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应用RNA干扰技术对旋毛虫Nudix水解酶基因功能的研究

摘要第5-11页
Abstract第11-16页
英文缩略词表第19-20页
1 前言第20-23页
    1.1 旋毛虫第20页
    1.2 旋毛虫侵入机制研究进展第20-21页
    1.3 RNA干扰技术第21页
    1.4 Nudix水解酶第21-22页
    1.5 研究意义第22-23页
2 实验材料第23-26页
    2.1 主要试剂第23-24页
    2.2 主要仪器第24-25页
    2.3 材料第25-26页
3 实验方法及步骤第26-49页
    3.1 技术路线第26-27页
    3.2 TsNd基因siRNA设计与合成第27页
    3.3 TsNd基因dsRNA设计与合成第27-34页
    3.4 旋毛虫肌幼虫的收集第34页
    3.5 将siRNA和dsRNA导入旋毛虫肌幼虫第34-36页
    3.6 Real-time PCR检测TsNd基因转录水平的变化第36-40页
    3.7 Weatern blotting检测TsNd基因表达水平的变化第40-46页
    3.8 RNA干扰的基因特异性第46页
    3.9 TsNd基因沉默对肌幼虫体外存活及侵入IECs的影响第46-47页
    3.10 TsNd基因沉默对侵入肠粘膜及其发育和生殖力的影响第47-48页
    3.11 数据处理第48-49页
4 结果第49-62页
    4.1 质粒pGEM-T-TsNd和pMAL-C2X-Tspst的提取第49页
    4.2 dsRNA体外转录模板(即含T7 启动子PCR产物)第49-50页
    4.3 体外转录合成dsRNA第50-51页
    4.4 将siRNA和dsRNA导入到旋毛虫肌幼虫体内第51页
    4.5 dsRNA对TsNd表达的影响第51-53页
    4.6 siRNA对TsNd表达的影响第53-55页
    4.7 RNA干扰的基因特异性第55-56页
    4.8 TsNd基因沉默后肌幼虫体外存活及侵入IECs情况第56-59页
    4.9 TsNd基因沉默后对幼虫侵入肠粘膜、发育及雌虫生殖力的影响第59-62页
5 讨论第62-64页
    5.1 利用RNA干扰技术沉默TsNd基因的表达第62页
    5.2 TsNd在旋毛虫侵入宿主过程中所起作用的分析第62-64页
6 结论第64-65页
参考文献第65-68页
综述RNA干扰技术在寄生虫基因功能研究中的应用第68-80页
    参考文献第76-80页
个人简历第80-81页
致谢第81页

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