 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 第二部分 基于ITRAQ技术筛选GMBP1作用胃癌耐药细胞后多药耐药相关蛋白 | 第59-71页 |
| 引言 | 第59-60页 |
| 1 材料 | 第60-61页 |
| 1.1 细胞系 | 第60页 |
| 1.2 主要试剂和耗材 | 第60页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第60-61页 |
| 2 方法 | 第61-63页 |
| 2.1 细胞培养 | 第61页 |
| 2.2 i TRAQ蛋白质提取和定量 | 第61-62页 |
| 2.3 丙酮沉淀 | 第62页 |
| 2.4 半胱氨酸封闭 | 第62页 |
| 2.5 蛋白质酶解 | 第62页 |
| 2.6 i TRAQ试剂进行标记 | 第62-63页 |
| 2.7 肽段分离和鉴定 | 第63页 |
| 2.8 生物信息学分析 | 第63页 |
| 3 结果 | 第63-68页 |
| 3.1 差异蛋白的蛋白质组学分析 | 第63-65页 |
| 3.2 差异蛋白质GO功能聚类分析 | 第65-67页 |
| 3.3 差异蛋白质的KEGG信号通路分析 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| 第三部分 初步探讨GMBP1及其受体GRP78逆转胃癌耐药的分子机制 | 第71-79页 |
| 引言 | 第71页 |
| 1 材料 | 第71-73页 |
| 1.1 细胞株 | 第71页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第71-73页 |
| 2 方法 | 第73-74页 |
| 2.1 细胞培养 | 第73页 |
| 2.2 Western blot蛋白质提取和定量 | 第73页 |
| 2.3 Western blot检测差异蛋白的表达水平及耐药和凋亡相关分子表达 | 第73-74页 |
| 3 结果 | 第74-76页 |
| 3.1 GMBP1作用耐药细胞后差异蛋白EIF4E和CTBP2表达水平的鉴定 | 第74-75页 |
| 3.2 GMBP1作用耐药细胞后GRP78、MDR1及凋亡相关分子的表达情况 ..· 704 讨论 | 第75-76页 |
| 4 讨论 | 第76-79页 |
| 小结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-94页 |
| 附录 | 第94-106页 |
| 附录 1 | 第94-98页 |
| 附录 2 | 第98-104页 |
| 附录 3 | 第104-105页 |
| 附录 4 | 第105-106页 |
| 个人简历和研究成果 | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108页 |
