摘要 | 第5-11页 |
Abstract | 第11-16页 |
英文缩略词表 | 第19-20页 |
1 前言 | 第20-23页 |
1.1 旋毛虫 | 第20页 |
1.2 旋毛虫侵入机制研究进展 | 第20-21页 |
1.3 RNA干扰技术 | 第21页 |
1.4 Nudix水解酶 | 第21-22页 |
1.5 研究意义 | 第22-23页 |
2 实验材料 | 第23-26页 |
2.1 主要试剂 | 第23-24页 |
2.2 主要仪器 | 第24-25页 |
2.3 材料 | 第25-26页 |
3 实验方法及步骤 | 第26-49页 |
3.1 技术路线 | 第26-27页 |
3.2 TsNd基因siRNA设计与合成 | 第27页 |
3.3 TsNd基因dsRNA设计与合成 | 第27-34页 |
3.4 旋毛虫肌幼虫的收集 | 第34页 |
3.5 将siRNA和dsRNA导入旋毛虫肌幼虫 | 第34-36页 |
3.6 Real-time PCR检测TsNd基因转录水平的变化 | 第36-40页 |
3.7 Weatern blotting检测TsNd基因表达水平的变化 | 第40-46页 |
3.8 RNA干扰的基因特异性 | 第46页 |
3.9 TsNd基因沉默对肌幼虫体外存活及侵入IECs的影响 | 第46-47页 |
3.10 TsNd基因沉默对侵入肠粘膜及其发育和生殖力的影响 | 第47-48页 |
3.11 数据处理 | 第48-49页 |
4 结果 | 第49-62页 |
4.1 质粒pGEM-T-TsNd和pMAL-C2X-Tspst的提取 | 第49页 |
4.2 dsRNA体外转录模板(即含T7 启动子PCR产物) | 第49-50页 |
4.3 体外转录合成dsRNA | 第50-51页 |
4.4 将siRNA和dsRNA导入到旋毛虫肌幼虫体内 | 第51页 |
4.5 dsRNA对TsNd表达的影响 | 第51-53页 |
4.6 siRNA对TsNd表达的影响 | 第53-55页 |
4.7 RNA干扰的基因特异性 | 第55-56页 |
4.8 TsNd基因沉默后肌幼虫体外存活及侵入IECs情况 | 第56-59页 |
4.9 TsNd基因沉默后对幼虫侵入肠粘膜、发育及雌虫生殖力的影响 | 第59-62页 |
5 讨论 | 第62-64页 |
5.1 利用RNA干扰技术沉默TsNd基因的表达 | 第62页 |
5.2 TsNd在旋毛虫侵入宿主过程中所起作用的分析 | 第62-64页 |
6 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-68页 |
综述RNA干扰技术在寄生虫基因功能研究中的应用 | 第68-80页 |
参考文献 | 第76-80页 |
个人简历 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |