| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第15-34页 |
| 1.1 课题来源及研究目的和意义 | 第15页 |
| 1.2 肾癌的特点及其分子机制 | 第15-19页 |
| 1.2.1 肾癌的流行病学及细胞病理学特点 | 第16-17页 |
| 1.2.2 肾癌的分子生物学特征 | 第17-19页 |
| 1.3 AIF的结构与基本功能 | 第19-28页 |
| 1.3.1 AIF的基本结构、功能域和异构体 | 第20-22页 |
| 1.3.2 AIF的相互作用因子 | 第22-23页 |
| 1.3.3 AIF与细胞程序性死亡 | 第23-26页 |
| 1.3.4 AIF与肿瘤 | 第26-28页 |
| 1.4 STK3结构、功能与研究进展 | 第28-31页 |
| 1.4.1 STK3基本结构 | 第28-29页 |
| 1.4.2 STK3功能及在癌症中的研究近况 | 第29-31页 |
| 1.5 主要研究内容和技术路线 | 第31-34页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第31-33页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第33-34页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第34-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-39页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第34页 |
| 2.1.2 菌株 | 第34页 |
| 2.1.3 临床病理组织 | 第34页 |
| 2.1.4 引物合成 | 第34-35页 |
| 2.1.5 质粒载体 | 第35页 |
| 2.1.6 抗体 | 第35-36页 |
| 2.1.7 其他试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.8 常用缓冲液 | 第37-39页 |
| 2.1.9 实验仪器 | 第39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-50页 |
| 2.2.1 重组体构建 | 第39-40页 |
| 2.2.2 肾癌组织和细胞系总蛋白的提取 | 第40页 |
| 2.2.3 肾癌组织和细胞系基因组DNA提取 | 第40-41页 |
| 2.2.4 荧光原位杂交技术 | 第41-43页 |
| 2.2.5 Southern Blot杂交 | 第43-44页 |
| 2.2.6 癌症表达谱阵列分析 | 第44-45页 |
| 2.2.7 基于亚硫酸氢盐处理的甲基化分析 | 第45-46页 |
| 2.2.8 培养细胞的DNA甲基化酶抑制剂处理 | 第46页 |
| 2.2.9 GST融合蛋白pull-down技术 | 第46-48页 |
| 2.2.10 谱鉴定 | 第48页 |
| 2.2.11 免疫共沉淀 | 第48-49页 |
| 2.2.12 免疫荧光技术 | 第49页 |
| 2.2.13 基于Annexin V-FITC/PI双染的细胞凋亡分析 | 第49-50页 |
| 2.2.14 统计学处理 | 第50页 |
| 2.3 本章小结 | 第50-51页 |
| 第3章 AIF在肾癌中的表达分析 | 第51-65页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 AIF在不同组织类型癌症中的表达分析 | 第51-54页 |
| 3.3 AIF在肾癌临床样品中表达显著性下调 | 第54-62页 |
| 3.3.1 肾癌组织样品AIF免疫印记分析 | 第54-55页 |
| 3.3.2 肾癌组织样品AIF免疫组化分析 | 第55-62页 |
| 3.4 AIF在肾癌细胞系中的表达检测 | 第62-64页 |
| 3.5 本章小结 | 第64-65页 |
| 第4章 在肾癌中AIF表达下调的机制分析 | 第65-83页 |
| 4.1 引言 | 第65页 |
| 4.2 肾癌组织基因组DNA中AIF缺失分析 | 第65-73页 |
| 4.2.1 肾癌组织中AIF基因组DNASouthern Blot杂交分析 | 第66-70页 |
| 4.2.2 肾癌组织中AIF基因缺失的FISH技术分析 | 第70-73页 |
| 4.3 AIF启动子区DNA甲基化分析 | 第73-81页 |
| 4.3.1 肾癌组织中AIF启动子区 450 bp范围甲基化分析 | 第73-75页 |
| 4.3.2 肾癌组织中AIF启动子区 1500 bp范围甲基化分析 | 第75-78页 |
| 4.3.3 DNA甲基转移酶抑制剂对肾癌细胞AIF表达的影响 | 第78-81页 |
| 4.4 本章小结 | 第81-83页 |
| 第5章 在肾癌细胞中AIF的相互作用因子分析 | 第83-95页 |
| 5.1 引言 | 第83页 |
| 5.2 AIF重组体的构建 | 第83-84页 |
| 5.3 AIF融合蛋白的GST pull-down实验 | 第84-88页 |
| 5.4 AIF相互作用蛋白的质谱分析 | 第88-91页 |
| 5.5 AIF与STK3的免疫共沉淀分析 | 第91-93页 |
| 5.6 本章小结 | 第93-95页 |
| 第6章 AIF对肾癌细胞增殖和凋亡的影响 | 第95-111页 |
| 6.1 引言 | 第95页 |
| 6.2 AIF过表达对肾癌细胞中信号通路的影响 | 第95-98页 |
| 6.3 过表达AIF促进肾癌细胞凋亡 | 第98-103页 |
| 6.4 AIF核转位引起肾癌细胞凋亡 | 第103-106页 |
| 6.5 AIF表达抑制对细胞增殖的影响 | 第106-109页 |
| 6.6 本章小结 | 第109-111页 |
| 结论 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-124页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第124-126页 |
| 致谢 | 第126-127页 |
| 个人简历 | 第127页 |
