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玉米响应高温和干旱复合胁迫的数字基因表达谱分析及ZmsHSP17.7基因的功能分析

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-20页
    1.1 高温和干旱对植物的危害第12-16页
        1.1.1 高温的危害第12-14页
        1.1.2 干旱的危害第14-15页
        1.1.3 高温和干旱的互作第15-16页
    1.2 植物对高温及干旱的适应机制第16-18页
        1.2.1 渗透调节第16-17页
        1.2.2 活性氧清除第17-18页
        1.2.3 蛋白质量控制第18页
        1.2.4 植物激素调控第18页
    1.3 本研究的目的和意义第18-20页
2 实验材料与方法第20-34页
    2.1 实验材料第20-21页
    2.2 实验方法第21-34页
        2.2.1 游离脯氨酸的测定第21页
        2.2.2 Trizol法提玉米总RNA第21页
        2.2.3 高通量测序分析第21-22页
            2.2.3.1 试验材料处理第21页
            2.2.3.2 基因表达谱测序第21-22页
            2.2.3.3 基因功能注释第22页
        2.2.4 基因序列分析第22-23页
        2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备第23页
        2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的转化第23页
        2.2.7 基因克隆载体的构建第23-25页
            2.2.7.1 RT-PCR扩增第23-24页
            2.2.7.2 RT-PCR反应程序第24页
            2.2.7.3 扩增产物的电泳回收第24-25页
            2.2.7.4 目的基因与克隆载体的连接第25页
            2.2.7.5 重组子的验证第25页
        2.2.8 大肠杆菌质粒DNA的提取第25-26页
        2.2.9 植物重组表达载体的构建及其鉴定第26-27页
        2.2.10 农杆菌感受态细胞的制备第27页
        2.2.11 质粒向农杆菌转化(冻融法)第27页
        2.2.12 农杆菌介导的花序浸染法转化拟南芥第27-28页
        2.2.13 CTAB法提取基因组DNA第28页
        2.2.14 洋葱表皮GFP亚细胞定位第28-30页
            2.2.14.1 GFP融合植物表达载体的构建第28-29页
            2.2.14.2 基因枪微弹的准备第29页
            2.2.14.3 基因枪转化第29页
            2.2.14.4 荧光观察第29-30页
        2.2.15 DIG northern杂交第30-34页
            2.2.15.1 试验材料处理第30页
            2.2.15.2 在含有甲醛的凝胶上进行RNA电泳第30页
            2.2.15.3 RNA转膜和固定第30-31页
            2.2.15.4 探针制备第31页
            2.2.15.5 DIG标记有效性检测第31-33页
            2.2.15.6 杂交第33-34页
3 结果与分析第34-58页
    3.1 玉米响应高温、干旱及复合胁迫的表达谱分析第34-48页
        3.1.1 测序质量分析第34-35页
        3.1.2 Unique read拷贝数和表达量的分布第35页
        3.1.3 差异基因表达分布第35-38页
        3.1.4 差异表达基因的GO功能分类和显著性富集分析第38-40页
        3.1.5 差异表达基因的KEGG代谢分析第40-44页
        3.1.6 胁迫诱导高水平表达基因的功能分析第44-48页
    3.2 小分子热激蛋白ZmsHSPl7.7克隆及功能鉴定第48-58页
        3.2.1 玉米ZmsHSP17.7基因的克隆第48-50页
        3.2.2 ZmsHSP17.7序列的相似性和进化分析第50-52页
        3.2.3 ZmsHSP17.7蛋白的亚细胞定位分析第52页
        3.2.4 ZmsHSP17.7基因的表达特性分析第52-53页
        3.2.5 异源超表达ZmsHSP17.7基因拟南芥的获得第53-55页
        3.2.6 超表达ZmsHSP17.7基因提高转基因植株抗热性第55-56页
        3.2.7 超表达ZmsHSP17.7基因提高转基因植株抗旱性第56页
        3.2.8 超表达ZmsHSP17.7基因提高转基因植株抗盐性第56-58页
4 讨论第58-62页
5 结论第62-63页
参考文献第63-71页
致谢第71-72页
攻读学位期间发表论文情况第72页

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